• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권1호
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• pp.85-91
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• 2001

To construct an efficient Bacillus subtilis expression vector, strong promoters were isolated from the chromosomal DNA libraries of Clostridium acetobutylicum ATCC 4259, Thermoactinomyces sp. E79, and Bacillus thermoglucosidasius KCTC 3400. The $P_{C27}$ promoter cloned from the clostridial chromosmal DNA showed a 5-fold higher promoter strength than the $P_{SP02}$ promoter in the expression of the cat gene, and its sequence was estimated as an upstream region of the predicted hypothetical gene (tet-R family bacterial transcription regulator gene) in C. acetobutylicum. As a promoter element, $P_{C27}$ exhibited putative nucleotide sequences that can bind with bacterial RNAP and the 3'end of the 16S rRNA just upstream of the start codon. In addition, the promoter activity of $P_{C27}$ was distinctively repressed in the presence of glucose. Using $P_{C27}$ as the promoter element, a glucose controllable B. subtilis expression vector was constructed and the lipase gene from Staphylococcus haemolyticus KCTC 8957P was expressed in B. subtilis. When compared with the lipase expression by the T7 promoter induced by IPTG in E. coli, the $P_{C27}$ promoter showed about a 1.5-fold higher expression level in B. subtilis than that without induction.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제9권2호
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• pp.91-97
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• 1981

고온균중에서 amylase의 생산능이 우수한 Bacillus sp. Y-127을 토양에서 분리, 선정하고 다음과 같은 실험결과를 얻었다. 1. Amylase 생산의 최적배양조건은 nutrient broth 0.8% (w/v), soluble starch 2 % (w/v), urea 0.2 % (w/v, N기준), MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.02 % (w/v, Mg기준), $K_2$HPO$_4$ 0.02 % (w/v, P기준), yeast extract 0.2 % (w/v), 6$0^{\circ}C$, pH7.0이었다. 2. Amylase를 (NH$_4$)$_2$SO$_4$침전, 투석, Sephadex G-150 column chromatography 및 Sephadex G-150 column rechromatography를 통해 정제한 결과 123배의 비활성 증가를 볼 수 있었다. 3. Amylase의 pH 안정성은 pH 4.0에서 7.0 사이였으며, 온도에 따른 효소의 불활성도는 온도가 증가함에 따라 증대되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제44권3호
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• pp.370-375
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• 2016

가정식 된장에서 mannanase 생산균으로 분리된 Bacillus sp. YB-1401와 B. amyloliquefaciens YB-1402로부터 2개의 xylanase 유전자가 대장균으로 클로닝 되었으며 그 염기서열이 결정되었다. 두 xylanase 유전자는 213개 아미노산 잔기의 단백질을 코드하는 642 nucleotides로 동일하게 구성되었다. Xyn1401과 Xyn1402로 명명된 YB-1401과 YB-1402 xylanase의 아미노산 배열은 127번째 잔기인 Asn과 Lys을 제외하고는 모두 동일하였고, glycosyl hydrolase family 11에 속하는 xylanase의 아미노산 배열과 상동성이 높았다. 두 효소의 signal peptide는 SignalP4.1 프로그램에 의해 아미노 말단의 28 잔기 배열로 동일하게 예측되었다. 두 효소는 91−94%가 재조합 대장균의 배양상등액에 존재하였으므로 대장균에서 효과적으로 분비되는 것으로 판단되었다. Xyn1401과 Xyn1402의 최적 반응조건은 50℃와 pH 6.0, 55℃와 pH 6.5로 각각 달랐으며 이로 보아 오직 한 개의 아미노 잔기의 차이가 온도와 pH에 따른 효소 활성에 영향을 미치는 것으로 확인되었다. 또한 두 효소는 열안정성도 서로 약간 차이가 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제52권2호
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• pp.177-181
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• 2014

Cockroaches are abundant in Nigeria and are seen to harbour an array of pathogens. Environmental and sanitary conditions associated with demographic/socio-economic settings of an area could contribute to the prevalence of disease pathogens in cockroaches. A total of 246 cockroaches (Periplaneta americana) in urban (Benin, n=91), semi-urban (Ekpoma, n=75) and rural (Emuhi, n=70) settings in Edo State, Nigeria were collected within and around households. The external body surfaces and alimentary canal of these cockroaches were screened for bacterial, fungal, and parasitological infections. Bacillus sp. and Escherichia coli were the most common bacteria in cockroaches. However, Enterococcus faecalis could not be isolated in cockroaches trapped from Ekpoma and Emuhi. Aspergillus niger was the most prevalent fungus in Benin and Ekpoma, while Mucor sp. was predominant in Emuhi. Parasitological investigations revealed the preponderance of Ascaris lumbricoides in Benin and Emuhi, while Trichuris trichura was the most predominant in Ekpoma. The prevalence and burden of infection in cockroaches is likely to be a reflection of the sanitary conditions of these areas. Also, cockroaches in these areas making incursions in homes may increase the risk of human infections with these disease agents.

• 한국수산과학회지
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• 제28권3호
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• pp.347-353
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• 1995

훈제 굴 기름담금 통조림은 우리나라의 대표적인 수출용 수산물 통조림이지만, 가열살균공정의 기준이 정립되어 있지 않아서 생산공정에서 과잉열처리와 그에 따른 에너지의 낭비 및 품질저하를 피하지 못하고 있다. 따라서 본 연구에서는 가열살균공정에서의 에너지 소비와 제품의 미생물학적 안전성을 최적화하고자 하였다. 원료 생굴에서 검출된 대부분의 미생물은 증식속도가 빠르고 부패력이 강한 것이었다. 정상적인 전처리 후에 $110^{\circ}C$에서 Fo-값 5.92min으로 살균한 훈제 굴 기름담금 통조림에서는 장기 저장중에도 미생물이 전혀 검출되지 않았다. 따라서 훈제 굴 기름담금 통조림의 Fo-값으로는 6.0min 정도가 적당한 것으로 판단되었다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제21권2호
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• pp.91-97
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• 1997

In order to elucidate the mechanism of red-colored phenomena(RCP) in ginseng(Panax ginseng C.A. Meyer), distribution of inorganic elements of ginseng root and its surrounding soil, and microflora in the soil were investigated. Red brown colored-substances were accumulated in the cell wall of epidermis at early stage of red-colored ginseng (RCG). Cell wall of the late stage of RCG was disordered and microorganisms were shown in the disordered cell wall. Al, Si and Fe contents among inorpanic elements in the epidermis of RCG were higher at two or three times than that of healthy ginseng. On the other hand, K content was higher at three times in healthy ginseng than that of RCG. Especially, Fe content was higher at three times in lateral roots of RCG than that of healthy ginseng. Total 21 strains of microorganisms were isolated on the 523 medium from surface soil, surrounding soil of both healthy and RCG, and RCG. Six strains of microorganisms among them were resistant to 2 mM Fe. Two species in Bacillus app. and Lactobacillus app. , and one species in Micrococcus sp. and Npisseria sp. respectively were identified. It seemed that RCP was closely related with the distribution and uptake of inorganic elements, was also correlated Fe-independent metabolism of microorganisms.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권4호
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• pp.549-554
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• 2006

To standardize a manufacturing method and improve the quality of traditional kochujang, eight-types of meju with different shapes (brick, grain) were prepared using Aspergillus oryzae (A.o) or Aspergillus sojae (A.s) alone or in combination with Bacillus subtilis (B.s). The physicochemical characteristics and enzyme activities of the various meju were compared during fermentation for 12 days at $28^{\circ}C$. The moisture content of both the brick- and grain-shaped meju were gradually decreased from an initial content of 50.47 to 54.89% to a content of 12.91 to 16.25% on day 12 of fermentation. The neutral protease activities of the brick-shaped meju ranged from $1.19{\pm}0.12$ to $1.25{\pm}0.28\;unit/mL$, and were similar for all treatments. The ${\alpha}$-amylase activities in A.s+B.s treatment of brick-shaped and grain-shaped meju were the highest, $11{\pm}0.6$ and $9{\pm}0.7\;unit/mL$, respectively. The ${\beta}$-amylase activities ranged from $1.53{\pm}0.01$ to $1.56{\pm}0.02\;unit/mL$, and were similar for all treatments. The amino type nitrogen content of A.o+B.s brick-shaped meju was the highest, $0.39{\pm}0.03%$. We confirmed that the brick-shaped meju prepared with A. oryzae and B. subtilis could be used to prepare traditional kochujang to improve the quality of the product.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제21권6호
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• pp.866-877
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• 2014

전통발효식품으로부터 분리한 발효능이 우수한 미생물과 기능성이 밝혀진 농특산 향토자원을 활용한 새로운 기능성 장류를 개발하고자 하였다. 꾸지뽕 열매를 A. oryzae koji, Lactobacillus 6종 및 Bacillus 2종에 대하여 발효시킨 결과, B. licheniformis SCDB 1234 균주가 kaempferol 함량을 $9.54{\mu}g/g$에서 $217.04{\mu}g/g$을 약 22배 증강시켜 최종 발효균주로 선발되었다. 꾸지뽕 열매를 선발균주를 활용하여 발효한 발효물 20배 희석액의 DPPH 항산화 활성은 대조구인 BHA, BHT의 92~99 ppm 농도와 유사한 활성을 보였고, tyrosinase 저해 활성도 arbutin이나 kojic acid의 95 ppm과 90 ppm과 같은 높은 저해 활성을 보였다. 꾸지뽕 열매 발효물을 첨가한 된장을 개발하여 유기산, 유리당 및 유리 아미노산을 분석하였다. 전반적으로 꾸지뽕 열매 발효물을 첨가하지 않은 장류와 유의적인 차이점을 보이진 않았다. 꾸지뽕 열매 발효물과 개발한 된장의 pancreatic lipase 저해활성을 측정하였다. 발효물의 경우에는 발효전보다 발효후에 더 높은 80% 이상의 높은 저해능을 보여주었다. 개발한 된장은 숙성전 된장이 숙성후 된장에 비해 더 높은 저해능을 보여주었다. 항당뇨 효과로 AGI활성을 분석한 결과, 꾸지뽕 열매는 발효전보다 발효후에 활성이 높게 측정되었고, 꾸지뽕 열매 발효액 10%를 첨가한 숙성전 된장의 AGI활성은 $84.89{\pm}0.08%$, 숙성후 된장은 $91.25{\pm}0.04%$를 나타내었다. 결론적으로 꾸지뽕 열매의 발효물의 생리활성 및 항산화 활성은 발효를 통하여 상승함을 보여주었고, 새로운 건강기능성 식품 개발에 활용가능성이 높은 잠재적 소재임을 보여준다.

• 대한방사선기술학회지:방사선기술과학
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• 제31권3호
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• pp.229-237
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• 2008

목적 : 검사실별 IP카세트와 테이블의 미생물 수와 세균학적 오염도를 알코올과 소독제가 포함된 티슈를 사용 전 후로 나누어 동정한 후 통계적으로 검정을 실시하여 영상의학과내 병원감염관리의 예방과 올바른 소독 지침을 위한 기초자료를 제공하고자 연구하였다. 대상 및 방법 : 본 연구는 대전광역시 소재의 1개 대학병원 영상의학과의 일반촬영실을 대상으로 하였다. 기간은 2007년 4월 5일부터 4월 12일까지 이루어졌으며, 검사실별 IP카세트와 테이블의 미생물 수와 세균학적 오염도를 알코올과 소독제가 포함된 소독용 티슈를 사용 전, 후로 나누어 실시하였으며, 정확한 수집을 위하여 병원내 감염관리 전문 간호사와 함께 시료를 채취하였다. 통계처리는 SPSS V13.0을 사용하였으며, 전 후 비교를 위해 T-검정을 실시하였으며 사후검증을 실시하였다. 결과 : 24개의 대상 중 19개(79.2%)에서 세균이 검출 되었으며 5개(20.8%)에서는 세균이 검출되지 않았다. 분리된 세균의 종류는 7종의 세균이 검출 되었는데 그 중 Methicillin Resistant coagulase-negative Staphylo-cocci(MRCNS)가 15(62.5%)곳으로 가장 많이 검출되었으며, 그 다음으로 Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus(MRSA)가 6(16.7%)곳으로 많았으며, Enterococcus Faecium(EFM)이 5(20.8%), Acinetobacter baumannii(ABA) 2(8.3%), Bacillus sp, Coagulase-negative Staphylococci(CNS), Enterococcus sp(ENT)가 각각 1(4.2%)곳에서 검출되었다. 또한 ABA를 제외한 모든 것이 그람양성구균(Gram positive bacilli)이 30(97%) 례에서 검출 되었으며, 1(3%)례에서만 그람음성균(Gram positive bacilli)이 검출되었다. Group별 70% Alchol 사용 전 후 균의 종류 및 군락 수에서는 70% Alchol로 소독을 한 후 세균을 동정한 결과 70% Alchol 소독군에서는 IP Cassette와 Table 그룹 모두에서 100% 세균이 사멸되었다. Group별 Tissue Cleaner 사용 전 후 균의 종류 및 군락 수에서는 Tissue Cleaner 그룹에서의 균의 사멸률은 10그룹(71.2%)에서만 세균이 완전히 사멸되었으며, 4 그룹에서는 많은 감소를 보였으나 여전히 세균이 검출되었다. 전체 균의 사멸률은 91.5%로 나타났는데 다른 균들은 모두 사멸된 반면 MRCNS 균은 사멸률이 가장 낮았(83.6%)으며, 다음으로 MRSA(95%)가 낮았다. 결론 : 70% Alchol과 Tissue Cleaner의 사용전 후 검출되는 세균의 평균을 비교한 결과 모두에서 유의수준5%에서 통계적으로 유의한 것으로 나타났다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제31권2호
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• pp.140-151
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• 2015

Bacillus subtilis B006 strain effectively suppresses the cucumber fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum (Foc). The population dynamics of Foc, strain B006 and its surfactin over-producing mutant B841 and surfactin-deficient mutant B1020, in the rhizosphere were determined under greenhouse conditions to elucidate the importance of the lipopeptides excreted by these strains in suppressing Foc. Results showed that B. subtilis strain B006 effectively suppressed the disease in natural soil by 42.9%, five weeks after transplanting, whereas B841 and B1020 suppressed the disease by only 22.6% and 7.1%, respectively. Quantitative PCR assays showed that effective colonization of strain B006 in the rhizosphere suppressed Foc propagation by more than 10 times both in nursery substrate and in field-infected soil. Reduction of Foc population at the cucumber stems in a range of $0.96log_{10}ng/g$ to $2.39log_{10}ng/g$ was attained at the third and the fifth weeks of B006 treatment in nursery substrate. In field-infected soil, all three treatments with B. subtilis suppressed Foc infection, indicated by the reduction of Foc population at a range of $2.91log_{10}ng/g$ to $3.36log_{10}ng/g$ at the stem base, one week after transplanting. This study reveals that the suppression of fusarium wilt disease is affected by the effective colonization of the surfactin-producing B. subtilis strain in the rhizosphere. These results improved our understanding of the biocontrol mechanism of the B. subtilis strain B006 in the natural soil and facilitate its application as biocontrol agent in the field.