The objective of this study was to develop a differential medium with improved selectivity for the isolation of Bacillus cereus. Mannitol egg yolk polymyxin medium supplemented with D-galactose allowed the differentiation of diarrheal- and emetic-type B. cereus through pH monitoring. The pH of the medium decreased significantly when incubating the emetic-type B. cereus, whereas the pH change was not significant when incubating the diarrheal-type. The addition of pH indicators, such as methyl red and phenol red, to the medium allowed visual differentiation between diarrheal- and emetic-type B. cereus. A solid agar medium was also developed by optimizing the concentrations of medium components such as monosaccharides, agar, egg yolk enrichment, pH indicators, and antibiotics. This study indicates the possibility of applying selective media for the differentiation of diarrheal- and emetic-type B. cereus.
Park, Chanyong;Kong, Minsuk;Lee, Ju-Hoon;Ryu, Sangryeol;Park, Sungsu
BioChip Journal
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v.12
no.4
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pp.287-293
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2018
Bacillus cereus can cause blood infections (i.e., sepsis). Its early detection is very important for treating patients. However, an antibody with high binding affinity to B. cereus is not currently available. Bacteriophage cell wall-binding domain (CBD) has strong and specific binding affinity to B. cereus. Here, we report the improvement in the sensitivity of an ATP bioluminescence assay for B. cereus detection using CBD-conjugated magnetic nanoparticles (CBD-MNPs). The assay was able to detect as few as 10 colony forming units (CFU) per mL and $10^3CFU\;per\;mL$ in buffer and blood. CBD-MNPs did not show any cross-reactivity with other microorganisms. These results demonstrate the feasibility of the ATP assay for the detection of B. cereus.
The enterotoxin production and antimicrobial susceptibility on hemolytic strains from stools of diarrheal pigs was investigated in this study. Through morphological observation, gyrB nucleotide sequence, and API kit analysis, the selected potential pathogenic strain BY06 was identified as Bacillus cereus. Because the characteristic of enterotoxin symptoms were widely caused by Bacillus cereus strains, a PCR test was carried out in order to check the enterotoxin genes (hblA) in this strain. According to the results, this strain was an enterotoxin positive strain containing the hblA gene. The minimum inhibitory concentrations of 10 different antimicrobial agents were screened by the agar dilution test, indicating that this strain was resistant to penicillin G and intermediate to erythromycin; however, it susceptible to cephalothin, vancomycin, clindamycin, fusidic acid, gentamicin, ciprofloxacin, tetracycline and rifampin. These results suggest that the B. cereus BY06 isolated from pig feces has a potential risk of producing enterotoxin and is resistant to penicillin G, but susceptible to various antimicrobial agents.
This study was performed to investigate inhibitory effect on growth of Staphylococcus aureus and Bacillus cereus in lactic acid, hydrogen peroxide and combination of lactic acid and hydrogen peroxide. The minimun inhibitory concentration (MIC) of lactic acid in Staphylococcus aureus were 2500 ppm at pH 7.0, 1250 ppm at pH 5.5, 6.0 and 6.5, while in Bacillus cereus 625 ppm at pH 5.5 and 6.0, 1250 ppm at pH 6.5 and 7.0, respectively. MICs of hydrogen peroxide in Staphylococcus aureus were 50 ppm at pH 6.0, 75 ppm at pH 6.5 and 7.0, while in Bacillus cereus was 75 ppm at pH 5.0, 5.5 and 6.0, respectively. MICs of combined treatment of lactic acid and hydrogen peroxide in Staphylococcus aureus were 1250 ppm of lactic acid with 25 ppm of hydrogen peroxide and 625 ppm of lactic acid with 50 ppm of hydrogen peroxide. When Bacillus cereus were with 1250 ppm of lactic acid with 50 ppm of hydrogen per-oxide and 625 ppm of lactic acid with 75 ppm of hydrogen peroxide at 6.5. The correlations between MICs of lactic acid and hydrogen peroxide in S. aureus and B. cereus obtained through the coefficient of determination ($R^2$). $R^2$ value were 0.9934 and 0.9986, respectively. The inhibitory effect of lactic acid and hydrogen peroxide in S. aureus and B. cereus could be confirmed from the result of this experiment.
Kim, Jin-Young;Yoo, Hye-Lim;Lee, Young-Duck;Park, Jong-Hyun
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.24
no.4
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pp.657-663
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2011
$Bacillus$$cereus$ is widely distributed on various foods and is known to cause clinical infections, food poisoning toxin induced diarrhea and vomiting. In this study, $B.$$cereus$ group detected and analyzed rice, rice bran, and biofilm characterization of $B.$$cereus$ confirmed. $B.$$cereus$ was identified in approximately 34.6% of brown rice and 50.0% of rice bran. $B.$$thuringiensis$ was detected in 3.9% of brown rice and 23% of rice bran, and $B.$$mycoides$ was isolated from rice bran. The microtiter plate assay detected differences in biofilm-forming ability among $B.$$cereus$ group isolates. Biofilm of $B.$$cereus$ seemed to increase the MIC values of antimicrobial agent and antibiotic compounds compared with planktonic cells. Therefore, sufficient attention should be given to good manufacturing practice and good agriculture practice to avoid contamination of $B.$$cereus$ group raw material including rice.
Jo, Hye-Jin;Hong, Soo-Hyun;Kim, Young-Gyo;Shin, Dan-Bi;Oh, Myung-Ha;Hwang, Jeong-Hee;Lkhagvasarnai, Enkhjargal;Yoon, Ki-Sun
Journal of the East Asian Society of Dietary Life
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v.22
no.4
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pp.558-565
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2012
The objective of this study was to develop a predictive growth model for Bacillus cereus in nutrient broth and validate the developed growth model in blanched vegetables. After inoculating B. cereus into nutrient broth, growth of B. cereus was investigated at 13, 17, 24, 30 and $35^{\circ}C$. Lag time (LT) decreased while specific growth rate (SGR) increased with an increase in storage temperature. Growth of B. cereus was not observed at temperatures lower than $12^{\circ}C$. Secondary growth models were developed to describe primary model parameters, including LT and SGR. Model performance was evaluated based on bias factor ($B_f$) and accuracy factor ($A_f$). In addition, we inoculated B. cereus into blanched vegetables stored at 13, 24, $35^{\circ}C$ and observed the growth kinetics of B. cereus in five different blanched vegetables. Growth of B. cereus was most delayed on Doraji at $13^{\circ}C$ and was not observed on Gosari at $13^{\circ}C$. Growth of B. cereus at $35^{\circ}C$ was significantly (p<0.05) slower on Gosari than on other blanched vegetables. The developed secondary LT model for broth in this study was suitable to predict growth of B. cereus on Doraji and Gosari, whereas the SGR model was only suitable for predicting the growth of B. cereus on mung bean sprout.
Lee Dae-Hyoung;Lee Jae-Won;Jeong Jae-Hong;Lee Jong-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.34
no.1
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pp.52-57
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2006
For the purpose of production of a novel antihyperlipemial HMG-CoA reductase inhibitor from bacteria, a bacterium which showed the highest HMG-CoA reductase inhibitory activity was isolated from traditional Doenjang. This strain was identified as Bacillus cereus (D-3) based on its microbiological characteristics and 165 rRNA sequence analysis. The maximal HMG-CoA reductase inhibitor production from Bacillus cereus D-3 was obtained by cultivation in a Glucose-CSL broth containing 2% glucose, 0.6% corn steep liquor, $0.04%\;K_{2}HPO_4$ and $0.05%\;KH_{2}PO_4$ at $30^{\circ}C$ for 36 h. The final HMG-CoA reductase inhibitory activity under the above conditions was 39.4%.
Bacillus cereus BS229 was identified as a bacteriocin producer with a bactericidal activity against Bacillus thuringiensis subsp. Thomsoni BR-40. Bacillus cereus BS229 and cerein BS229, named tentatively as the bacteriocin produced by Bacillus cereus BS229, showed a narrow spectrum of actibity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, along with yeast and molds. Production of cerein BS229 in a 5-1 fermenter followed typical kinetics of primary metabolite synthesis. The antibacterial activity of cerein BS229 on sensitive indicator cells disappeared completely by ${\alpha}-chmotrypsin$ or proteinase K, which indicates its proteinaceous nature. Cerein BS229 seemed to be very stable throughout the pH range of 2.0 of 9.0 and it was relatively heat labile, despite the fact that bacteriocin activity was still detected after being boied for 30min. Cerein BS229 actibity has been changed with some of the organic solvents such as toluene, ethanol, and chloroform. Direct detection of cerein BS229 actibity on SDS-PAGE suggested that it had an apparent molecular mass of about 8.2 kDa.
Kim, Min-Ju;Han, Jae-Kwang;Park, Jong-Su;Lee, Jin-Sung;Lee, Soon-Ho;Cho, Joon-Il;Kim, Keun-Sung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.6
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pp.872-879
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2015
Many strains of Bacillus cereus cause gastrointestinal diseases, and the closely related insect pathogen Bacillus thuringiensis has also been involved in outbreaks of diarrhea. The diarrheal diseases are attributed to enterotoxins. Sixteen reference strains of B. cereus and nine commercial and 12 reference strains of B. thuringiensis were screened by PCR for the presence of 10 enterotoxigenic genes (hblA, hblC, hblD, nheA, nheB, nheC, cytK, bceT, entFM, and entS), one emetogenic gene (ces), seven hemolytic genes (hlyA, hlyII, hlyIII, plcA, cerA, cerB, and cerO), and a pleiotropic transcriptional activator gene (plcR). These genes encode various enterotoxins and other virulence factors thought to play a role in infections of mammals. Amplicons were successfully generated from the strains of B. cereus and B. thuringiensis for each of these sequences, except the ces gene. Intriguingly, the majority of these B. cereus enterotoxin genes and other virulence factor genes appeared to be widespread among B. thuringiensis strains as well as B. cereus strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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