해양생물 및 토양으로부터 총 619주의 알긴산 분해능을 나타내는 균주를 분리하여 이중 분해능이 강력했던 균주의 배양 조건 및 효소 생산 조건을 실험한 결과, 탄소원으로는 Na-alginate $2\%$, 질소원으로 nutrition broth $0.1\%$, NaCl 농도 $2\%$, pH 7.5, 배양 온도는 $30^{\circ}C$, 배양 시간은 $144\~150$ 시간이 최적 배양 및 효소 생산 조건이었다. 아울러 균체의 생리, 생화학적 특성을 분석한 결과, 본 실험 균주가 Bacillus licheniformis로 동정 되어 최종 Bacillus licheniformis AL-577로 명명하였다.
A phase variation has been reported in an entomopathogenic bacterium, Xenorhabdus nematophila. Compared with a wild-type primary form, a secondary form usually loses several physiological and biochemical characters. This study showed that the phase variation of X. nematophila caused a significant alteration in its immunosuppressive activity and subsequent entomopathogenicity. A secondary form of X. nematophila was detected in laboratory colonies and exhibited significant differences in dye absorption and entomopathogenicity. In addition, the secondary form was different in its production of eicosanoid-biosynthesis inhibitors (EBIs) compared with the primary form of X. nematophila. Production of oxindole and p-hydroxypropionic acid was significantly reduced in the culture broth of the secondary form of X. nematophila. The reduced EBI production resulted in significant suppression in the inhibitory effects on cellular nodule formation and phenoloxidase activity. Culture broth of the primary form of X. nematophila enhanced the pathogenicity of Bacillus thuringiensis ( Bt) significantly more than the culture broth of the secondary form. Furthermore, this study developed a highly efficient "Dual Bt-Plus: to control both lepidopteran insect pests Plutella xylostella and Spodoptera exigua, by mixing two effective Bt strains along with the addition of potent bacterial metabolites or 100-fold concentrated X. nematophila culture broth.
핀란드의 Lappeenranta 지역에 위치하는 Saimaa 호수가의 토양시료로부터 분리된 Bacillus sp. KMU-1011를 이용하여 많은 작물에 잿빛 곰팡이병을 유발하는 Botrytis cinerea KACC 40573에 대한 항진균 활성을 위한 배양조건을 조사하였다. 항진균 물질의 생산을 위한 기본배지로 nutrient broth를 사용하였으며 탄소원으로 1.0% glucose와 질소원으로 1.0% polypeptone를 첨가하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. 배양조건으로는 $24^{\circ}C$, 180 rpm, 48시간 배양하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. Ammonium sulfate를 $30{\sim}60%$ 첨가하여 항진균 물질을 회수하였을 때 가장 양호한 항진균 활성을 나타내었으며, chloroform을 이용하여 배양액 중에 존재하는 항진균 물질을 회수하여 다양한 작물병원성 곰팡이에 대한 spectrum을 조사한 결과, 잿빛곰팡이병, 고추 탄저병, 참외 탄저병, 수박등의 박과작물의 덩굴마름병, 토마토 시들음병, 글라디올러스 마른썩음병, 토마토 질병, 수박 덩굴쪼김병. 수박 질병, 사과나무 역병, 벼 잎집무늬마름병, 참외 줄기썩음병, 그리고 고추 균핵병에 대하여 양호한 항진균 활성을 나타내는 것으로 조사되었다.
Xenorhabdus 및 Photorhabdus 두 곤충병원세균은 곤충의 아이코사노이드 생합성을 억제하여 면역작용을 저하시키는 인자로 알려지고 있다. 본 연구는 이들 세균의 배양액을 이용하여 배추좀나방(Plutella xylostella)을 방제하는 새로운 생화학농약을 개발하려 추진되었다. 두 세균 배양액의 단독 처리는 배추좀나방의 생존력에 뚜렷한 영향을 주지 않았다. 그러나 비티(Bacillus thuringiensis) 생물농약과 혼합하여 처리할 경우 비티 단독 처리에 비해 배추좀나방 4령충에 대해서 현격하게 높은 병원성 증가효과를 주었다. 배양액의 세균 활성을 조사하기 위해 이 세균 배양액을 고온 멸균 및 $0.2\;{\mu}m$ 여과 멸균 처리하였다. 이렇게 처리된 멸균 배양액은 세균이 생존했던 배양액과 차이 없이 비티 생물농약의 병원력을 상승시켰다. X. nematophila 배양액에서 유래된 세 가지 대사물질도 세균배양액과 유사한 비티 병원력 상승효과를 보였다. 야외 배추좀나방 방제 시험에서도 세균배양액은 비티 생물농약의 방제가를 상승시키는 효과를 나타냈다.
Bacillus pumilus PJ19 isolated from Pinus leaves showed optimum xylanase production when grown in yeast tryptone broth at $37^{\circ}C$, pH 7.2, and shaken at 200 rpm after 48 h of incubation. Xylanase production was induced by xylan and xylose but repressed in the presence of glucose. Xylanase production by B. pumilus PJ19 was not growth-associated and the maximum enzyme production was found after 36 h of incubation.
본 연구에서는 전통 발효 식품에서 분리한 B. subtilis Y3-7 균주의 배양액이 $\alpha$-glucosidase의 활성에 미치는 영향을 살펴보았다. B. subtilis Y3-7 균주를 TSB 배지에 30시간 이상 배양한 배양액은 1.62 mg/mL의 농도로 yeast $\alpha$-glucosidase의 활성을 50%까지 저해할 수 있었다. 또한 효소학적 분석을 통해 이것이 배양액 내 물질이 효소의 기질과 경쟁적으로 작용하여 억제효과가 나타남을 확인하였다. B. subtilis Y3-7 균주의 배양액은 yeast 뿐만 아니라 실험동물의 장내 $\alpha$-glucosidase의 활성에도 영향을 미쳐 당부하에 따른 급격한 혈당상승을 억제할 수 있었다. 이와 같은 결과로 보아 대량배양이 가능한 B. subtilis Y3-7을 통해 탄수화물 흡수에 중요한 역할을 하는 $\alpha$-glucosidase 활성억제 물질을 얻음으로써 항당뇨 물질의 안정적인 생산이 기대되는 바이다.
B3(Bio Best Bacillus)와 RABC(Rotating Activated Bacillus Contactor) 공법은 Bacillus를 이용하여 유기물뿐만 아니라 질소와 인도 효율적으로 제거하는 공법이다. 그러나 현 단계에서 폐수처리 시설에 이용되고 있는 Bacillus의 유기물 제거에 대한 미생물학적인 특성을 과학적으로 입증하지 못하였다. 이에 본 연구에서는 활성슬러지에서 보고되는 균주 Burkholderia cepacia(KCTC 2966)를 대조균으로 하고 Bacillus megaterium(KCTC 3007), Paenibacillus polymyxa(KCTC 3627) 균주와 B3 공법의 분뇨처리장으로부터 분리한 Bacillus속 4개 균주 Bacillus sp.(A12, C21, F12, L1)를 선정하여 0.2% Nutrient Broth, $30^{\circ}C$에서 배양하면서 Burkholderia의 Bacillus의 유기물 제거능력을 비교하였다. 접종량에 따른 개체군 차이로 유기물 제거능력이 영향 받을 수 있지만, Bacillus의 유기물 제거능력이 Burkholderia보다 $2\sim5$배 뛰어남을 알 수 있었다. 또한, Bacillus megaterium과 Bacillus sp.(C21, F12, N12)의 영양세포와 내생포자의 유기물 제거능력의 차이를 알아본 결과 내생포자의 제거능력이 영양세포보다 더욱 뛰어남을 알 수 있었다.
Xylanase를 생산하는 호알칼리성 균주를 토양으로부터 분리하여 동정하였다. 토양으로부터 분리한 호알칼리성 균주 3000여종 중 xylanase 활성이 가장 높은 균주인 strain DK-2386 균주를 선별하였다. Gram 염색과 SEM을 통한 형태학적 특성을 관찰하였으며, Methods for General and Molecular Bacteriology와 Bergey's manual of systematic bacteriology, 그리고 Biochemical tests for identification of medical bacteria에 준하여 생화학적 특성을 확인한 결과 배양액의 색은 붉은 빛을 나타내었으며, Gram양성 간균, 내생포자형성, catalase 양성, oxidase 양성, 혐기성 양성, glucose로부터 gas 형성 양성, casein 가수분해 양성, starch 가수분해 양성, CMC 가수분해 양성, xylan 가수분해 양성, nitrate 환원능 양성이며 10% NaCl 농도에서도 생육하는 것을 확인하였다. 균체의 지방산 조성 분석 결과 $C_{15:0\;ISO}$ 27.35%와 $C_{15:0\;ANTEISO}$ 31.54%, $C_{16:0}$ 9.70%로 이루어져 Bacillus속으로 동정되었으며, 16S rDNA 염기서열 분석결과 B. agaradhaerens와 100%의 유사성을 갖는 것을 확인하였다. (사)한국종균협회로부터 분양받은 Bacillus agaradhaerens 40952, B. alcalophilus와 strain DK-2386 균주사이의 생화학적 특성을 비교한 결과 B. agaradhaerens와 속과 종이 같으나 미세하게 특성이 다른 균주로 판단되어 B. agarad haerens DK-2386이라 명명하였다.
One of the important phytohormones produced by plant growth promoting bacteria is the auxin; indole-3-acetic acid (IAA), with L-tryptophan as the precursor. In this study, we focused on the investigation of optimal conditions for the production of IAA by Bacillus megaterium BM5. We investigated culturing conditions, such as incubation temperature, pH of the culture medium and incubation period, with varying media components such as inoculation volume, tryptophan concentration and carbon and nitrogen source. Besides, optimization study intended for high IAA production was carried out with fermentation parameters such as rpm and aeration. The initial yield of $42{\mu}g\;IAA\;ml^{-1}$ after 24 hr increased to $85{\mu}g\;ml^{-1}$ when 5% (v/v) of L-tryptophan was used in the culture broth. The maximum yield of $320{\mu}g\;IAA\;ml^{-1}$ was observed in trypticase soy broth (TSB) supplemented with starch and soybean meal as C and N sources with a C/N ratio of 3:1 (v/v) at $30^{\circ}C$, pH 8.0 for 48 hrs with 1.0 vvm and 250 rpm in 5 L working volume using 10 L scale fermenter. The bacterial auxin extracted from the culture broth was confirmed by thin layer chromatography and high-performance liquid chromatography and effect on plant growth was confirmed by root elongation test.
Seo, Hyo-Seel;Lee, Jae-Hwan;Kwon, Dae-Yong;Park, Jin-Byung
Food Science and Biotechnology
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제18권4호
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pp.1030-1034
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2009
A fermenting microorganism involved in formation of ortho-dihydroxyisoflavones (ODIs) during aging of doenjang (Korean fermented soybean paste) has been investigated. Microorganisms in ODI-containing doenjang were isolated by cultivating on yeast mold (YM) agar medium containing 0-7% NaCl. ODI formation of the isolated strains was examined by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) analysis after cultivation in modified YM broth or soybean extract medium. An ODI-producing microbe was identified as Bacillus subtilis HS-1 based on 16S rRNA gene sequence analysis. The strain has produced 8-hydroxydaidzein as a major product during growth in the modified YM broth or soybean extract medium. Therefore, it was concluded that one of the microorganisms involved in the formation of ODIs in doenjang was B. subtilis HS-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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