This study was carried out to establish in vitro propagation system influenced by plant growth regulators through organogenesis with three different seed sources (China, Mongolia and Russia) for conservation of genetic resources in Northeast Asia. The experiment compared two different carbon sources (commercial sugar, sucrose), which showed no significant differences in germination rate. Induced adventitious buds from leaf segments were found to be highly effective when supplemented with 1.0 mg/L BA, 1.0 mg/L Kinetin, and 5.0 mg/L IAA, in the case of Chinese origin 96.8%, Russian origin R-1: 95.6%, R-2: 85.6%, and Mongolian origin M-2: 77.8%. It was effective in BA and Kinetin with supplemented with IAA, respectively. Shooting development was also efficient in Woody Plant Media (WPM) supplemented with 1.0 mg/L BA, 1.0 mg/L Kinetin and 5.0 mg/L IAA.
본 실험에서는 국화의 재배방법에 따라 즉, 적심재배방법과 정식시기에 따른 국화 '진바'의 생육과 절화의 상품성과 재배기간의 차이에 미치는 영향에 대하여 알아보고자 하였다. 실험 결과 무적심 재배의 경우 화아 분화 돌입에 필요한 충분한 영양생장기간을 확보하는데 비해, 적심재배의 경우는 충분한 영양 생장기간을 확보하지 못하였다. 화아분화 유기 12주 후의 무적심 재배 개화율은 95%를 상회하였으나 적심재배는 95% 이하로 나타났다. 무적심재배구는 정식시기에 관계없이 3등급상품 이상의 절화가 100% 생산되었으나 적심재배는 첫째주 정식구에서 84.7%로 아주 낮았고 둘째주 정식구는 64.3%, 셋째주 정식구는 18.8%, 넷째주 정식구는 2.6%로 적심재배구의 절화 상품성이 아주 좋지 못하였다. 무적심재배구의 절화품질이 제일 좋지 못한 넷째주 정식구와 적심재배구의 절화품질이 제일 좋은 첫째주 정식구를 비교하면 절화의 품질은 무적심재 배 넷째주 정식구가 좋았고 재배기간도 38일을 단축시킬 수 있었다. 이와 같은 절화국화 무적심재배는 적심 재배에 비하여 재배기간 단축과 품질향상이 가능하므로 경영비 절감과 소득향상이 가능한 재배법으로 판단되었다.
안개초 잎조직의 재분화는 TDZ가 BA와 kinetin에 비하여 월등히 효과적이었고 TDZ $3.0mg{\cdot}L^{-1}$에서 가장 높은 재분화율을 보였다. 한편 BA처리에서는 투명묘 발생율이 높았고 kinetin은 재분화에 영향을 주지 못하였다. NAA와 IAA의 비교에서 IAA $0.3mg{\cdot}L^{-1}$를 첨가한 배지에서 재분화율과 잎당 부정아수가 많았다. Agar 농도에 따른 잎조직의 재분화는 1.0, 1.2 및 1.6%에서 야기되었다. 배양초기 10일간의 암처리는 재분화율을 75%까지 증가시켰다. 생장점배양 후 3회 계대배양한 묘에서 채취한 잎 절편에서 재분화율이 84%로 가장 높았고 잎당 부정아수도 6.8개로 가장 많았다.
본 연구에서는 노지재배 포도의 내한성을 증대시킬 수 있는 방법을 모색하고자 간이비가림시설 설치에 따른 식물체의 반응을 조사하였다. 간이비가림시설에서 월동한 식물체의 탄수화물 함량은 노지 처리구에 비해 높았으며, 'Muscat Bailey A'의 줄기보다 '거봉'과 '캠벨얼리' 품종에서 탄수화물의 함량이 높게 나타났다. 노지에 비해 간이비가림시설에서 발아율과 신초의 생장도 양호하였으나 방충망, 차광막을 처리한 구에서는 유의차가 나타나지 않았다. 포도 잿빛곰팡이병의 발생은 간이비가림시설에서 발생이 적었다. Stilbene 화합물 함량은 노지보다 간이비가림 처리구에서 함량이 약간 더 높게 나타났으며 가장 많이 함유된 stilbene은 배당체 형태인 t-piceid였으며, resveratrol, piceatannol, c-piceid에 비해 상당히 고함량을 나타내었다. Chalcone isomerase, manganese superoxide dismutase, proline rich protein 2, temperature induced lipocalin의 transcripts는 시간이 지날수록 유전자의 발현량이 더 많이 축적되었고, 대체적으로 간이비가림시설의 삽수에서 저온 스트레스에 더 강하게 발현되었다. 처리구별 온도차이는 없었으나 노지에 비해 간이비가림시설에서 풍속이 크게 감소하였으며, 간이비가림시설 내에서 차광막을 설치한 경우 풍속의 감소효과가 현저하게 나타났다. 겨울철의 간이비가림시설과 방충망을 설치함으로써 극저온에 의한 포도나무의 저온피해를 줄일 수 있을 것이다.
카사바 (Manihot esculenta Crantz, cv. MCol 22)의 마디 및 절간절편으로부터 부정근 발생이 분화결정되는 시기를 조사하였다. 1개의 액아를 가진 10mm 길이의 마디절편을 MS 기본배지에서 8일간 배양하면 직접 부정근이 발생되었으나, 액아를 갖지 아니한 절간절편은 동일한 배지상에서 부정근이 형성되지 않았다. 반면에 마디절편을 MS 기본배지에서 5일간 배양한 뒤, 마디절편의 중간부로부터 절단된 하부의 절간절편으로부터는 부정근이 발생되었다. 이에 따라 마디절편의 중간 부를 일정시간 단위로 절단하는 방법으로 조사된 분화결정 시기는 3∼5일이었다. 한편 절간절편을 여러가지 농도의 IBA가 첨가된 배지에서 일정 기간 배양한 후 MS 기본배지로 이식했을 때 부정근이 발생되는 시기는 옥신 농도와 배양기간 에 따라 달랐다. 0.5 mg/L IBA 첨가에서는 5일 이상 배양되어야 90% 이상의 절편에서 부정근이 발생되고, 1 mg/L IBA 첨가에서는 2.5일 이상 처리에서, 그리고 2mg/L IBA에서는 1.5일의 처리에서 90% 이상의 부정근이 발생되었다. 따라서 부정근 발생을 분화결정시킨 외래 옥신의 처리기간은 분화결정 시기이라기보다는 근원기 유도에 필요한 적정량의 옥신을 흡수축적한 기간으로 사료된다.
자생식물 중 실내분화용, 절화 및 화단용으로서 가치가 높고, 한약으로서 이용 가능한 용담의 기내개화 및 대량증식 체계를 확립하기 위하여 식물체의 부위 및 생장조절제의 효과를 시험한 결과는 다음과 같다. 화뢰의 출현은 0.5mg/l kinetin과 GA_${3}$를 첨가하였을 때 가장 많았으나 그 효과는 kinetine이 더 좋았다. 최적의 GA_${3}$나 kinetin농도일 때 두가지 생장조절제를 혼용하면 오히려 화뢰형성수가 감소되었고, 저농도에서는 상호작용의 효과가 있었다 화뢰가 50% 형성되는데 걸리는 주수(T_50는 0.1mg/l GA_3가 첨가되었을 때 Kinetin의 농도에 관계없이 11-14주이었다. 측지 발생은 GA_${3}$의 효과가 kinetin보다 좋았고, 농도는 모두 1.0mg/l까지 높을 수록 좋았다. 중간정도의 농도(0.5mg/l)에서 두 생장조절제간의 상호작용이 인정되었다. 뿌리의 형성은 GA$_{3}$의 농도가 높을 수록 감소하였다. 꼬투리의 크기가 8mm까지 클수록 발아력이 높았으며, 꼬투리의 크기가 작을 수록 비정상적인 식물체가 많았다. 배지에 GA_${3}$/l 첨가는 발아력을 현저히 증가시켰다.
경정배양을 통해 유색칼라 'Florex Gold'의 대량생산체계를 확립하고자 다아체의 형성 및 식물체 재분화에 미치는 생장조절제의 영향을 조사하였다. TDZ $0.1mgL^{-1}$ 처리는 BA 처리보다 경정으로부터 다아체의 형성이 왕성하였고, 길이가 짧은 신초가 분화하였다. BA와 NAA 혼용처리는 BA 단용처리에 비해 다아체 형성 및 신초분화를 억제하였다. TDZ $0.1mgL^{-1}$가 첨가된 배지에서 경정배양을 통해 생산된 다아체 절편체(0.3 cm)에서의 다아체 증식은 TDA $0.1mgL^{-1}$와 BA $2.0mgL^{-1}$의 농도에서 가장 효과적이었다. 다아체 절편체를 TDZ $0.001mgL^{-1}$에서 배양시 신초가 가장 많이 형성되었고, 신초의 길이도 가장 길었다. 다아체 절편체로 부터의 뿌리의 생장은 TDZ $0.001mgL^{-1}$와 BA $0.2mgL^{-1}$ 처리에서 가장 양호하였다. 결과적으로 Zantedeschia spp. 'Florex Gold'의 기내 대량번식은 TDZ $0.1mgL^{-1}$이 첨가된 배지에서 경정배양을 통해 형성된 다아체를 증식하여 기관분화를 유도함으로써 대량번식이 가능하였다.
Twenty-eight of 44 Indian Ceropegia species are endemic and their survival is threatened. As a step towards conservation, we implied in vitro methods for the sustainable propagule production in C. hirsuta, C. lawii, C. maccannii, C. oculata and C. sahyadrica. Effects of explant, growth regulators, sucrose and photoperiod were studied. High frequency microtuber production was achieved with the seedling-apical buds, grown on MS medium containing 4-6 mg $1^{-1}$ BAP, 3-8% (w/v) sucrose, under continuous illumination. Each microtuber, when subcultured proliferated to form a cluster of secondary microtubers. Every primary and secondary microtuber bore at least one shoot-bud and a root primordium. Each tuber (formed with any of the significantly effective treatments) weighed more than 500 mg, enough to plant directly in non-sterilized soils. Microtubers could be produced and proliferated round the year. Proliferation could be solely attributed to in vitro procedures as these plants bear solitary tubers in vivo. Microtubers could be sprouted in vitro to prepare ready to pot plantlets. As, this novel method succeeded for all five species, though they belong to different eco-physiological backgrounds, we recommend its implementation in the conservation programs for a broader range of Ceropegia species, supported by other integrated strategies.
Chung, Mi Young;Naing, Aung Htay;Khatun, Khadiza;Ahn, Hyung Geun;Lim, Ki Byung;Kim, Chang Kil
Journal of Plant Biotechnology
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제43권4호
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pp.438-443
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2016
The in vitro propagation of the commercially important Phalaeonopsis hybrid 'Little gem' was achieved by culturing the apical part and axillary buds excised from flower stalks. The explants were cultured on 5 different basal media: $3.0{\cdot}L^{-1}$ Hyponex and $4.0{\cdot}L^{-1}$ peptone ($H_3P_4$) and Murashige & Skoog (MS) media were shown to be suitable for shoot regeneration. The MS medium supplemented with $5.0mg{\cdot}L^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BA) was found to be more efficient for shoot regeneration. However, the number of shoots induced by axillary buds was higher than that induced by the apical part. Incubation of the apical part under darkness for one week, as well as of the explants in the same medium with activated charcoal (AC) $0.5g{\cdot}L^{-1}$ promoted shoot regeneration and shoot growth; similar growth was not observed with axillary buds.
Development of herbicide resistant transgenic legume plants through Agrobacterium-mediated transformation has been worked in many previous studied. Plant regeneration after infection is the important step to obtain successful transgenic plants. Many attempts try to find the optimum media condition for plant regeneration after infection. However, the transformation efficiency of legume plants is still low. In this study, regeneration of some Korean legume species including two soybean cultivars (Dawon and Pungsan) and pea have been done with organogenesis which is used various kind of explants such as cotyledonary-nodes in soybean and bud-containing tissue in pea. We developed the optimum media condition for plant regeneration regulators under Agrobacterium-mediated transformation using different kind and various concentration of plant growth. As the results, B5 medium containing 2 mg/L of 6-benzylaminopurine was selected in this study for the optimum plant regeneration media. The segments were inoculated with Agrobacterium suspension harbored an IG2 vector containing bar gene which confers resistance to phosphinotricin (PPT) in 3, 5 and 7 days. The transformation efficiency was achieved in Dawon 3.03 % and pea 1.46 % with co-cultivation period of 7 days which is showed a high number of GUS positive expression period.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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