The purpose of this study is to evaluate the influences of the bone morphogenetic protein (BMP) on the healing of periodontal ligament and alveolar bone after replantation of tooth, and to examine the possibility of its clinical application. 45 Sprague Dawley rats weighted about 100 gram were divided into 3 experimental groups by different dose of BMP. All the upper right and left 1st molar were extracted after 5 days feeding of 0.4% ${\beta}$-aminopropionitrile, and right molar were used as experimental group and left molar were used as control group. The root surface of experimental molar were treated with 25,50 and l00ng/ml of human recombinant Bone morphogenetic protein-4 (rh-BMP-4) with micropipet, and 1M Sodium hypochloride were used on control root surface. All the experimental animals were sacrificed as 1, 2, 4, 7 and 14 days after autoreplantation of upper 1st molar into their own position. The maxilla were disected included both side of 1st molar. The collected tissue were processed from demineralization to paraffin embeding as usual procedure, and the specimens were prepared with Hematoxylin-Eosin stain for the light microscopic evaluation. The results of this study were as follows : 1. There was no significant differences between control and experimental site on 1 and 2 days after replantation of tooth. In the case of 4th days, the evidence of tissue regeneration were observed on experimental site to compare the controls. New osteoid were revealed on high concentration of BMP at 7 days after replantation, and it became more obvious at 14 days, 2. The effect of the rh-BMP-4 coated on root surface was revealed slight influences for the prolifertion of cells of periodontium and tissue regeneration as dose-dependent pattern. 3. Bony ankylosis was observed between alveolar bone and root surface due to the remarkable amount of osteoid formation on the 14 days after replantation of root. In the conclusion, it was suggested that topical application of the rhBMP-4 on the root surface has influence on the periodontal ligament and alveolar bone. The application method of BMP on the root should be designed with calculation of proper concentration.
Recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2 ), a member of the TGF-${\beta}$ family, has been used widely in recent years to regenerate defects of the maxillary and mandible bones. Such defects are sometimes caused by resection of oral squamous cell carcinoma (OSCC) yet the biologic effects of rhBMP-2 on these carcinomas are not fully clear. The objective of this study was to determine histologically whether rhBMP-2 produces adverse effects on angiogenesis during induction of OSCC, a biologic process critical for tumor formation in an experimental model in the buccal pouch of golden Syrian hamsters. Buccal cavities were exposed to painting with 0.5% DMBA in liquid paraffin three times a week for 14 weeks, then biopsies were taken. Division was into 2 groups: a study group of 10 hamsters receiving $0.25{\mu}g/ml$ of rhBMP-2 in the $3^{rd}$ and $6^{th}$ weeks; and a control group of 10 hamsters which did not receive any additional treatment. VEGF expression and microvessel density were measured but no differences were noted between the two groups. According to this study, rh-BMP-2 does not stimulate angiogenesis during induction of OCSSs.
본 연구는 부산시에 위치한 하천퇴적물에 대한 현재의 오염상태와 혐기성 상태에서의 잠재메탄발생량을 평가하기 위해 실시하였다. 먼저 부산시 하천중 총 5곳을 선정하였고 대상하천의 퇴적물을 채집하였다. 그리고 퇴적물특성을 알아보기 위해 퇴적물의 화학적산소요구량, 강열감량, 총 유기탄소에 대해서 분석을 실시하였고 그 결과 각각 15.20~75.07mg $15.20{\sim}75.07mg\;g^{-1}$, 2.34~11.54%, 1.28~34.21%로 나타났다. 또한 실험실규모의 BMP Test를 실시하였고 그 결과 pH가 약간 증가하다가 약 7.11~7.35에서 평형을 이루었으며, C/N, 최종메탄 및 이산화탄소수율 그리고 생분해도는 각각 1.05~10.27, 10.1~179.4, 10.3~34.4, 4.0~30.1을 나타내었다. 그리고 최종메탄수율과 C/N비, 최종이산화탄소수율, COD, 강열감량, 총유기탄소와의 상관관계를 알아보기 위해 선형모델에 최소자승법을 적용해 평가하였고 그 결과, COD($r^2=0.7586$)와 강열감량($r^2=0.7876$)을 제외한 나머지 모든 항목에서 최종메탄수율과 높은 상관관계를 띔을 알 수 있었다($r^2=0.9795{\sim}0.9858$). 따라서 C/N 또는 TOC 분석결과를 통해 메탄발생수율을 예측 가능할 것으로 판단된다.
본 연구는 메탄생성에 직접적으로 관여하는 혼합 메탄균과 셀롤로스 등의 고분자 물질의 가수분해 반응에 활성이 뛰어난 반추위 내 혐기성 섬유소분해균 중에서 대표적인 Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus flavefaciens 및 Ruminococcus albus를 biochemical methane potential (BMP) 시험에 첨가하였을 때 메탄 발생에 미치는 영향을 조사하고자 수행되었다. BMP시험은 멸균증류수를 첨가한 control과 각각의 미생물 배양액을 첨가한 혼합 메탄균 첨가구 (M), F. succinogenes 첨가구 (FS) R. flavefaciens 첨가구 (RF), R. albus 첨가구 (RA) 및 RA+FS 혼합첨가구와 M+RA+FS 혼합 첨가구로 총 7개 처리구로 각 처리구별 3반복으로 진행되었다. 미생물 배양액의 첨가량은 식종액과 양돈슬러리에 1% (0.5 mL), 3% (1.5 mL) 및 5% (2.5 mL) 씩 첨가 하였다. BMP 시험을 위해 60일간 배양이 지속되었고 중온소화를 위해 $38^{\circ}C$의 배양기에서 수행되었다. 실험의 결과 총 바이오가스 발생량은 5% RF와 RA+FS가 대조구에 비하여 8.1 및 8.4%로 가스발생량이 유의적으로 높았다(p<0.05). 메탄발생량은 3% 미생물 배양액 첨가구 중 M+RA+FS를 제외하고 대조구에 비하여 증가시키는 경향을 보였으며, 5% 배양액을 첨가하였을 때는 대조구에 대하여 5%의 M, FS, RF, RA, RA+FS, 및 M+RA+FS RF가 각각 12.1, 12.6, 17.3, 13.7, 17.9 및 14.7%로 메탄가스발생량을 증가시켰다 (p<0.05). TS 및 VS 분해율은 가스발생량과는 관계없이 모든 처리구에서 미생물 배양액의 첨가량이 증가하더라도 차이가 없었다. BMP 종료시 배양액내 pH는 모든 처리구가 7.527~7.657의 범위로 메탄발효에 큰 영향을 주지 않았다. 결론적으로, 본 실험에서는 양돈 슬러리의 성분특성으로 인해 가수분해단계와 메탄생성단계 모두에 첨가한 미생물 배양액이 효과가 있었으나, 5% 첨가수준을 제외하고 낮은 첨가수준에서는 첨가효과가 나타나지는 않았다.
Kim, Jae-Shin;Cha, Jae-Kook;Lee, Jung-Seok;Choi, Seong-Ho;Cho, Kyoo-Sung
Journal of Periodontal and Implant Science
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제46권5호
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pp.350-359
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2016
Purpose: The purpose of the present study was to evaluate the effectiveness of a minimal concentration of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) in terms of quantitative and qualitative analyses of newly formed bone in a rabbit maxillary sinus model. Methods: In 7 rabbits, sinus windows were prepared bilaterally. Biphasic calcium phosphate (BCP) loaded with 0.05 mg/mL BMP-2 was grafted into one sinus (the BMP group) and saline-soaked BCP was placed into the other (the control group) in each animal. The animals were allowed an 8-week healing period before being sacrificed. Specimens including the augmented area and surrounding tissues were then removed and evaluated both radiographically and histologically. Results: There was a difference in the mineralization of new bone between the groups. In the BMP group, the greater part of the new bone consisted of mature lamellar bone with an evident trabecular pattern, whereas the control group showed mostly woven bone, consisting only partially of lamellar bone. Histometrically, the area of new bone was significantly greater ($4.55{\pm}1.35mm^2$ vs. $2.99{\pm}0.86mm^2$) in the BMP group than in the control group (P<0.05); however, the total augmentation volumes were not significantly different between the groups. Conclusions: Within the limitations of this study, it can be suggested that a minimal concentration of BMP-2 (0.05 mg/mL) had an osteoinductive effect with accelerated mineralization in a rabbit sinus model using a BCP carrier.
기후변화에 의한 이상가뭄 발생 등을 대비하기 위한 비상용수 또는 대체수자원으로서의 지하수 개발수요가 증가하는 추세에 따라 기저유량 확보 및 수질 개선 방안을 수립하는 것은 지속가능한 수자원 이용·관리 측면에 있어서 매우 중요하다. 지하수 및 기저유량 확보 및 수질 개선을 위해서는 지표-지하수 통합 관리가 필요하며 이를 기반으로 지하수 및 기저유량 변동에 대한 인과관계 파악 및 구체적인 조사가 필요하다. 따라서 본 연구에서는 지표-지하수에 대한 계절적·시공간적 변동성을 잘 모의할 수 있는 통합 모델을 기반으로 지하수위 변동을 포함한 물수지 분석과 장·단기 유출해석이 정량적으로 분석하고자 하였으며, 평창군 대화면, 만대지구, 신둔천 유역을 대상으로 간벌, BMP, LID를 비롯한 다양한 시나리오에 따른 기저유량 및 수질변화 그리고 오염특성 파악을 수행하였다. 본 연구에서는 지표-지하수 통합 모델링을 위하여 SWAT-MODFLOW 모형을 활용하였으며, 간벌 시나리오의 경우 모형 Source code를 수정하여 간벌의 효과를 모의할 수 있도록 수정하였다. 또한 BMP와 LID의 경우 각 HRU별로 저감시설에 대한 효율 및 매개변수 조정을 통해 효율을 모의하였다. 모형의 입력자료 구축을 위하여 지표 모형의 경우 DEM, 토지이용도, 토양도를 활용하였으며, 지하수 모형의 경우 지하수기초조사자료에 수록된 수리전도도, 비산출율, 비보유율 조사결과를 활용하여 입력자료를 구축하였다. 그 결과 간벌시나리오의 경우 건기시 최소 6.7% 이상의 하천유량, 22.56% 이상의 기저유량, 그리고 0.3 m 이상의 지하수위 확보가 가능한 것으로 나타났다. BMP의 경우 유역면적의 약 7%에 BMP가 설치된 것으로 나타났으며, 이에 따른 하천 말단 SS저감효율은 6.7%로 나타났으나 유량에서는 큰 차이를 나타내지 못하였다. 마지막으로 LID시나리오의 경우 적용 소유역의 강우시 평균유량이 약 29% 감소하였으며 건기시 평균 기저유량이 약 44%이상, 평균 BFI는 약 0.13 증가한 것으로 나타났다.
본 연구는 메탄생성에 직접적으로 관여하는 혼합 메탄균과 셀롤로스 등의 고분자 물질의 가수분해 반응에 활성이 뛰어난 반추위 내 혐기성 섬유소분해균 중에서 대표적인 Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus flavefaciens 및 Ruminococcus albus를 biochemical methane potential (BMP) 시험에 첨가하였을 때 메탄 발생에 미치는 영향을 조사하고자 수행되었다. BMP시험은 멸균증류수를 첨가한 control과 각각의 미생물 배양액을 첨가한 혼합 메탄균 첨가구 (M), F. succinogenes 첨가구 (FS) R. flavefaciens 첨가구 (RF), R. albus 첨가구 (RA) 및 RA+FS 혼합첨가구와 M+RA+FS 혼합 첨가구로 총 7개 처리구로 각 처리구별 3반복으로 진행되었다. 미생물 배양액의 첨가량은 식종액과 기초혐기배지 (anaerobic basic medium) 혼합액 50 mL에 1% (0.5 mL), 3% (1.5 mL) 및 5% (2.5 mL) 씩 첨가 하였고 배양을 위한 기질로는 cellulose ($2.0g\;VS\;L^{-1}$)이 이용되었다. BMP 시험을 위해 40일간 배양이 지속되었고 중온소화를 위해 $38^{\circ}C$의 배양기에서 수행되었다. 실험의 결과 총 바이오가스 및 메탄 발생량은 5% FS에서 다른 처리구와 비교하여 각각 10.4~22.7% 및 17.4~27.5% 높았다 (p<0.05). 총고형물 (TS) 분해율도 가스발생 결과와 유사하였는데, 전반적으로 FS가 높게 나타났으며, 5% FS에서 64.2%로 가장 높았다. 휘발성 고형물 (VS) 분해율은 5% FS와 5% RF가 각각 68.4 및 71.0%로 가장 높았다. BMP 종료시 배양액내 pH는 모든 처리구가 6.4이상으로 메탄발효에 큰 영향을 주지 않았음을 알 수 있었다. 결론적으로 본 실험의 결과 혐기소화에 대한 회분식 배양에서는 메탄생성단계보다는 가수분해단계에서 특히, F. succinogenes 배양액의 첨가량이 증가할수록 메탄의 생성량을 증가시킴을 알 수 있었다.
Bone morphogenetic protein 1 (BMP-1) is part of a complex capable of inducing ectopic bone formation in mammals. Studies on TGF-β1 processing and Drosophila dorsal-ventral patterning have focused attention on BMP-1 as important in mediating the biological activity of this bone inducing complex. Herein, the bacterial expression, refolding, purification, and initial characterization of the BMP-1 proteolytic domain (BPD) are described. A semi-quantitative fluorescence-based thin layer chromatography assay was developed to assist in rapidly screening for optimal renaturation conditions. According to a preliminary screen for optimal conditions for the refolding of BPD , a detectable proteolytic activity against a high turnover substrate for astacin, a homologous protease from crayfish was observed. The conditions identified have allowed the expression of sufficient amounts of BPD for the characterization of the protein. Its proteolytic activity exhibits the same cleavage specificity as astacin against seven substrates that were previously synthesized for studying astacin. Furthermore, this activity is inhibited by the metal chelator 1,10-phenanthroline but not by its analogue 1,7-phenanthroline. The collagenase inhibitor Pro-Leu-Gly hydroxamate was found to inhibit both astacin and BPD activity. The results presented in this paper argue that BMP-1 does in fact possess an intrinsic proteolytic activity.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제36권5호
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pp.366-374
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2010
Introduction: This study evaluated the capability of silk fibroin (SF) and recombinant human bone morphogenetic protein-2 loaded SF (SF-BMP) as a bone defect replacement matrix when grafted in a calvarial bone defect of rats in vivo. Materials and Methods: A total 70 calvarial critical size defects (5.0 mm in diameter) made on 35 adult female Sprague-Dawley rats were used in this study. The defects were transplanted with (1) rhBMP-2 loaded silk fibroin graft (SF-BMP: 0.8+$10\;{\mu}g$), (2) Silk fibroin (SF: $10\;{\mu}g$), and (3) no graft material (Raw). The samples were evaluated with soft x-rays, alkaline phosphatase activity, calcium/phosphate quantification, histological and histomorphometric analysis at postoperative 4 and 8 weeks. Results: The SF-BMP group ($48.86{\pm}14.92%$) had a significantly higher mean percentage bone area than the SF group ($24.96{\pm}11.01%$) at postoperative 4 weeks.(P<0.05) In addition, the SF-BMP group ($40.01{\pm}12.43%$) had a higher % bone area at postoperative 8 weeks than the SF group ($33.26{\pm}5.15%$). The mean ratio of gray scale levels to the host bone showed that the SF-BMP group ($0.67{\pm}0.08$) had a higher mean ratio level than the SF group ($0.61{\pm}0.09$) at postoperative 8 weeks. These differences were not statistically significant.(P=0.168 and P=0.243, respectively) The ratio of the calcium and phosphate contents of the SF-BMP ($0.93{\pm}0.22$) group was lower than that of the SF ($1.90{\pm}1.42$) group at postoperative 4 weeks. However, the SF-BMP group ($0.75{\pm}0.31$) had a higher Ca/$PO_4$ ratio than the SF ($0.68{\pm}0.04$) at postoperative 8 weeks. These differences were not statistically significant.(P=0.126 and P=0.627, respectively) For the bone-specific alkaline phosphatase (ALP) activity, which is recognized as a reliable indicator of the osteoblast function, the SF-BMP ($23.71{\pm}8.60\;U/L$) groups had a significantly higher value than the SF group ($12.65{\pm}6.47\;U/L$) at postoperative 4 weeks.(P<0.05) At postoperative 8 weeks, the SF-BMP ($21.65{\pm}10.02\;U/L$) group had a lower bone-specific ALP activity than the SF group ($16.72{\pm}7.35\;U/L$). This difference was not statistically significant.(P=0.263) For the histological evaluation, the SF-BMP group revealed less inflammation, lower foreign body reactions and higher bone healing than the SF group at postoperative 4 and 8 weeks. The SF group revealed more foreign body reactions at postoperative 4 weeks. However, this immunogenic reaction decreased and the remnant of grafted material was observed at postoperative 8 weeks. For histomorphometric analysis, the SF-BMP group had a significantly longer bone length to total length ratio than those of the SF group at postoperative 4 and 8 weeks.(P<0.05) Conclusion: The rhBMP-2 loaded silk fibroin graft revealed fewer immunoreactions and inflammation as well as more new bone formation than the pure silk fibroin graft. Therefore, silk fibroin may be a candidate scaffold for tissue engineered bone regeneration.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제46권3호
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pp.191-196
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2020
Objectives: Beyond the original application approved by the U.S. Food and Drug Administration, recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) is used for medication-related osteonecrosis of the jaw (MRONJ) treatment because of its bone remodeling enhancement properties. The purpose of the study was to investigate the bone formation effect of rhBMP-2/absorbable collagen sponge (ACS) in patients with MRONJ. Materials and Methods: In this retrospective cohort study, 26 female patients diagnosed with MRONJ and who underwent mandibular sequestrectomy at Ajou University Dental Hospital from 2010 to 2018 were included. The experimental group was composed of 18 patients who received rhBMP-2/ACS after sequestrectomy, while the control group was composed of 8 patients who did not receive rhBMP-2/ACS after sequestrectomy. A total dose of 0.5 mg of rhBMP-2 was used in the experimental group at a concentration of 0.5 mg/mL. Follow-up panoramic X-rays were taken immediately after the surgery and more than 6 months after the surgery. Using those X-rays, a radiographic index of bone defect area was calculated using the modified Ihan Hren method, which measures radiographic density of the normal bone and the defect site. Results: This study suggests that rhBMP-2 contributes to new bone formation. The mean radiographic index immediately after surgery and more than 6 months after the surgery for the experimental group was 68.4% and 79.8%, respectively. The mean radiographic index immediately after surgery and more than 6 months after the surgery for the control group was 73.4% and 76.7%, respectively (Wilcoxon signed rank test, P>0.05). The mean radiographic index increased 11.4% in the experimental group and 3.27% in the control group (Mann-Whitney U-test, P<0.05). Conclusion: Based on the results, use of rhBMP-2/ACS on bone defect sites after sequestrectomy could be a successful strategy for treatment of MRONJ patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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