• 대한한의학회지
• /
• 제31권1호
• /
• pp.138-152
• /
• 2010

Objective: Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) is one of the representative prescriptions for invigoration of vitality and nourishing of the blood. This study was carried out to investigate the effects of Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) on hair regrowth and cytokine changes in a shaving model of C57BL6 mice. Method: Five-week-old mice were acclimated for 1 week at a temperature between $21-23^{\circ}C{\acute{E}}$, 40-60% relative humidity, and 12h of a light/dark cycle before beginning of the experiment. There were two groups including normal saline (control) and a positive control of oral intake of Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) extract (sample) in 18 female mice. The test compounds were topically treated once a day over 14 days. The hair regrowth was photographically and histologically determined during the experimental period of 14 days. Revelation of TGF-${\beta}1$ and EGF were also determined using immunohistochemistry. In addition to that, IFN-$\gamma$, IL-4 and IL-10 were determined in serum. Results: Hair regrowth in the sample group was promoted earlier and faster than the control group, as shown by concentrations of hairs and thick-hair ratio in the sample group. TGF-${\beta}1$ was not revealed in either control or sample group. EGF was strongly positive in out root sheath of some thick hair of the sample group. Serum IFN-$\gamma$ was significantly decreased in the sample group compared with the control group at 7 experimental days. However, it was not significantly decreased at 14 experimental days. Serum IL-4 was significantly increased in the sample group compared with the control group at 7 experimental days. However, it was not significantly decreased at 14 experimental days. Serum IL-10 was decreased in the sample group compared with the control group, but with no real statistical significance. Conclusion: These results suggest that Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) has hair growth promoting activity and it can be used for treatment of alopecia. Also, these effects relate to EGF revelation of hair roots, a decrease in serum IFN-$\gamma$, and an increase of serum IL-4.

• 한국작물학회지
• /
• 제60권1호
• /
• pp.70-74
• /
• 2015

LED 청색광과 적색광을 2년근 인삼에 대하여 혼합 처리하여 생육 반응과 진세노사이드 함량에 미치는 영향을 알아 본 결과 인삼의 지상부의 엽면적과 건물중은 청색광과 적색광의 비율이 1:1 처리에서 상대적으로 가장 높았으나 인삼 뿌리의 건물중은 1:3 비율이 가장 컸다. 진세노사이드 함량은 지상부은 청색광과 적색광 비율이 1:1에서 가장 높았지만 인삼 뿌리의 함량은 1:1 비율이 가장 낮았다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제37권2호
• /
• pp.277-286
• /
• 2007

The edentulous posterior maxilla generally provides a limited amount of bone height because of atrophy of the ridge and pneumatization of the maxillary sinus, Maxillary sinus augmentation is one of the surgical techniques for reconstruction of the severely resorbed posterior maxilla. The purpose of this study was to evaluate the survival rate of implants and the long-term changes of graft height after maxillary sinus augmentation by lateral window approach. From September 1996 to July 2004, maxillary sinus augmentation with mixed grafts of autograft, allograft, xenograft and alloplast were performed on 45 patients and 100 implants were placed. We evaluated the survival rate of implants and the changes of BL(bone length)/IL(implant length) according to time using panoramic radiographs. The survival rate of implants was 91.0% for follow-up period. The mean reduction of graft heights was 0.34mm(3.0%) for 6 months and 1.22mm(1O.66%) for 3 years after augmentation. The total mean BL/IL was $1.34{\pm}0.21$ during 5 year observation period after augmentation and decreased slightly over time. The result means that graft materials were stable above the implant apex. BL/ILs of 1stage procedure were significantly decreased at 1-2 year, 3-4 year after augmentation and no statistically significant changes were observed in those of 2 stage procedure. The graft materials of both procedures were stable above the implant apex. No statistically significant changes of BL/IL were observed in the grafts combined with low amount of autogenous bone or without autogenous bone. The graft materials of both groups were stable above the implant apex. The results indicated that the placement of dental implants with maxillary sinus augmentation showed predictable clinical results and the grafts combined with low amount of autogenous bone or without autogenous bone had long-term resistance to resorption in maxillary sinus.

• Korean Journal of Acupuncture
• /
• 제22권1호
• /
• pp.33-41
• /
• 2005

갑작스러운 요통과 양측하지통, 하지의 근력 감소, 대소변 장애 및 운동, 감각장애로 양방병원에서 마미증후군으로 진단받고 추궁판 절제술과 감압술을 시행 후 임상적인 호전을 보이지 않은 환자 1례에 대해 홍화자(紅花子) 약침요법(藥鍼療法)을 중심으로 복합적인 한방치료를 시행한 결과 요통에 대한 VAS와 요통점수표, ODI 항목에서는 각 항목 모두에서 현저한 호전 양상을 나타내었다. 운동기능 및 보행에 있어서 입원 당시에 보행기에 의지하여 보행하였는데 치료 후에는 안독으로 보행이 가능하고 일상적인 가벼운 생활도 가능해지게 되었다. 배뇨기능에 있어서도 자발적인 배뇨가 가능할 정도로 완전회복 되었다. 하지만 배변의 상태는 입원 당시와 치료 후에는 변의가 느껴지는 것 이외에 자발적인 배변은 이루어지지 않았다. 감각 기능의 회복에 있어서도 온통각, 압촉각과 하지 냉감은 호전 양상을 보였으나 안장 감각과 괄약근의 기능은 거의 회복되지 않았다. 본 연구를 기초로 하여 향후 수술이나 양방적인 치료 후에 발생할 수 있는 후유증의 관리에 있어서 홍화자(紅花子) 약침(藥鍼)에 대한 더욱 심도있는 후속 연구가 이루어져야 할 것이다.

• Molecules and Cells
• /
• 제41권2호
• /
• pp.140-149
• /
• 2018

The $TIS21^{/BTG2/PC3}$ gene belongs to the antiproliferative gene (APRO) family and exhibits tumor suppressive activity. However, here we report that TIS21 controls lipid metabolism, rather than cell proliferation, under fasting condition. Using microarray analysis, whole gene expression changes were investigated in liver of TIS21 knockout (TIS21-KO) mice after 20 h fasting and compared with wild type (WT). Peroxisome proliferator-activated receptor alpha ($PPAR{\alpha}$) target gene expression was almost absent in contrast to increased lipid synthesis in the TIS21-KO mice compared to WT mice. Immunohistochemistry with hematoxylin and eosin staining revealed that lipid deposition was focal in the TIS21-KO liver as opposed to the diffuse and homogeneous pattern in the WT liver after 24 h starvation. In addition, cathepsin E expression was over 10 times higher in the TIS21-KO liver than that in the WT, as opposed to the significant reduction of thioltransferase in both adult and fetal livers. At present, we cannot account for the role of cathepsin E. However, downregulation of glutaredoxin 2 thioltransferase expression might affect hypoxic damage in the TIS21-KO liver. We suggest that the $TIS21^{/BTG2}$ gene might be essential to maintain energy metabolism and reducing power in the liver under fasting condition.

• 한국독성학회:학술대회논문집
• /
• 한국독성학회 2002년도 국제심포지움
• /
• pp.106.2-132
• /
• 2002

형질전환 (유전자 결핍; Knockout) Min 마우스를 이용하여 대장암 발생에서 배추, 양배추 주성분인 indole-3-carbinol (I3C)의 대장암 예방효과를 규명하고자 하였다. 실험동물로는 C57BL/6J-Apc$^{min/+}$(Min 마우스)계의 5내지 6주령의 수컷 이형접합체 형질전환 마우스 70마리와 C57BL/6J계의 동일 산자, 동일 주령의 수컷 wildtype 비형질전환 마우스 10kfl를 The Jackson Laboratory 사 (Bar harber, ME, USA)로부터 직접 구입하였다. C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 (Min)마우스 70마리를 각 군 20내지 25마리씩 세군으로 나누었다. Group 1에는 20마리, Group 2에는 25마리, Group 3에는 25마리를 배치하고, I3C 투여 실험군 (Group 1과 2)에는 실험시작시에 AIN-76A 분말사료에 I3C가 각각 100 및 300ppm이 함유되도록 조제하여 공급하였다. 그리고 실험군(Group 3)에는 실험시작부터 종료시까지 AIN-76A 정제고형사료(Teklad사, WI, USA)를 자유로이 급이하였다. 각군간의 체중, 사료 및 음수소비량을 매 2주마다 측정하였고, 10주간 (16주령)의 실험종료시에는 최종체중과 간장, 신장, 비장 등의 장기무게를 측정하여 상대장기 무게비를 산출하였다. 대조군으로서 C57BL/6J계의 동일 산자, 동일 주령의 수컷 wildtype 비형질전환 마우스 10마리는 같은 조건의 사육실에서 AIN-76A 정제고형사료를 33주간 자유로이 급이하였다. 실험동물은 부검전에 하룻밤 동안 절식하고 이산화탄소 흡입 마취하에서 흉대동맥을 절단하여 방혈하고 각 장기(심장, 폐, 위)를 적출하여 생리심염수에 넣어 장기무게를 측정하고 포르말린에 고정하였다. 소장과 대장의 검사를 위하여 위의 식도부위와 직장을 실로 결찰하여 적출하고 생리심염수를 주입하여 팽창시켜, 십이지장, 공장, 및 회장, 그리고 대장으로 나누어 여과지에 펼친 후 포르말린에 고정하였다. 소장과 대장은 육안 및 자동 영상분석길ㄹ 이용한 분석이 끝난 후에 각 부위별로 4-6개의 절편을 작제하여 포르말린에 재고정하고, 통상적인 조직처리과정, 파리핀 포매 및 3-4$\mu$m 두께의 조직절편을 제작하여 H&E 염색을 실시하여 현미경으로 검경하였다. 약 1주일간의 포르말린 고정이 끝난 소장 및 대장을 부위별, 별 종양개수 및 분포를 자동영상분석기(Kontron Co. Ltd., Germany)로 분석하였다. 체의 변화, 장기무게, 사료소비량 및 마리당 종양의 개수에 대한 통계학적 유의성 검증을 위하여 Duncan's t-test로 통계처리 하였고, 종양 발생빈도에 대하여는 Likelihood ration Chi-square test로 유의성을 검증하였다. C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 마우스에 AIN-76A 정제사료만을 투여한 대조군의 대장선종의 발생률은 84%(Group 3; 21/25례)로써 I3C 100ppm 및 300ppm을 투여한 경우에 있어서는 각군 모두 60%(Group 1; 12/20 례, Group 2; 15/25 례)로 감소하는 경향을 나타내었다. 대장선종의 마리당 발생개수에 있어서는 C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 마우스에 AIN-76A 정제사료만을 투여한 대조군은 1.40$\pm$0.24(100%)에 비하여 I3C 저농도 투여 실험군(Group 1; 0.85$\pm$0.23; 61%, P<0.01), 그리고 I3C 고농도 투여 실험군(Group 2 ; 1.32$\pm$0.29 ; 94%)의 순으로 감소하였다. 선종의 크기별 종양의 발생개수의 분포에 있어서 I3C 저농도 투여 실험군에 있어서는 선종의 크기가 3mm이하의 수가 현저하게 감소하였다. C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 마우스에 AIN-76A 정제사료만을 투여한 대조군의 부위별 소장선종의 발생수는 십이지장부위를 제외하고 각 군에서 유의한 변화는 관찰되지 않았다. 십이지장 종양의 발생개수에서만 I3C 저농도 투여 실험군(Group 1 ; 3.11$\pm$0.85)이 대조군 (Group 3: 1.48$\pm$0.35) 및 I3C 고농도 투여 실험군(Group 2: 1.56$\pm$0.47)에 비하여 유의성 있게 증가하였다. (P<0.05). 따라서 I3C은 소장에서는 암예방 효과가 뚜렷하지 않으나, 대장에 대한 암에방 효과가 있을 것으로 생각된다. 소장 및 대장을 제외한 간장, 신장, 비장, 심장, 폐 그리고 위 등의 기타 장기에서의 조직병리학적 변화는 관찰되지 않았다. 소장 및 대장의 종양은 선종(polyps)으로 관찰되었다. 지난 10여년간 형질전환 및 유전자 결핍 실험동물의 종류가 기하 급수적으로 증가하여 이용되고 있다. 가족성 대장 선종성 용종증(FAP)의 대표적인 모델로 이용되고 있는 C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 마우스를 사용하여 배추나 양배추의 주요성분인 Indole-3-carbinol(I3C)의 대장암 예방효과가 있는지를 검색하여 본 결과 AIN-76A정제사료만을 투여한 대조군의 대장선종의 발생률 84%에 비하여 I3C 100 및 300ppm을 투여한 실험군에 있어서 각군 모두 60%로서 감소하는 경향을 나타내었으며, 대장선종의 마리당 발생개수에 있어서는 대조군의 1.40$\pm$1.041를 100%로 환산하였을 경우 I3C 저농도 및 고농도 투여 실험군에서는 각각 약 61%와 94%를 나타내여 감소하였다. 특히 대장선종의 크기별 분포에 있어서 선종의 크기가 3mm이하의 수가 현저하게 감소하였다. 따라서 저농도 I3C의 투여는 실험적 유전성 가족성 대장 선종성 용종증 모델에 있어서 어느정도 암 예방효과가 있는 것으로 생각된다. 그러나 소장 선종의 발생에는 별 영향이 없는 것으로 생각된다. 그러나 본 실험에 사용된 C57BL/6J-Apc$^{min/+}$계 수컷 이형접합체 형질전환 마우스는 실험개시 시점이 7내지 8주령이 경과하여 이미 태생기부터 소장 및 대장의 선종 발생이 진행되어 온 것을 감안하고 특히 비스테로이드계 항염증 소염제(NSAIDS)와 같은 강력한 COX-2억제제가 아님을 고려하면, 상당한 선종의 발생을 억제할 수 있는 가능성이 매우 높다고 생각한다. 또한 이제까지 배추나 양배추 성분의 복합성분들에 대한 실험적 대장암 모델에서의 촉진효과 등에 대한 보고들이 있어 온 점을 고려할 때 위암(Kim 등, 1994) 간암(Kim 등, 1994), 유방암(Grubbs, 등, 1995; Bradlow 등, 1995)에 대한 예방효과가 있을 것으로 생각된다. 앞으로 이러한 종양조직내에서의 COX-2 및 iNOS mRNA와 단백질의 발현정도를 분자병리학적으로 연구중에 있으며, 향후 십자화과식물 성분인 indole-3-carbinol이 마우스뿐 만 아니라 랫드의 화학발암물질에 의한 대장종양에 대한 억제효과 있는지 연구 필요가 있다. Min 마우스와 같은 형질 전환(유전자결핍;knockout) 실험동물을 이용한 새로운 중기 발암성 시험범의 확립을 통한 각종 환경 유해물질의 발암성 유무 및 COX-2 억제작용이 있는 식품인자의 암예방 후보물질을 체계적으로 검색하는데 유용하게 활용될 수 있을 것으로 생각한다.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
• /
• 제17권
• /
• pp.59-63
• /
• 1999

벼의 엽록체 small HSP의 고온 스트레스 하에서의 기능을 밝히기 위하여 Oshsp21 cDNA를 pET 발현 vector에 도입하였다. 형질전환된 대장균 배양액에 IPTG를 첨가하여 단백질 발현을 유도시킨 다음 고온 stress 하에서의 생존율을 대조구와 비교하였다. 그 결과 대조균주의 경우 $50^{\circ}C$에서의 생존율이 크게 감소하였으나 Oshsp21이 발현된 대장균의 경우 70% 이상의 생존율을 나타내었다. 또한 대장균 단백질을 $55^{\circ}C$에서 30분간 열처리한 후, 대장균 단백질을 가용성과 비가용성 단백질로 분획한 다음, 각각의 비율을 조사한 결과, 대조균주의 경우 총 단백질의 약 60%가 비가용성 단백질로 변성되었으나, Oshsp21을 발현시킨 대장균의 경우 총 단백질의 약 35%만이 비가용성 단백질로 나타났다. 이러한 결과는 벼의 엽록체 small HSP는 세포내에서 분자 chaperone으로 기능하여 고온내성을 부여할 수 있음을 나타낸다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
• /
• 제54권2호
• /
• pp.94-100
• /
• 2011

Bacillus licheniformis로 부터 phospholipase D (PLD)로 추정되는 유전자를 PCR 기술을 이용하여 분리하여 pGEM-T easy 운반체에 cloning 하였다. 분리된 유전자는 His6가 붙은 pET-21 운반체를 이용하여 E. coli BL21 (DE3)에서 발현시켰다. 재 조합된 PLD는 nikel-nitrilotriacetic acid (Ni-NTA) resin을 갖는 column을 이용하여 affinity chromatography로 분리하였다. SDS-PAGE 분석 결과 PLD로 추정되는 단백질은 약 44 kDa의 주요 단일밴드를 나타내었다. 분리된 효소의 최적 활성도는 pH 7.0에서 나타났으며 이 조건에서 또한 효소가 제일 안정되었다. 효소활성에 미치는 최적 온도는 $40-45^{\circ}C$의 온도에서 형성되어 비교적 높은 온도를 나타내었으며 비교적 넓은 범위의 온도에서 상당히 높은 효소 활성도를 나타내었다. 여러 가지 detergent 중에서 Triton X-100을 0.6 mM까지 첨가할 경우 PLD의 효소활성도는 점진적으로 증가하여 대조구 대비 최대 181%의 효소 활성도를 나타내었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제27권7호
• /
• pp.1216-1222
• /
• 2017

To develop starters for the production of functional foods or materials, lactic acid bacteria producing ${\gamma}-aminobutyric$ acid (GABA) were screened from jeotgals, Korean fermented seafoods. One isolate producing a high amount of GABA from monosodium $\text\tiny{L}$-glutamate (MSG) was identified as Enterococcus avium by 16S rRNA gene sequencing. E. avium M5 produced $18.47{\pm}1.26mg/ml$ GABA when incubated for 48 h at $37^{\circ}C$ in MRS broth with MSG (3% (w/v)). A gadB gene encoding glutamate decarboxylase (GAD) was cloned and overexpressed in E. coli BL21 (DE3) using the pET26b (+) expression vector. Recombinant GAD was purified through a Ni-NTA column and the size was estimated to be 53 kDa by SDS-PAGE. Maximum GAD activity was observed at pH 4.5 and $55^{\circ}C$and the activity was dependent on pyridoxal 5'-phosphate. The $K_m$ and $V_{max}$ values of GAD were $3.26{\pm}0.21mM$ and $0.0120{\pm}0.0001mM/min$, respectively, when MSG was used as a substrate. Enterococcus avium M5 secretes a lot of GABA when grown on MRS with MSG, and the strain is useful for the production of fermented foods containing a high amount of GABA.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제32권6호
• /
• pp.800-807
• /
• 2022

Four aprE genes encoding alkaline serine proteases from B. subtilis strains were used as template genes for family gene shuffling. Shuffled genes obtained by DNase I digestion followed by consecutive primerless and regular PCR reactions were ligated with pHY300PLK, an E. coli-Bacillus shuttle vector. The ligation mixture was introduced into B. subtilis WB600 and one transformant (FSM4) showed higher fibrinolytic activity. DNA sequencing confirmed that the shuffled gene (aprEFSM4) consisted of DNA mostly originated from either aprEJS2 or aprE176 in addition to some DNA from either aprE3-5 or aprESJ4. Mature AprEFSM4 (275 amino acids) was different from mature AprEJS2 in 4 amino acids and mature AprE176 in 2 amino acids. aprEFSM4 was overexpressed in E. coli BL21 (DE3) by using pET26b(+) and recombinant AprEFSM4 was purified. The optimal temperature and pH of AprEFSM4 were similar to those of parental enzymes. However, AprEFM4 showed better thermostability and fibrinogen hydrolytic activity than the parental enzymes. The results indicated that DNA shuffling could be used to improve fibrinolytic enzymes from Bacillus sp. for industrial applications.