The clinical isolate Staphylococcus aureus SA8 was resistant to tetracycline(Tc) and harboured a plasmid pKH1(24.82 kb). pKH1 was shown by curing and by transformation to specify resistance to Tc. The cleavage map of a pKH1 was determined by restricction enzyme mapping techniques. Cleavage map is given for BglII, EcoRI, HpaII, PvuII and SalI. Restriction endonuclease BamHI, BglI, BstEII, HpaI, PstI, and XhoI have no sites on this plasmid. HaeIII, XbaI, and HindIII have 5, 6, 14 sites, respectively.
We investigated a potential for glucose production from cellulose material using two kinds of hyperthermophilic enzymes, endocellulase (EG) and beta-glucosidase (BGL). Two BGLs, from hyperthermophile Pyrococcus furiosus and mesophile Aspergillus aculeatus, were compared with P. horikoshii endocellulase (EGPh) for complete hydrolysis of cellulose. The combination reactions by each BGL enzyme and EGPh could produce only glucose without the other oligosaccharides from phosphoric acid swollen Avicel (PSA). The combination of both the hyperthermophilic cellulases, BGLPf and EGPh, will be adaptable to a high efficiency system to produce glucose at high temperature.
한국산 담수어류의 잉어목, 황어아과(Leuciscinae) 어류 2속 5종의 계통적 유연관계를 구명하기 위하여 mtDNA분석을 실시하였다 6 base를 인지하는 10개의 제한효소를 처리하여 얻어진 강tDNA의 크기는 16.5-17.5 Kb였으며 Bcl I, Bgl I, Bgl II, Hin dIII, Pvu II, Xba I 등은 종간 차이가 뚜렷하였다. 각종의 집단간 mtDNA분화정도는 매우 낮았으나(p=1% 미만) M. oxyephalus의 무주집단과 제주집단은 예리적으로 큰 차이를 보였다(p=5.3%) Moroco속의 종간 분화정도를 비교한 결과 M. oxycephafus와 M. lagowsk서 사이가 평균 f=7.2%로 근면관계가 제일 가까웠고 M. keumkang과 M. semotilus는 타종들과 근연관계가 제일 멀었다. Moroco속과 Phoxinus속간의 평균 유전적 분화정도는 f=13.7%로 현저한 차이를 보였다. Brown 등(1979)의 공식을 이용하여 이들 황어아과 2속 5종의 분화시기를 추정한 결과 이들은 후기 선신세(Pliocene)와 흥적세(Pleistocene) 사이에 분화된 것으로 추정되었으며 이 결과는 동위효소 연구에서 얻어진 결파(Yang and Min, 1989)와 잘 일치한다.
Genetic variants of Hanwoo mtDNA in the region of cytochrome oxidase subunit I, II and III complex were detected using restriction enzymes. PCR primers were designed based on the bovine mtDNA sequence, and 6 primer sets (Mt4, Mt5, Mt6, Mt7, Mt8 and Mt9) were used. A total of 20 restriction enzymes were used, and 6 restriction enzymes, which were Hinf I, Pvu II, Rsa I, Eco RI, Bgl II, and Msp I, showed genetic polymorphisms. Significant associations between genetic variants and weight traits were observed at WT15 (p<0.05) and WT18 (p<0.01) with Pvu II for Mt9, Bgl II for Mt6 and Rsa I for Mt8 segments in the region of cytochrome oxidase subunit complex. Significant associations were also observed at Mt9-Pvu II and Mt6-Bgl II segments for WT9 (p=0.01), WT12 (p=0.02), respectively. These results suggest that genetic variants of mtDNA in the region of cytochrome oxidase subunit complex may be candidate segments for improvement of animal growth as weight traits.
R-plasmid(pSBK203, 2.5Mdal) conferring chloramphenicol resistance was isolated from mutiple antibiotic resistant Staphylococcus aureus D-H-1. Bacillus subtilis BD170 was transformed by this plasmid and restriction enzyme clevage sites of this plasmid were mapped for the cloning of chloramphenicol resistance gene. Taq I partial digested fragment of pSBK203(1.3kb) inserted into Cla I site of pBD9 appears to have both regulatory region for induction and structural gene for chloramphenicol resistance whereas Rsa I fragment (1.3kb, both ends are staggered away 0.1Kb from those of Taq I fragment) inserted into Sca I site of pBR322 showed constitutive expression in E. coli. Hinf I, Taq I, and Bgl II restriction enzyme recognition sites are found in both Rsa I fragment and Taq I fragment. Among these, Bgl II recognition site was associated with chloramphenicol resistance.
Li, Ling;Lee, Soo Jin;Yuan, Qiu Ping;Im, Wan Taek;Kim, Sun Chang;Han, Nam Soo
Journal of Ginseng Research
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v.42
no.4
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pp.412-418
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2018
Background: Ginsenoside Rg3(S) and compound K (C-K) are pharmacologically active components of ginseng that promote human health and improve quality of life. The aim of this study was to produce Rg3(S) and C-K from ginseng extract using recombinant Lactococcus lactis. Methods: L. lactis subsp. cremoris NZ9000 (L. lactis NZ9000), which harbors ${\beta}$-glucosidase genes (BglPm and BglBX10) from Paenibacillus mucilaginosus and Flavobacterium johnsoniae, respectively, was reacted with ginseng extract (protopanaxadiol-type ginsenoside mixture). Results: Crude enzyme activity of BglBX10 values comprised 0.001 unit/mL and 0.003 unit/mL in uninduced and induced preparations, respectively. When whole cells of L. lactis harboring pNZBglBX10 were treated with ginseng extract, after permeabilization of cells by xylene, Rb1 and Rd were converted into Rg3(S) with a conversion yield of 61%. C-K was also produced by sequential reactions of the permeabilized cells harboring each pNZBgl and pNZBglBX10, resulting in a 70% maximum conversion yield. Conclusion: This study demonstrates that the lactic acid bacteria having specific ${\beta}$-glucosidase activity can be used to enhance the health benefits of Panax ginseng in either fermented foods or bioconversion processes.
Kim, Hyun-Jung;Kim, Yoon-Hee;Cho, Moon-Jung;Shin, Keum;Lee, Dong-Heub;Kim, Tae-Jong;Kim, Yeong-Suk
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.38
no.6
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pp.547-560
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2010
The optimum culture condition of Schizophyllum commune for the cellulase production and its enzymatic characteristics for saccharification of cellulosic biomass were analyzed. S. commune secrets ${\beta}$-1,4-xylosidase (BXL) and cellulases, including endo-${\beta}$-1,4-glucanase (EG), cellobiohydrolase (CBH), and ${\beta}$-glucosidase (BGL). The optimum reaction temperature for all cellulases was $50^{\circ}C$ and the thermostable range was $30{\sim}40^{\circ}C$C. The optimum reaction pH for all cellulases was 5.5 in a range of temperature from $0^{\circ}C$ to $55^{\circ}C$. The best nutritions for the cellulase production of S. commune among tested nutrients were 2% cellulose for the carbon source and corn steep liquor or peptone/yeast extract for the nitrogen source without vitamins. The environmental culture condition for the cellulase production was 5.5~6.0 for pH at $25{\sim}30^{\circ}C$. The enzyme activities of EG, BGL, CBH, and BXL were 3670.5, 631.9, 398.5, and 15.2 U/$m{\ell}$, respectively, after concentration forty times from the culture broth of S. commune which was grown at the optimized culture condition. Alternative filter paper unit assay showed 11 FPU/$m{\ell}$ enzyme activity. The saccharification tests using cellulase of S. commune showed the low saccharification rate on tested hardwoods but a high value of 50.5% on cellulose, respectively. The saccharification rate (50.5%) of cellulose by cellulase produced in this work is higher than 45.7% in the commercial enzyme (Celluclast 1.5L, 30 FPU/g, glucan).
Multiplication of Herpes simplex virus type-1 was observed by electronmicroscopy, a gene library of the genome was constructed and thymidine kinase gene was cloned. Vero cells infected with the virus were lysed 48 h p.j. and multinucleated giant cells were observed approximately at 72 h p.i. The nucleocapsids were observed in nuclei and cytoplasm, and the assembled nucleocapsids were budded out through the vacuole and cytoplasmic membranes, and then virions were released from the cells. HSV-1 genome DNA was digested with BamHI and BglII enzymes and then the gene library of the genome fragments were constructed. The BamHI cleaved the genome DNA into twenty-seven fragments in the range of 1.1 - 14 kb, and BglII cleaved the genome DNA into sixteen fragments in the range of $4.5{\sim}20.1\;kb$. The pHLA-12 and pHLB-4 recombinant plasmids were contained TK gene by Southern blot analysis. The molecular sizes of the fragments which contained the TK gene were 3.74 in pHLA-12 and 6.41kb in pHLB-4 recombinant plasmid, respectively.
Consecutive pepper cultivation in plastic film houses may lead to salt accumulation because pepper is considered a heavy nutrient feeder. For this reason, appropriate methods of fertilizer application should be established. Thus, we investigated the effect of different intervals of side-dressing N and K fertilizer applications on soil and red pepper in a plastic film house. All the amounts of recommended compost and phosphorus fertilizer were applied as basal dressing. Cultivars of the pepper plant were Cheon-Ha-Dae-Se (CHDS) and NW-BiGaLim (NW-BGL). Nitrogen and potassium fertilizers were treated as side-dressing at different intervals, 22 times in every 10 days, 15 times in every 15 days, and 11 times in every 20 days. Soil pH decreased with decreasing the intervals of side-dressing applications, whereas electrical conductivity (EC) declined with the increasing fertilizer application intervals. In particular, EC value decreased by up to 75% with CHDS cultivar in the plot of 20 day-interval and with NW-BGL cultivar in the plot of 15 day-interval. The concentrations of available phosphorus in the soils increased with increasing the interval. The concentration of exchangeable $K^+$ increased but exchangeable $Ca^{2+}$ and $Mg^{2+}$ decreased in all the plots, except in the control plot. The concentrations of nitrogen and phosphorus in leaves of the pepper plants were lowest in the control plot. Potassium concentrations in the pepper leaves were high in the control plot and in the plots of CHDS with 10 day-interval and NW-BGL with 15 day-interval. Red pepper productivity was high in the plots of 10- and 15 day-intervals for CHDS cultivar and 15- and 20 day-intervals for NW-BGL cultivar. Therefore, the 15 day-interval of side-dressing N and K applications was considered as an appropriate method for cultivating pepper plants and protecting soil in plastic film houses.
A cellobiose-utilizing recombinant yeast having $\beta$-glucosidase activity was developed for ethanol production from a mixture of glucose and cellobiose. Using $\delta$-sequences of Tyl transposon of yeast as target sites for homologous recombination, a heterologous gene of $\beta$-glucosidase was integrated into the chromosome of Saccharomyces cerevisiae. The $\delta$-integrated recombinant yeast, Saccharomyces cerevisiae L2612 (Pb-BGL), showed perfect mitotic stability even in nonselective media and showed ca. 1.5 fold higher $\beta$-glucosidase activity than the recombinant yeast harboring the $2\mu$-based plasmid vector system. A mathematical model was developed to describe the $\beta$-glucosidase formation and ethanol production from the Saccharomyces cerevisiae L2612 ($p\delta-BGL$). The model newly described that the heterologous $\beta$-glucosidase production mediated by ADH1 promoter is regulated by glucose and repressed by ethanol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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