Free adenine is mainly made during the polyamine synthesis in proliferating cells. Adenine molecule itself acts biological modulator in inflammation and cell death. In the previous report, we showed that adenine induces apoptotic cell death of B16-F10 mouse melanoma cells by eliciting of PARP and caspase 3 cleavages. In this study, we examined the adenine effect on other apoptotic molecules affecting caspase activation in B16-F10 melanoma cells. Adenine treatment make pro-apoptotic molecules active states. Bax/Bcl-2 ratio was increased and phosphorylation of mTOR and Akt was decreased in a dose dependent manner. These results showed the possibility that Bax/Bcl-2, Akt and mTOR are engaged in adenine induced apoptosis of melanoma cells.
Background: The aim of this study was to investigate the in vitro inhibitory effects of Fucofuroeckol-A isolated from Eisenia bicyclis against tyrosinase activity and 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX)-induced melanin biosynthesis in B16F10 melanoma cells. Result: Among the ethanolic (EtOH) extract of E. bicyclis and its organic solvent fractions, the ethyl acetate (EtOAc) soluble fraction showed a noticeable inhibitory effect on mushroom tyrosinase with an $IC_{50}$ value of $37.6{\pm}0.1{\mu}g/mL$. Repeated column chromatography of the active EtOAc fraction resulted in the isolation of Fucofuroeckol-A. It evidenced more potent tyrosinase inhibitory effect with an $IC_{50}$ value of $11.4{\pm}1.4{\mu}M$ than arbutin ($IC_{50}=1076.6{\pm}44.3{\mu}M$), which was used as a positive control. Lineweaver-Burk plots suggest that Fucofuroeckol-A plays as a noncompetitive inhibitor against tyrosinase. Furthermore, we have evaluated the inhibitory effects of Fucofuroeckol-A on IBMX-induced melanin formation in B16F10 melanoma cells. Fucofuroeckol-A ($12.5-100{\mu}M$) exhibited a significant inhibition of melanin production in the melanoma cells. Conclusion: In the present study, we suggested that Fucofuroeckol-A might prove possibility as a novel inhibitor of melanin biosynthesis in cosmetic applications.
Whitening agents derived from natural sources which do not have side effects are sought after. Schizophragma hydrangeoides is an edible plant that grows wild on Jeju Island. We aimed to determine whether S. hydrangeoides extracts show anti-melanogenic activity. Here, we found that 70% ethanol extracts of S. hydrangeoides leaf suppressed α-melanocyte-stimulating hormone-induced melanogenesis in B16F10 mouse melanoma cells. This activity of anti-melanogenesis in B16F10 cells were investigated by determining melanin content and tyrosinase activity, and by performing western blotting. The 70% ethanol extract downregulated tyrosinase and tyrosinase-related protein 1. In addition, the n-hexane fraction of S. hydrangeoides leaf (HFSH) exhibited significant anti-melanogenic activity among the various solvent fractions tested without reducing the viability of B16F10 cells. Taken together, these results indicate that extracts from S. hydrangeoides leaf can influence cellular processes via modulation of tyrosinase activity. Hence, S. hydrangeoides can be used as a whitening agent in the cosmetic industry and as a therapeutic agent for treating hyperpigmentation disorders in the clinic.
Song-Yoon Choi;Je-Back Lee;Hyeon-Ji Yeom;Min-Jeong Oh;Jin-Young Lee
Journal of Life Science
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v.34
no.2
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pp.105-112
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2024
In this study, the various whitening activities of Inonotus obliquus were assessed for potential use as functional cosmetic materials. When measuring electron donating ability to confirm the antioxidant ability of I. obliquus extract, increased activity was observed as the concentration increased, and it was found an outstanding antioxidant capacity of 82.1% at a 1,000 ㎍/ml concentration. Also, the tyrosinase inhibitory effect, related to a whitening effect, was found to have inhibitory activity that increased in a concentration-dependent manner. The results of verifying the viability of melanoma cells (B16F10) using an MTT assay showed cell viability of more than 80% at concentrations below 100 ㎍/ml. Therefore, cell-related experiments were conducted at 25, 50, and 100 ㎍/ml concentrations. By measuring protein expression related to melanin synthesis via treating B16F10 cells with I. obliquus extract, it was confirmed that protein expression was inhibited in all factors, depending on the concentration. TRP-1 and MITF appeared by 40.1% and 64.2% amount of expression, respectively, at 100 ㎍/ml concentrations, and tyrosinase and TRP-2 were verified as having better protein expression inhibition than arbutin. In measuring mRNA expression related to melanin synthesis by treating B16F10 cells with I. obliquus extract, it was confirmed that mRNA expression was suppressed as the concentration increased. Accordingly, it was confirmed that I. obliquus extract has excellent whitening activity and could be used as a cosmetic material.
Objectives : This research was executed to verify antitumor effect and protective effect on doxorubicin(Doxo)-induced toxicity of Cultivated Wild Ginseng(CWG) and synergic effect of CWG with Doxo in B16/F10 melanomas-bearing C57BL/6 mice. Methods : To evaluate protective effect on doxorubicin(Doxo)-induced toxicity and enhancing effect on the antitumor activity of Doxo, CWG water extract(0.5 ml) was intraperitoneally injected for 10 days, in combination with intraperitoneal injection of Doxo(4 mg/kg) on days 12, 16, 19, to mice subcutaneously inoculated with $2{\times}10^6/ml$ B16/F10 melanoma cells. In order to investigate antitumor effect of CWG, CWG water extract(0.5 ml) was intraperitoneally injected for 10 days to mice subcutaneously inoculated with $2{\times}10^6/ml$ B16/F10 melanoma cells. Results : The body weights of melanoma-bearing mice increased following B16/F10 cells inoculation. In contrast, such an increase in body weights was significantly attenuated by Doxo administration. Whereas CWG inhibits the decrease in body weights induced by Doxo. The tumor volume and tumor weights of melanomas-bearing mice dramatically increased following B16/F10 cells inoculation, In contrast, such an increase in tumor volume and tumor weights were significantly attenuated by Doxo or CWG administration. But the synergic effect of CWG with Doxo was not observed. The reduction of cellularity of seminiferous epithelia, level of spermatogonium and spermatid induced by Doxo was recovered by CWG administration. BrdU labeling index of spermatogonium was remarkably decreased in Doxo group but was no change in CWG group. Whereas the incidence and intensity of BrdU labelled spermatocytes and spermatids were increased by CWG administration than those of Doxo group. Conclusions : The obtained results suggest that CWG have antitumor effect and protective effect on doxo-induced testicular toxicity. This effect might be mediated through the supplementation of vital energy.
Cochinchina momordica seeds (CMS) have been widely used due to antitumor activity by Mongolian tribes of China. However, the details of the underlying mechanisms remain unknown. In the present study, we found that an EtOAc (ethyl ester) extract of CMS (CMSEE) induced differentiation and caused growth inhibition of melanoma B16 F1 cells. CMSEE at the concentration of $5-200{\mu}g/ml$ exhibited strongest anti-proliferative effects on B16 F1 cells among other CMS fractions (water or petroleum ether). Moreover, CMSEE induced melanoma B16 F1 cell differentiation, characterized by dendrite-like outgrowth, increasing melanogenesis production, as well as enhancing tyrosinase activity. Western blot analysis showed that sustained phosphorylation of p38 MAP accompanied by decrease in ERK1/2 and JNK dephosphorylation were involved in CMSEE-induced B16 F1 cell differentiation. Notably, 6 compounds that were isolated and identified may be responsible for inducing differentiation of CMSEE. These results indicated that CMSEE contributes to the differentiation of B16 F1 cells through modulating MAPKs activity, which may throw some light on the development of potentially therapeutic strategies for melanoma treatment.
Shin, Bo Yeon;Jung, Bo Ram;Jung, Jong Gi;Cho, Seung Sik;Bang, Mi Ae
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.46
no.3
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pp.320-326
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2017
This study investigated the water extracts of fallen pear (FPWE) on tyrosinase activity and melanogenesis. In the present study, we examined the effects of FPWE on mushroom tyrosinase activity in vitro, B16F10 melanoma cell tyrosinase activity, melanin contents, and expression of melanogenic enzyme proteins such as tyrosinase. An apparent down-regulatory effect on tyrosinase activity was observed when B16F10 cells were incubated with FPWE. Results of melanin assay using B16F10 cells treated with different concentrations (50, 125, and $250{\mu}g/mL$) of FPWE showed a dose-dependent decrease in melanin content. To determine whether or not FPWE indirectly affects tyrosinase activity, we assessed mushroom tyrosinase activity upon treatment with various concentrations (125, 250, 500, and $1,000{\mu}g/mL$) of FPWE. In addition, we investigated changes in the protein level of tyrosinase by using Western blotting. Tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor expression levels in B16F10 melanoma cells were reduced in a dose-dependent manner by FPWE. These results suggest that FPWE reduced melanin formation by inhibition of tyrosinase activity. Therefore, we suggest that FPWE could be used an effective whitening agent for skin.
The present study observed the effects of a green tea (Camellia sinensis) flower extract (GTFE) on melanin synthesis in B16-F10 melanoma cells. GTFE exhibited antioxidant activity on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl and inhibited mushroom tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Furthermore, GTFE significantly diminished ${\alpha}-melanocyte$ stimulating hormone (${\alpha}-MSH$) stimulated cellular melanin content and tyrosinase activity throughout the concentration range evaluated. Based on RNA sequencing analysis, differential gene expression patterns observed in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells were normalized by the addition of GTFE. In particular, the expression levels of melanoregulin and tyrosinase genes which are key regulating genes in melanin synthesis were up-regulated by 3.5 and 3 fold respectively by ${\alpha}-MSH$, and were normalized to control levels by the addition of GTFE. The results suggest that GTFE inhibits melanin synthesis in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells by normalizing expression of genes that are essential for melanin synthesis. Overall, the results suggest that GTFE could be applied in the development of a whitening agent for the treatment of dermal hyperpigmentation.
Sanjeewa, K. K. Asanka;Park, Young-jin;Fernando, I. P. Shanura;Ann, Yong-Seok;Ko, Chang-Ik;Wang, Lei;Jeon, You-Jin;Lee, WonWoo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.21
no.9
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pp.21.1-21.8
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2018
In the present study, we first evaluated the melanin inhibitory effect of four crude 70% ethanol extracts separated from soft corals abundantly growing along the seawaters of Jeju Island, South Korea, including Dendronephthya castanea (DC), Dendronephthya gigantea (DG), Dendronephthya puetteri (DP), and Dendronephthya spinulosa (DS). Among the four ethanol extracts, the ethanol extract of DP (DPE) did not possess any cytotoxic effect on B16F10 cells. However, all other three extracts showed a cytotoxic effect. Also, DPE reduced the melanin content and the cellular tyrosinase activity without cytotoxicity, compared to the ${\alpha}-MSH$-stimulated B16F10 cells. Specifically, DPE downregulated the expression levels of tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor by activating the ERK signaling cascade in ${\alpha}-MSH$-stimulated B16F10 cells. Interestingly, the melanin inhibitory effect of DPE was abolished by the co-treatment of PD98059, an ERK inhibitor. According to these results, we suggest that DPE has whitening capacity with the melanin inhibitory effects by activating ERK signaling and could be used as a potential natural melanin inhibitor for cosmeceutical products.
To examine the potential of Terminalia chebula as a whitening agent, we measured antioxidant activity using DPPH$\cdot$, ABTS${\cdot}^+$ assays and ferric-reducing antioxidant power (FRAP) assays, and depigmenting activity using B16F10 melanoma cells. The intracellular reactive oxygen species (ROS) level was monitored by $H_2DCFDA$ fluorescence labeling, and melanin contents in B16F10 melanoma cells by 960 $J/m^2$ dose of UVA-induced oxidative stress. The radical-scavenging activities of T. chebula extract (TCE) were measured in terms of $EC_{50}$ values using DPPH$\cdot$, ABTS${\cdot}^+$ assays and FRAP value were 280.0 ${\mu}g/mL$, 42.2 ${\mu}g/mL$ and 113.1 ${\mu}mol$$FeSO_4{\cdot}7H_2O/g$, respectively. We found that ROS and melanin concentrations were reduced by TCE treatments of 25 ${\mu}g/mL$ under UVA-induced oxidative stress. Tyrosinase activity and melanin contents in $\alpha$-melanocyte stimulating hormone (MSH)-induced melanoma cells both decreased dose-dependently in the treatment groups. TCE similarly reduced melanogenesis in B16F10 melanoma cells stimulated by $\alpha$-MSH as compared to arbutin as a positive control. T. chebula may prove to be a useful therapeutic agent for hyperpigmentation and an effective component in skin whitening and.or lightening cosmetics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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