• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권7호
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• pp.1107-1113
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• 2010

Because conventional methods for detecting emetic-toxin-producing B. cereus are laborious and costly, various PCR assays, which are easy and cheap, have recently been reported. Therefore, this study estimated and compared the ability of various PCR assays to detect emetic-toxin-producing B. cereus strains isolated in Korea. The PCR assays were performed on 160 B. cereus strains, including 40 emetic-toxin-producing strains. Although the species-specific PCR assays were all shown to be highly specific, the sensitivities varied greatly. The accuracies of the primers were 97.5% (CER), 95.6% (EM1), 96.3% (RE234), 89.4% (CES), and 83.1% (Ces3R/CESR2). Moreover, the CER primer had a higher sensitivity (100%) than all the other primers tested, and a specificity of 96.7%. Thus, the CER primer was shown to be the most effective for screening the emetic-toxin-producing B. cereus strains tested in this study. However, the ability of these PCR assays to identify emetic-toxin-producing B. cereus should also be confirmed using other methods.

• 한국식품과학회지
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• 제48권6호
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• pp.569-573
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• 2016

청국장의 불쾌취를 줄이고 B. cereus 증식을 억제하는데 다양한 첨가제의 효과를 검토하였다. 관능검사는 불쾌취와 맛에 대하여 각각 5점 척도법으로 실시하였다. 무첨가 청국장의 불쾌취 강도가 가장 높다고 평가되었으며, 소금 첨가구, 목초액 소금 첨가구, 고추씨기름 첨가구, 죽염 첨가구 순으로 높게 나타났다. 맛의 선호도는 고추씨기름 첨가 청국장이 다른 첨가구들보다 높았다. 각 첨가제들의 B. cereus 증식 억제 효과를 확인한 결과, 죽염이 다른 3개 첨가제에 비하여 그 효과가 가장 뛰어났다. 관능검사 결과 및 B. cereus 증식 억제 효과가 좋게 나타난 죽염 첨가 청국장과 무첨가 청국장의 냄새 성분을 추출, 농축하여 GC/MS로 분석하였다. 죽염 첨가 청국장에서 오렌지 유사 향인 1-ethoxy-1-methoxy-ethane이 무첨가구에 비해 크게 증가하였다. 결과적으로 죽염을 청국장에 첨가하는 것은 차폐에 의한 청국장의 불쾌취 감소뿐만 아니라 B. cereus 증식 억제에 효과적임을 확인하였다.

• 한국어병학회지
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• 제10권2호
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• pp.125-135
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• 1997

어류조직내에 잔류하는 항균물질을 미생물학적 방법인 disk assay를 이용하여 항균물질의 계열별로 확인이 가능한지를 검토하였다. 본 검사법에 사용한 균주는 Bacillus subtilis BGA, Micrococcus luteus ATCC 9341, Bacillus cereus var, mycoides ATCC 11778 이었다. 본 검사법에는 보다 간편한 clean-up 전처리 조작을 실시하였다. 즉, 피검시료(10g)는 Mcilvaine 완충액으로 마쇄하여 수용액충을 추출하고, 이 수용액층을 핵산에 의해 탈지시킨 후, 클로르포름 및 Sep-Pak $C_{18}$ 카트리지를 이용하여 분획액 2종류(fraction A 및 B)를 추출하였다. 그리고 이들 분획액은 각각 disk assay에 사용하였다. 분획액 A인 클로르포름 용액층은 마크로라이드(ML)계, 설파(SA)계, 클로람페니콜(CP)계 및 퀴놀른(QN)계의 확인시험에 제공되었고, 분획액 B인 Sep-Pak $C_{18}$에 흡착된 물질은 페니실린(PC)계, 테트라사이클린(TC)계 및 니트로푸란(NF)계의 확인시험에 제공되었다. 본 검사법에 의한 항균물질의 검출 최저농도는 oxytetracycline, tetracycline, doxycycline, spiramycin 및 ciprofloxacin이 $0.1{\mu}g$/g, erythromycin과 ampicillin이 $0.025{\mu}$/g, sodium nifurstyrenate와 florfenicol이 $1.0{\mu}g$/g, sulfamonomethoxine과 sulfadimethoxine이 $0.25{\mu}g$/g, oxolinic acid와 flumequine이 $2.5{\mu}g$/g, piromidic acid는 $15{\mu}g$/g이었다. TC계 및 NF계에 대해서는 B. cereus>B. subtilis>M. luteus, ML계 및 PC계에 대해서는 M. lureus>B. subtilis>B. cereus, CP계 및 QN계에 대해서는 B.cereus=B. subtilis>M. luteus, SA계에 대하여는 B. subtilis>B. cereus=M. luteus로 항균물질의 계열에 따라 서로 다른 감수성 유형을 나타내었다. 따라서 본 미생물학적 검사법은 어류 조직내에 잔류하는 항균물질의 계열을 스크리닝하는 일상 검사법으로서 유용하게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제39권4호
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• pp.374-381
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• 2011

미생물과의 상호작용을 통하여 토양의 특성을 변화시킬 수 있는 지렁이 Eisenia fetida의 장내미생물 군집을 조사하기 위하여, 배양방법과 비배양방법인 DGGE와 pyrosequencing을 이용하여 8주와 16주 사육 지렁이의 장내미생물 군집을 분석하였다. 배양방법에서는 L. fusiformis(51%), B. cereus(30%), E. aerogenes(21%), 그리고 L. sphaericus (15%) 등이 우점미생물로 확인되었다. DGGE 분석에서는 B. cereus(15.1%), Enterobacter sp.(13.6%), uncultured bacterium (13.1%), 그리고 B. stearothermophilus(7.8%)가 우점미생물로 확인되었다. Pyrosequencing 분석에서는 Microbacterium soli(26%), B. cereus(10%), M. esteraromaticum(6%), 그리고 Frigoribacterium sp.(6%)가 우점미생물로 확인되었다. 그외에도 Aeromonas sp., Pseudomonas sp., Borrelia sp., Cellulosimicrobium sp., Klebsiella sp., and Leifsonia sp. 등의 미생물도 확인이 되었으며, 비배양 방법을 이용한 장내 미생물 군집 조사는 배양이 불가능한 미생물을 확인할 수 있을 뿐만 아니라 더 다양한 미생물 군집도 확인할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권6호
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• pp.1146-1155
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• 2008

A total of 72 Bacillus cereus strains and 5 Bacillus thuringiensis strains were analyzed for their EcoRI ribogroup by ribotyping and for the presence or absence of seven virulence-associated genes. From these 77 strains, 42 distinctive ribogroup were identified using EcoRI, but the two species could not be discriminated by their EcoRI ribogroup. The 77 strains were also examined by PCR for the presence of seven virulence-associated genes, cerAB, pi-plc, entFM, bceT, hblA, hblC, and hblD. All five Bacillus thuringiensis strains were positive for these genes. Although differences in the patterns of virulence genes were observed among the different B. cereus strains, within any given ribogroup the patterns of the seven virulence genes was the same. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) analysis in combination with available chromosomal maps for a selected group of B. cereus strains revealed significant differences in their chromosome size and the placement of virulence genes. Evidence for significant rearrangements within the B. cereus chromosome suggests the mechanism through which the pattern of virulence-associated genes varies. The results suggest linkage between ribogroups and virulence gene patterns as well as no apparent containment of the latter within any particular species boundary.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
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• 제32권2호
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• pp.101-104
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• 2014

Food safety is a global health goal, and food-borne disease are a significant public health threat throughout the world. Dairy products are susceptible to contamination through a wide variety of physical, microbial, and chemical hazards. Risks of microbiological hazards are of immediate and serious concern to human health. Milk was inoculated with Bacillus cereus and stored at 10, 15, 20, and $30^{\circ}C$ for 7 days. We monitored the effect of the temperature on growth rate and variance of toxin production. The growth rate of B. cereus was suppressed in low temperature. We confirmed that the growth rate and the toxin production were accelerated when the storage temperature was increased. B. cereus began to produce toxins when the number of bacteria was higher than $10^7CFU/mL$. Therefore, managing the storage temperature of milk is important to inhibit the growth and the toxin production of B. cereus.

• Food Science and Biotechnology
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• 제17권4호
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• pp.824-828
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• 2008

Effect of various temperatures on enterotoxin production of Bacillus cereus 4 different cereal grains (brown rice, glutinous rice, barley, and Job's tear) was studied. When B. cereus was inoculated to 4 grains, no toxin was detected within 24 hr at 20 and $25^{\circ}C$ although the population reached approximately 8-10 log CFU/g. However, enterotoxin was detected in all samples above $30^{\circ}C$. When the temperature was increased to $35^{\circ}C$, toxin production was observed in the range of 6.11 and 6.26 log CFU/g on brown rice and glutinous rice, respectively. At $40^{\circ}C$, toxin production was detected after 6 hr with the lowest bacterial population of 5.32 and 5.04 log CFU/g, whereas enterotoxin was produced in the range of 6.86 and 7.77 log CFU/g on barley and Job's tear at $40^{\circ}C$. Different types of food affected enterotoxin production of B. cereus. These results suggest that enterotoxin production was more significantly regulated in incubation temperatures than the number of B. cereus.

• 한국식품과학회지
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• 제46권1호
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• pp.115-120
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• 2014

본 연구는 목적은 단일 박테리오파지를 이용하여 볏짚으로부터 B. cereus가 제거된 스타터 컬쳐를 개발하는 것이다. 다양한 배지 가운데 5% 콩 갈은 물(GB)이 볏짚 미생물의 증식과 박테리오파지 BCP8-2의 활성에 적합한 배지로 선정되었다. GB를 이용하여 다양한 볏짚 샘플과 BCP8-2를 함께 처리한 결과 모든 샘플들에서 총균수는 $10^9$ CFU/mL 수준으로 동일하였고, B. cereus의 경우 BCP8-2를 처리하지 않은 샘플에서 $10^7$ CFU/mL까지 증식하였고, 박테리오파지 처리군에서는 검출되지 않음을 확인하였다. 샘플에 존재하는 미생물 군집을 16S rDNA 염기서열을 바탕으로 한 DGGE와 pyrosequencing을 통해 분석한 결과 BCP8-2 처리군과 미처리군 사이에 매우 유사한 미생물 군집을 확인하였고, 더 나아가 계대 배양에 따른 미생물 군집이 안정적으로 유지됨을 확인했다. 이러한 결과들은 볏짚 등에서 특정 박테리오파지를 이용하여 특정 유해균을 제거한 컬쳐의 개발이 가능함을 보여주는 것이고, 안전한 전통장류의 생산에 기여할 것이다.

• 한국식품과학회지
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• 제41권3호
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• pp.334-338
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• 2009

어패류에 의한 식중독 발생 감소를 위하여 시장에서 유통중인 생선초밥을 대형할인매장과 일식음식점에서 수집하여 미생물 위해인자의 오염을 분석하였다. 79개의 초밥의 생선부위에서 4-6 log CFU/g의 일반세균이 오염되어 있었고 밥부위에서는 3-5 log CFU/g 로 나왔으며 광어와 새우초밥이 높은 오염을 보여주었다. 대장균군은 생선부위에서 3-4 log CFU/g이 오염되어 있었고 밥부위에는 생선부위보다 1 log CFU/g정도 낮게 나타났고 대장균은 검출되지 않았다. 식중독 세균은 생선부위에서 Staphylococcus aureus가 17% 시료에서 검출되었고, Bacillus cereus group은 10%로 검출되었고 밥부위에서는 S. aureus가 11%시료에서 검출되었고 B. cereus group가 8% 시료에서 검출되었다. 그리고 Salmonella와 Listeria monocytogenes도 검출되었으나 Vibrio parahaemolyticus, Clostridium perfrigens, Yersinia enterpcolotica 등은 검출되지 않았다. 생선초밥 생산유통 업체 분석에 의하면 대형할인매장의 시료에서는 B. cereus group이 13%시료에서 검출되었고, 일식음식점의 경우는 S. aureus가 30% 시료에서 검출되었다. 일반적으로 어패류 식품의 경우 V. parahaemolyticus의 오염을 우려하지만, 유통 초밥시료를 채취하여 실험한 결과 B. cereus group과 S. aureus의 오염도가 더욱 높은 것으로 나타났다. 그러므로 V. parahaemolyticus와 아울러 B. cereus group과 S. aureus의 위해 관리가 강화되어야 할 것으로 사료된다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권4호
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• pp.511-515
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• 2006

Antibiotic resistance of foodborne pathogens adapted to garlic (Allium sativum Linn.) was determined in order to understand the relationship between antibiotic resistance and garlic. The Gram (-) strains of Escherichia coli and Salmonella typhimurium and the Gram (+) strains of Bacillus cereus and Staphylococcus aureus were subcultured consecutively in a garlic broth, and the surviving colonies on the agar were selected as the adapted strains. Minimal inhibitory concentrations (MIC) for 15 antibiotics on the adapted strains were determined on Muller-Hinton Infusion agar. Adaptation to 1.3%(v/v) garlic juice increased MIC for vancomycin, aminoglycoside, and erythromycin on B. cereus, and for ampicillin and erythromycin on E. coli O157:H7. MIC of aminoglycosides, chloramphenicol, and vancomycin on the adapted S. aureus increased. The adapted S. typhimurium was more resistant to penicillin and vancomycin than the non-treated strain. The adapted S. typhimurium and S. aureus lost their antibiotic resistance in non-garlic stress conditions. However, the adapted B. cereus was still resistant to erythromycin and vancomycin, and the adapted E. coli was also resistant to erythromycin. Antibacterial garlic might increase the antibiotic resistance of E. coli, B. cereus, S. aureus, and S. typhimurium and this resistance can continue even without the stress of garlic. Therefore, garlic as a food seasoning could influence the resistance of such pathogens to these antibiotics temporarily or permanently.