The morphology of filamentous fungi closely correlates with the productivity in submerged culture. Using itaconic acid (IA) production by Aspergillus terreus as a research model, the quantitative relationship between the growth form of A. terreus and IA production was investigated. IA fermentation was scaled up from shake flasks to a 7 L stirred tank bioreactor based on the quantitative relationship. Our results demonstrated the following: (1) Three morphologies of A. terreus were formed by changing the inoculum level and shape of the flask. (2) Investigation of the effects of the three morphologies on broth rheology and IA production revealed the higher yield of IA on dry cell weight (DCW, IA/DCW) and yield of glucose on DCW (consumed glucose/DCW) were achieved during clump growth of A. terreus. (3) By varying the $KH_2PO_4$ concentration and culture temperature, the relationships between clump diameter and IA production were established, demonstrating that the yield of IA on DCW ($R^2$ = 0.9809) and yield of glucose on DCW ($R^2$ = 0.9421) were closely correlated with clump diameter. The optimum clump diameter range for higher IA production was 0.40-0.50 mm. (4) When the clump diameter was controlled at 0.45 mm by manipulating the mechanical stress in a 7 L fermentor, the yield of IA on DCW and yield of glucose on DCW were increased by 25.1% and 16.3%, respectively. The results presented in this study provide a potential approach for further enhancement of metabolite production by filamentous fungi.
An efficient screening method was developed for rapid selection of a few overproducers of itaconic acid (IA) among the great many mutants derived from mother strains of Aspergillus terreus. For this purpose, an attempt was made to reveal the relationships of the growth rate and sporulation of each mutant on PDA solid medium with its IA productivity in the final liquid production-culture. As a result, it was possible to classify the mutated strains into 5 groups (from [A] to [E] group) according to theirmorphologies (i.e., growth rate and sporulation extent) on the PDA slants. Notably, most of the high-yielding mutants of IA were observed to belong to [A]group which had the properties of the highest growth rate and sporulation among the 5 groups, whereas the mutant groups of [C], [D] and [E] with the contrasting morphological features showed significant reductions in their IA productivities. From these results, it was concluded that the probability of selecting IA overproducing mutants could be remarkably enhanced when the mutated colonies showing faster growth rates are firstly selected on the PDA plate, and then further screening process is performed on the basis of the sporulation extents of the mutants selected. Consequently, through the application of the strategy developed in this study, costs and time involvedin the labor-intensive task of strain improvement could be reduced to a great extent, because the time-consuming liquid culture processes did not need to performed for the unfavorable mutants belonging to the groups other than group [A].
본 연구에서는 저장 조건이 고춧가루 중 곰팡이 생존에 미치는 영향을 분석하였다. 고춧가루에 A. terreus, A. flavus, R. microsporus, A. fumigatus, A. niger, A. ochraceus 등 총 6종의 곰팡이를 접종하여 균액 농도가 4-6 log CFU/g이 되도록 하였다. 곰팡이를 접종한 고춧가루는 Clean bench에 건조하여 지퍼백에 포장한 후 -20℃, 5℃, 15℃, 25℃에 저장하였다. Clean bench에 건조한 고춧가루의 수분활성도는 0.502±0.001이었다. A. terreus 등 균주 6종 모두 25℃에서 가장 먼저 곰팡이가 사멸하였으며, -20℃에서 가장 마지막에 사멸하거나 168일 동안 사멸하지 않았다. 따라서 본 연구 결과, 고춧가루의 수분활성도를 0.6이하로 건조한 후 지퍼백에 소분하여 상온에 보관하는 것이 곰팡이로부터 안전할 것으로 판단되었다.
Cervical cancer is the second most common malignancy in women worldwide and thus one of the leading causes of mortality in women. Lovastatin, a non polar, anticholesterol drug has previously been reported to exert antitumour activity in vitro. In the present study, lovastatin from Aspergillus terreus (KM017963) was purified by adsoprtion chromatography and evaluated for its anticancer and anti-oxidant properties with a human cervical cancer cell line (HeLa). Growth inhibitory and proapoptotic effects of purified lovastatin on HeLa cells were investigated by determining its influence on cell numbers, mitochondrial membrane potential (MMP), DNA fragmentation and antioxidant properties in terms of hydroxy radical scavenging effects as well as levels of total reduced glutathione. Cell cycle analysis by flow cytometry (propidium iodide staining) confirmed induction of apoptotic cell death and revealed cell cycle arrest in the G0/G1 phase. Results of the study give leads for the anticancer effects of lovastatin and its potential usefulness in the chemotherapy of cervical cancer.
The effects of nuruk and wheat bran on cholesterol level in serum and activities of free radical metabolizing enzymes were investigated in rats. The rats were fed a diet containing nuruk or wheat bran for one month. Body weight and food intake were measured. Animals were sacrificed after one month. The increased food efficiency ratio throughout whole growth period was observed in the rats fed with either nuruk containing Aspergillus terreus or wheat bran compared with control group on normal diet. In the rats fed with nuruk, hepatic GSH content, glutathione S transferase activity, hepatic cytochrome P 450 content, and aniline hydroxylase activities were generally increased. In the rats fed with nuruk containing other fungi except Aspergillus terreus, xanthine oxidase activity was decreased. The decreased cholesterol level in serum was observed in rats fed with nuruk prepared from Aspergillus terreus and wheat bran. LDL cholesterol level was decreased in rats fed with nuruk prepared with other fungi such as Penicillium sp. and Rhizopus sp. But HDL cholesterol level was increased in all groups fed with nuruk from any fungi and wheat bran. These results suggested that nuruk or wheat bran supplemented diet might exert their effect by decreasing cholesterol level in serum and amount of oxygen free radical level.
온실 토양으로부터 주요 작물 병원균의 생육을 억제하는 길항곰팡이를 분리, 동정하였고, 그 균이 분비하는 향균물질을 분리하여 활성을 petriplate assay로 검정했다. 길항균의 foot cell, 분생포자 및 MY20 배지상의 균사 등 형태학적 특징에 근거하여 이 균을 Aspergillus terreus로 동정하였다. A. terreus의 배양여액을 chloroform으로 추출하고, 그 추출물을 column chromatography와 thin layer chromatography로 향균물질을 순수분리하였으며, 화학구조는 butyrolactone I이었다. 이 물질의 주요 작물병원균에 대한 $ED_{50}$은 Botrytis cinerea, Phytophthora capsici. Pythium ultimum, Rhizoctonia solani, 그리고 Fusarium oxysporum에 각각 9.7, 42.6, 23.3, 13.7, 102.7 ppm으로 나타났다.
고지혈증 치료제인 lovastatin을 Aspergillus terreus로부터 생산하기 위해 발효조 배양설험에서 교반속도와 pH에 대한 영향올 조사하였다. 최적 교반속도는 400 rpm이었고 pH는 5.8로 유지하였을 때 lovastatin 생산이 최대였으며, 교반속도 보다 pH가 lovastatin 생산에 더 많은 영향을 미치는 것으로 나타났다 L-tryptop뼈n과 L-histi빼le의 첨가시기에 따른 lovastatin 생산량을 실험한 결과, 둘다 발효초기부터 첨가하여 배양하 는 것이 효과적이었다 L-tryptophan을 발효초기에 첨가한 최 적배지와 최적 환경조건인 교반속도 400 rpm, pH 5.8에서 회 분식 배양을 수행한 결과 기본배지를 이용하여 실험한 배양 결과보다 약 10배 정도 많은 836 mg/L이었고, 생산성은 3.5 mg/L.hr였다
본 연구는 공시균인 Aspergillus terreus와 유산균을 이용할 시에 성장률과 육질에 미치는 영향을 조사하고자 거세돈 60 두를 60일간 그리고 육계 120수를 6주간 사양하였다. 대조구는 일반 시판사료만 급여하였고, T1구는 Aspergillus terreus 배양체, T2구는 시판중인 EM-pro 배양체(Lactobacillus acidophilus, Bacillus subtilis, Saccharomyces cervisiae 3종 혼합배양물)를 각각 $0.2\%$씩 첨가 급여한 결과는 다음과 같다. 돼지의 일당 증체량과 총 증체량은 대조구가 높은 경향이었고, 사료요구율은 T2구가 다른 처리구보다 가장 높았다 (P<0.05). 그러나 육계의 일당 증체량과 총 증체량은 T1구와 T2구가 높은 경향이었고, 사료요구율은 T2구가 다른 처리구보다 가장 높아 통계적인 유의차가 있었다(p<0.05). 돼지고기의 조지방 함량은 대조구$(2.72\%)$가 T1구$(1.44\%)$와 T2구(1.59)보다 유의적으로 높았고(p<0.05), 닭고기는 T1구$(0.36\%)$가 가장 낮아 통계적인 차이가 있었다(p<0.05). 돼지고기의 pH, 가열감량, 보수성 및 전단력은 처리구간에 통계적인 차이가 없었으나(p>0.05), 닭고기에서 가열감량과 보수성은 대조구가 높았고, 전단력은 T1구와 T2구가 높았다(p>0.05). 돼지고기의 다즙성, 연도, 향미는 대조구(각 4.95, 4.85, 4.60)가 가장 높았고(p<0.05), Aspergillus terreus로 처리한 T1구(각 3.90, 3.80, 3.85)는 상대적으로 가장 낮았다(p<0.05). 돼지고기의 육색은 모든 처리구간에 차이가 없었고, 닭고기의 a와 b값은 대조구(7.99)가 다른 처리구보다 높았다(p<0.05). 따라서 Aspergillus terreus 첨가 급여는 축종에 따라 고기의 지방함량 및 육질에도 다소 영향을 미치는 것으로 판단된다.
본 연구에서는 Asp. terreus를 접종하여 제조한 황국곡자를 이용하여 지질대사와 관련 조절유전자 및 심혈관질환에 미치는 효능을 확인하고, 고지혈증 개선에 미치는 황국곡자의 효능을 검증하고자 하였다. SD rat을 사용하여 8주 동안 고콜레스테롤 식이와 황국곡자 0.5, 2 g을 경구투여 하였다. 그 결과 간조직에서 황국곡자 투여군은 총 지질의 함량이 감소하였으나 황국곡자가 콜레스테롤 배출에는 크게 영향을 주지 않음을 확인하였다. 간조직 내 LDL 및 HDL 관련 유전자 발현 확인 결과, 콜레스테롤 합성의 가장 중요한 기작인 HMG-CoA reductase, LDL receptor와 SREBP2 발현에서는 고콜레스테롤군보다 유의적으로 모두 증가하여 체내의 콜레스테롤을 낮추는 것으로 판단된다. 또한 간조직의 형태학적 특징을 관찰해본 결과 황국곡자 투여군이 고콜레스테롤군에 비해 간 손상의 정도가 현저히 감소되어 있으며 간세포 내 작은 공포 모양의 지방구가 현저히 줄어들어 있는 것을 확인하였으며 황국곡자를 투여한 군 모두 지방세포 침윤과 같은 지방간 병변의 치료효과를 확인하였다. 결과적으로 황국곡자는 체내의 지질대사에 영향을 끼침에 따라 고지혈증의 개선을 위한 소재로 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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