• Journal of Animal Science and Technology
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• 제48권3호
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• pp.353-360
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• 2006

본 연구는 쥐 난자에서 인위적 활성화 처리가 난자의 활성화, cyclin B1 단백질의 발현 및 난자의 활성화와 cyclin B1 단백질 발현간의 상관관계에 미치는 영향에 관하여 조사하고자 실시하였다. 난자의 활성화 처리는 7% ethanol(EtOH) or 10μg/ml Ca-ionophore with or without 10μg/ml cycloheximide (CH) 방법으로 단일 또는 복합처리 하였다. 난자의 활성화 비율은 단일처리(p<0.05)와 복합처리 (p<0.01)한 난자가 무처리에 비하여 유의하게 높았다. Cyclin B1 단백질의 발현이 EtOH+CH 처리한 난자를 제외한 다른 처리군에서는 무처리에 비하여 유의하게 감소하였다(p<0.05). 한편 EtOH+CH(r=0.61, p<0.05)와 Ca+CH(r=0.86, p<0.01) 처리그룹에서 cyclin B1 단백질의 발현과 난자의 활성화 간에 높은 역상관관계가 있음을 확인하였다. 하지만 단일처리 그룹에서는 두 요소간에 상관관계가 없음을 알 수 있었다. 따라서 단일(EtOH and Ca-ionophore) 또는 복합(EtOH+CH and Ca+CH) 활성화 처리가 난자의 활성화를 증가시키며, 이것은 난자의 활성화 처리에 따른 cyclin B1 단백질의 감소와 밀접한 연관이 있다고 사료된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제41권3호
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• pp.137-139
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• 2014

The effect of artificial oocyte activation (AOA) with a calcium ionophore on intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI) was examined in patients with histories of repeated failed implantation attempts. Four singleton pregnancies and one twin pregnancy were obtained after embryos transfer (5/14, 35.7%). Therefore, AOA combined with IMSI can be considered an option for cycles with a fertilization defect and recurrent implantation failures.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제42권2호
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• pp.45-50
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• 2015

Objective: Artificial oocyte activation (AOA) is an effective method to avoid total fertilization failure in human in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) cycles. AOA performed using a calcium ionophore can induce calcium oscillation in oocytes and initiate the fertilization process. We evaluated the usefulness of AOA with a calcium ionophore in cases of total fertilization failure in previous cycles and in cases of severe male factor infertility patients with non-motile spermatozoa after pentoxifylline (PF) treatment. Methods: The present study describes 29 intracytoplasmic sperm injection (ICSI)-AOA cycles involving male factor infertility at Cheil General Hospital from January 2006 to June 2013. Patients were divided into two groups (control, n=480; AOA, n=29) depending on whether or not AOA using a calcium ionophore (A23187) was performed after testicular sperm extraction-ICSI (TESE-ICSI). The AOA group was further split into subgroups according to sperm motility after PF treatment: i.e., motile sperm-injected (n=12) and non-motile sperm-injected (n=17) groups (total n=29 cycles). Results: The good embryo rate (52.3% vs. 66.9%), pregnancy rate (20.7% vs. 52.1%), and delivery rate (10.3% vs. 40.8%) were lower in the PF/AOA group than in the control group. When evaluating the effects of restoration of sperm motility after PF treatment on clinical outcomes there was no difference in fertilization rate (66.6% vs. 64.7% in non-motile and motile sperm, respectively), pregnancy rate (17.6% vs. 33.3%), or delivery rate (5.9% vs. 16.7%) between the two groups. Conclusion: We suggest that oocyte activation is a useful method to ensure fertilization in TESE-ICSI cycles regardless of restoration of sperm motility after PF treatment. AOA may be useful in selected patients who have a low fertilization rate or total fertilization failure.

• Molecules and Cells
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• 제40권8호
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• pp.558-566
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• 2017

Regular monitoring on experimental animal management found the fluctuation of ART outcome, which showed a necessity to explore whether superovulation treatment is responsible for such unexpected outcome. This study was subsequently conducted to examine whether superovulation treatment can preserve ultrastructural integrity and developmental competence of oocytes following oocyte activation and embryo culture. A randomized study using mouse model was designed and in vitro development (experiment 1), ultrastructural morphology (experiment 2) and functional integrity of the oocytes (experiment 3) retrieved after PMSG/hCG injection (superovulation group) or not (natural ovulation; control group) were evaluated. In experiment 1, more oocytes were retrieved following superovulation than following natural ovulation, but natural ovulation yielded higher (p < 0.0563) maturation rate than superovulation. The capacity of mature oocytes to form pronucleus and to develop into blastocysts in vitro was similar. In experiment 2, a notable (p < 0.0186) increase in mitochondrial deformity, characterized by the formation of vacuolated mitochondria, was detected in the superovulation group. Multivesicular body formation was also increased, whereas early endosome formation was significantly decreased. No obvious changes in other microorganelles, however, were detected, which included the formation and distribution of mitochondria, cortical granules, microvilli, and smooth and rough endoplasmic reticulum. In experiment 3, significant decreases in mitochondrial activity, ATP production and dextran uptake were detected in the superovulation group. In conclusion, superovulation treatment may change both maturational status and functional and ultrastuctural integrity of oocytes. Superovulation effect on preimplantation development can be discussed.

• 한국가축번식학회지
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• 제22권4호
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• pp.395-403
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• 1998

본 연구에서는 돼지난자내 원형정자 주입후 수정율과 체외 배 발달을 조사하였다. 원형정자 주입 2시간 전에 인위적 전기자극을 주고 원형정자를 주입했을 때 난자들의 수정율이 주입 직후에 전기자극을 준 것들과 전기 자극을 주지 않은 것들보다 수정율이 높았다. 원형정자와 원형 정자핵을 각각 주입 한 후 전핵 형성율과 전핵 이동율을 조사하였으나 유의차를 발견할 수 없었다. 전핵의 형성과 이동중 미세소관의 움직임을 간접형광면역법 및 공춧점 현미경을 사용하여 조사해본 결과, 난활성 직후 난자의 표층에서 미세소관이 발생해서 이것에 의해 웅성 및 자성전핵이 난자 중심부로 이전됨을 볼 수 있었다. 원형정자와 원형정자핵 주입후 배양 6일째에 각각 25% 와 27%의 배반포로 형성되었고, 8 일째 형성된 배반포를 염색하여 관찰한 철과 세포수가 각각 평균 87에서 99개가 형성되었음을 알 수 있었다. 이러한 결과는 체외 성숙된 돼지 난자 내에 원형정자 혹은 원형정자 핵을 미세 주입하는 방법에 의해 정상척인 배발달을 하는 돼지 수정란 생산이 가능한 것을 보여주는 것이다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제26권2호
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• pp.193-201
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• 1999

본 연구에서는 소 난자 세포질내 원형정자 및 원형정자 핵을 미세주입 후 수정과정과 체외 배 발달을 조사하였다. 원형정자 주입 3시간 전에 인위적 자극을 주고 원형정자를 주입했을 때 난자들의 수정률이 주입 직후에 자극을 준 것들과 자극을 주지 않은 것들 보다 높았다. 원형정자 주입과 원형 정자핵을 주입한 후 전핵 형성률과 전핵 이동률을 조사하였으나 유의차를 발견할 수 없었다. 전핵의 형성과 이동중에 미세소관의 움직임을 간접형광면역법 및 공촛점 현미경을 사용하여 조사해 본 결과, 난활성 직후 난자의 표층에서 미세소관이 발생해서 이것에 의해 웅성 및 자성전핵이 난자 중심부로 이전됨을 볼 수 있었다. 수정 후 원형정자의 세포질내 Mitochondria의 분포상태를 알아보기 위해 MitoTracker에 노출시킨 원형정자를 주입한 후 형광현미경에서 관찰해 보았다. 그 결과 원형정자의 Mitochondria가 주입 후 4-cell 이 전까지 는 관찰되었으나 그 이 후에는 발견 할 수 없었다. 원형정자를 미세주입한 후 소 난자를 체외에서 배양했을 때 2.5%의 난자가 배반포로 발달하였다. 이상의 결과는 체외 배양한 소 난자 내에 원형정자 혹은 원형정자 핵을 미세 주입하여 정상적인 수정과 배발달이 가능한 것을 보여 주는 것이다.