Objectives: This study aims to provide basic data regarding the bacterial total plate count in the atmospheric environment for related studies. Methods: Total plate count and the identification of culturable bacteria in the atmospheric environment in Incheon took place in 2015 using periodic survey. Correlationship analysis was performed between the number of culturable bacteria and environmental elements. In addition, an estimation of novel bacterial species was undertaken using the similarities and phylogenetic tree based on the 16S rRNA gene. Results: The total plate count of culturable bacteria was on average $176CFU/m^3$, and did not exceed $610CFU/m^3$ in the atmospheric environment. Periodic monthly measuring of total plate count was highest in June at $293CFU/m^3$, while the lowest was in July at $125CFU/m^3$. Furthermore, as a result of the identification of culturable bacteria, the genera Arthrobacter and Kocuria were dominant, while novel bacterial taxa that belong to the genera Chryseobacterium and Herbiconiux were separated. Conclusion: The total number of culturable bacteria from the atmospheric environment in Korea is on average $176CFU/m^3$. In addition, the genera Arthrobacter and Kocuria dominate. The presence of novel bacterial taxa are expected in the atmospheric environment, such as belonging to the genera Chryseobacterium and Herbiconiux.
각종 오염지역의 오염토양의 시료를 채취해 DGGE를 이용한 미생물군집구조를 서로 비교함으로써 어떤 요인이 영향을 많이 미치는지를 알아보았다. 미생물군집의 유사도 비교에서 TPH 오염 말고는 대부분의 오염정도가 심하지 않아서 오염 특성보다는 토양시료가 채취된 지역에 따라 더 유사함을 보여주었고 TPH 오염도가 가장 높았던 시료에서만 지역적 특성을 넘어 유사도 차이를 보여 주었다. 이와 같이 오염요인이 너무 크지 않은 경우에는 미생물군집구조가 지역특성 즉 여러 다른 환경요인에 의해 더 크게 영향을 받는 것을 이 연구를 통해 알 수가 있었다. 모든 오염토양의 우점종(배양성 세균) 조사에서 firmicutes와 high GC Gram+에 속하는 세균들이 주로 발견되었고 유류오염이 심한 토양에서 이미 보고된 Arthrobacter, Bacillus, Methylobacterium, Clavibacter, Streptomyces, Nocardia와 아직 보고되지 않은 Leifsonia가 발견되었다.
We isolated and identified culturable Arctic bacteria that had inhabited soils around the Korean Arctic Research Station Dasan located at Ny-Alsund, Svalbard, Norway $(79^{\circ}N,\;12^{\circ}E)$. The collected soils were diluted in distilled water; the diluted soil-water was spread on 3M petri-films at Dasan Station. The petri-films were transported to the laboratory at KORDI, and cultured at $4^{\circ}C$. Colonies grown on the petri-films were subsequently cultured on nutrient agar plates at $4^{\circ}C$ every 7 days. The pure colonies were inoculated into nutrient liquid media, genomic DNA was extracted, and phylogenetic analysis was performed on the basis of 165 rDNA sequences. A total of 227 strains of bacteria were isolated. Among them, 16S rDNA sequences of 185 strains were identical with those of known strains isolated in this study, and 42 strains were finally identified. Phylogenetic analysis using 16S rDNA indicated that the 30 strains belonged to Pseudomonas, 7 strains to Arthrobacter, two strains to Flavobacterium, and the remaining to Achromobacter, Pedobacter, and Psychrobacter. Among the 42 strains, 14 bacteria produced protease: they were 6 strains of Pseudomonax, 4 strains of Arthrobater, an Achromobacter strain, 2 strains of Flavobacterium, and a Pedohacter strain. We expect these Arctic bacteria can be used for screening to develop new industrial enzymes that are active at low temperatures.
본 연구에서는 기아상태에 있는 토양 미생물, Arthrobacter crystallopoietes cell의 2-hydroxypyridine대사능력의 변화 와 이 미생물의 대사능력에 대한 부식산의 영향에 대해 다루어졌다. 기질 2-HP에 대한 대수기 세포(exponential phase cell)는 적응기 세포(lag phase cell)와 비교할 때 기아상태에 있어서도 더 높은 2-HP대사능력을 보여 기아상태 3일 후 대수기 세포에서 2-HP반감기는 14시간으로 나타난 반면 적응기 세포의 경우 46.5시간으로 나타났다. 부식산은 기아상태에서 이 미생물 세포의 유도효소, 2-HP monooxygenase의 안정성을 높여주어 기아시간 2일 후 표준조건에서 기아상태에 있던 미생물의 효소활성이 처음의 1.5%로 남아 있는 반면 0.2% 부식산 용액에서 기아상태로 있던 미생물의 효소활성은 12%까지 남아 있었다. 기아시간 14일 후 까지도 부식산 용액 속에서 기아상태로 있던 이 미생물 세포의 2-HP대사능력은 표준 조건의 것에 비해 월등히 높아 2-HP반감기를 비교해 보면 표준 조건의 경우 43시간인 반면 부식산의 경우 1.25시간으로 나타났다.
143개의 여러가지 시료에서 니코틴 분해세균의 분포를 조사하고 니코틴 배지에서 생장능이 우수한 34균주를 선별하여 균주의 생물학적 특성과 니코틴 분해력을 조사함과 동시에 니코틴 분해력이 가장 우수한 균주를 선정하여 동정하였다. 니코틴 분해세균은 유기물이 풍부한 토양과 담배씨, 부리에 많이 분포되어 있었고 선별된 34균주는 Arthrobacter 4주, Pseudomonas (non-pigmented) 11주, Pseudomonas (Pigmented) 2주, Alkaligenes 6주, Chromobacter 5주, Listeria 2주, Achromobacter 4주 등으로 분류되었다. 니코틴 분해력에 있어서는, Pseudomonas와 Alkaligenes가 다른 속(genus)보다 높고, 서식지 별로 비교해 보면 담배씨와 뿌리에서 분리된 균주가 우수했으며 가장 우수한 균주는 97.l%의 분해율을 나타내는 균주번호 NCT27로서 Pseudomonas putida로 동정되었다.
미생물에 의해 분비되는 유기산에 의해 난용성 인산염이 가용화되어 토양 용액 중으로 확산되면 식물 혹은 다른 미생물이 이용할 수 있게 된다. 본 연구는 논 토양을 대상으로 볏짚 퇴비, 석회, 규산 등의 개량제가 토양 인산 가용화균의 생태에 미치는 영향을 조사하였다. 인산가용화 균의 비율이 증가할 수록 토양의 유효인산 함량이 높아지는 경향을 보였다. 논 토양 호기성 세균에 대한 인산가용화 세균의 비율은 석회, 규산 및 퇴비를 함께 시용한 처리구에서 크게 증가하였다. 논 토양에서 분리된 인산가용화 세균은 Aquaspirillum, Arthrobacter, Bacillus, Flavobacterium, Micrococcus, Micromonospora, Pseudomonas속 등이었으나 가장 많이 분리된 균은 Bacillus속이 그 다음으로는 Pseudomonas속이 우점하였다.
There is a possibility that carvone, a monoterpene from spearmint (Mentha spicata), could induce the bph degradative pathway and genes in Alcaligenes eutrophus H850, which is a known Gram-negative PCB degrader with a broad substrate specificity that was thoroughly investigated with Arthrobacter sp. BIB, a Gram-positive PCB degrader. The strains BIB and H850 were unable to utilize and grow on the plant terpene [(R)-(-)-carvone] (50ppm) to be recognized as a sole carbon source. Nevertheless, the carvone did induce 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase (encoded by bphC) in the strain B lB, as observed by a resting cell assay that monitors accumulation of a yellow meta ring fission product from 4,4'-dichlorobiphenyl (DCBp). The monoterpene, however, did not appear to induce the meta cleavage pathway in the strain H850. Instead, an assumption was made that the strain might be using an alternative pathway, probably the ortho-cleavage pathway. A reverse transcription (RT)-PCR system, utilizing primers designed from a conserved region of the bphC gene of Arthrobacter sp. M5, was employed to verify the occurrence of the alternative pathway. A successful amplification (182bp) of mRNA transcribed from the N-terminal region of the bphC gene was accomplished in H850 cells induced by carvone (50ppm) as well as in biphenyl-growth cells. It is, therefore, likely that H850 possesses a specific PCB degradation pathway and hence a different substrate specificity compared with B1B. This study will contribute to an elucidation of the dynamic aspects of PCB bioremediation in terms of roles played by PCB degraders and plant terpenes as natural inducer substrates that are ubiquitous and environmentally compatible.
The aim of this study was to examine how plant terpenoids, as natural growth substrates or inducers, would affect the biodegradation of PCB congeners. Various PCB degraders that could grow on biphenyl and several terpenoids were tested for their PCB degradation capabilities. Degradation activities of the PCB congeners, 4,4-dichlorobiphenyl (4,4-DCBp) and 2,2-dichlorobiphenyl (2,2-DCBp), were initially monitored through a resting cell assay technique that could detect their degradation products. The PCB degraders, Pseudomonas ((S)-(-) limonene, p-cymene and $\alpha$-terpinene) whereas Arthrobacter sp. B1B could not grow on the terpenoids as a sole carbon source. The B1B strain grown on biphenyl exhibited good degradation activity for 4,4-DCBp and 2,2-DCBp, while the activity of strains P166 and T104 was about 25% that of the B1B strain, respectively. Concomitant GC analysis, however, demonstrated that strain T104, grown on (S)-(-) limonene, p-cymene and $\alpha$-terpinene, could degrade 4,4-DCBp up to 30%, equivalent to 50% of the biphenyl induction level. Moreover, strain T104 grown on (S)-(-) limonene, could also degrade 2,2-DCBp up to 30%. This indicates that terpenoids, widely distributed in nature, could be utilized as both growth and/or inducer substrate(s) for PCB biodegradation in the environment.
서울시 중량천 하수처리장의 활성오니로부터 총 20주의 pentachlorophenol(PCP) 내성균주들을 분리하여 B. sphaericus B-2와 B. schlegelii B-13를 포함한 Bacillus spp. 9주, Corynebacterium spp. 4주, Staphylococcus aureus S-1 1주, Aeromonas spp. A-19 1주, Arthrobacter LN-3 1주로 동정하였다. 이 균주들은 $200{\sim}300\;ppm$ PCP와 0.1% glucose가 포함된 mineral salt 배지에서 생육하였으며 PCP를 분해하는 종류 13주와 분해하지 못하고 흡착 혹은 흡수하는 종류 7주로 구분되었다. PCP 분해균주들은 대부분 배양 24시간후 생육이 최고에 도달하여 PCP를 약 $75{\sim}90%$ 분해하였으며 PCP 흡착 혹은 흡수하는 균주들은 흡착한 PCP를 배양 24시간 이후 또는 72시간 이후에 방출하였다. PCP 분해균주 B. sphaericus B-2, B. schlegelii B-13의 분해 산물을 TLC를 이용하여 검출한 결과 B. sphaericus B-2의 배양액에서 2-chlorophenol, B. schlegelii B-13에서는 2,4-dichlorophenol로 추정되는 물질과 4종의 분해산물로 보이는 물질들을 검출하였다.
Bacterial strain No. P08 isolated from wastewater at the Cheongju industrial complex was found to be capable of degrading 4-chlorobenzoate under aerobic condition. P08 was identified as Comamonas sp. from its cellular fatty acid composition and 16S rDNA sequence. The fcb genes, responsible for the hydrolytic dechlorination of 4-chlorobenzoate, were cloned from the plasmid pJJl of Comamonas sp. P08. The fcb gene cluster of comamonas sp. PO8 was organized in the order fcbB-fcbA-fcbTl-fcbT2-fcbT3-fcbC. This organization of the fcb genes was very similar to that of the fcb genes carried on the chromosomal DNA of pseudomonas sp. DJ-12. However, it differed from the fcbA-fcbB -fcbC ordering of Arthrobacter sp. SU. The nucleotide sequences of the fcbABC genes of strain P08 showed 98% and 53% identities to those of Pseudomonas sp. DJ-12 and Arthrobacter sp. SU, respectively. This suggests that the fcb genes might have been derived from Pseudomonas sp. DJ-12 to form plasmid pJSl in Comamonas sp. P08, or that the fcb genes in strain DJ-12 were transposed from Comamonas sp. P08 plasmid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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