Aralia continentalis Kitagawa (Araliaceae), known as "Dokwhal" in Korea, has been widely used in traditional Korean medicine for analgesia, neuralgia, sweating, and rheumatism. The biological activity was estimated with methanol extracts of from cultivated roots and adventitious roots of A. continentalis. DPPH and ABTS activities showed the highest activity in methanol extract of adventitious roots at 175.6 and $279.7{\mu}g/mL$ ($RC_{50}$), respectively. Antioxidant activity of methanol extract of the adventitious roots was higher than other samples. In the antibacterial activity assay (paper disc method), the methanol extract of adventitious roots showed activity against S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis, and S. enterica. This study demonstrated that adventitious roots of A. continentalis, which was produced for the first time in the roots of A. continentalis, can be used as a natural antioxidant and antibacterial agents.
본 연구에서는 한약재의 장기보존을 위한 위생처리법으로 잘 알려진 감마선 조사 처리 시 독활 추출물의 항산화 활성에 미치는 영향을 검토하였다. 천연 약용식물인 독활의 감마선 조사 처리에 따른 조사 판별 marker 확인을 위해 광자극발광법, 열발광분석법, 전자스핀공명법을 이용하여 확인시험법의 판별 특성을 확인하였다. 그 결과 광자극발광법에서 비조사구 0 kGy에서 891.00 PCs의 중간시료 수치를 나타내어 광자극발광법 단독으로는 조사 여부 판별 확인이 어려운 것을 확인할 수 있었다. 하지만 열발광분석법, 전자스핀 공명법에서는 조사구와 비조사구 간의 차이를 명확히 확인할 수 있었으며, 이를 통해 한약재인 독활은 3가지 확인 시험법을 모두 적용하여 분석하는 것이 적합한 것으로 판단되었다. 에탄올 농도별 추출에서는 50% 에탄올에서 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy에서 각각 5.98 mg/g, 6.86 mg/g의 함량을 나타내었다. 항산화 활성 확인을 위해 추출물의 phenolic 농도를 $50{\sim}200{\mu}g/mL$로 조절하여 DPPH radical 소거 효과를 측정한 결과 열수와 50% 에탄올 추출물의 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy $50{\sim}200{\mu}g/mL$ phenolic 농도 전 구간에서 84.04~100.00%의 매우 높은 소거효과를 나타내었으나, 감마선 조사 처리에 따른 유의적인 차이는 없었다. ABTS radical 소거 활성 측정 결과 열수와 50% 에탄올 추출물의 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy $200{\mu}g/mL$ phenolic 농도에서 95% 이상의 높은 소거 효과를 나타내었다. Antioxidant protection factor(PF) 측정 결과 $100{\mu}g/mL$ phenolic 농도 처리 시 열수 추출물 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy에서 각각 2.51 PF, 2.01 PF, 50% 에탄올 추출물 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy는 각각 1.38 PF, 1.48 PF를 나타내었다. TBARs 저해 효과는 $50{\sim}200{\mu}g/mL$ phenolic 농도 전 구간에서 열수 추출물 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy에서 65.23~83.10%를 나타냈으며, 50% 에탄올 추출물 비조사구 0 kGy와 조사구 10 kGy에서 70.67~95.81%로 농도 의존적으로 증가하는 양상을 나타냈다. 본 연구 결과 감마선 조사 처리에 따른 total phenolic compounds 함량은 열수 추출물의 경우 조사 처리 후 함량이 감소하였고, 50% 에탄올 추출물의 경우 조사 처리 후 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 독활의 장기저장을 위해 처리한 감마선 조사 전과 후 독활 추출물의 항산화 활성 변화에는 큰 영향을 주지 않는 것으로 보이며 이는 감마선 조사법이 독활을 포함한 한약재의 장기저장을 위한 처리법으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
In our present study, we investigated the effects of continentalic acid on Streptococcus mutans (S. mutans) biofilm. Methanol extract of Aralia continentalis (A. continentalis) was suspended in water and sequentially partitioned with CHCl3, ethyl acetate (EtOAc), and n-butanol (n-BuOH). The CHCl3 fraction showed the highest activity and an antibacterial compound against S. mutans was isolated from this preparation through various chromatography methods by bioassay guided fractionation. MS, $^1H-NMR$ and $^{13}C-NMR$ analysis showed that the active principle was continentalic acid which was confirmed to show significant inhibitory effects against S. mutans biofilm. These results may provide some scientific rationale for the traditional use these extracts for the treatment of dental diseases.
In the present study, we has been isolated the anti-cariogenic component, stigmasterol, from Aralia continentalis (A. continentalis) and identified by MS, $^1$H-NMR and $^{13}$C-NMR and also investigated the anti-cariogenic properties of stigmasterol. The methanol extract of ,A. continentalis showed concentration-dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans. The MeOH extract was suspended in H$_2$O and sequentially partitioned with n-hexane, CHCl$_3$, EtOAc, and n-BuOH. The CHCl$_3$ fraction showed remarkable antibacterial activity against S. mutans. The anti-cariogenic compound, stigmasterol, has been isolated successively through the screening system and various chromatography methods. Anti-cariogenic properties of stigmasterol were also investigated. From this active chloroform subfraction, isolation and identification finally gave (24E)-stigmasta-5,22-dien-3${\beta}$-ol (stigmasterol) {[a]$_D\;^{25}$ -48.33$^{\circ}C$(C 0.28, CHCl$_3$)} by spectroscopic methods (MS, $^1$H-NMR and $^{13}$C-NMR) as an active principle. The compound, stigmasterol, showed significant growth, acid production, adhesion and water-insoluble glucan synthesis inhibitory effect against S. mutans. These results suggest that stigmasterol from ,A. continentalis may inhibit cariogenic properties of S. mutans and these properties may provide some scientific rationales that the local inhabitants used the extracts for treatment of dental diseases.
Dental plaque is a film of microorganisms on the tooth surface that plays an important part in the development of caries and periodontal diseases. Streptococcus mutans (S. mutans) is present in almost all types of dental plaque. Teeth and their supporting structure, the gums (gingiva) are subjected to infection by S. mutans that causes cavities and pyorrhea which, if left untreated, can eventually lead to gingivitis. Various chemical agents have been evaluated over the years with respect to their antimicrobial effects in the oral cavity; however, all are associated with side effects that prohibit regular long-term use. The present study was designed to investigate the effect of Aralia continentalis (Araliaceae) extracts on the growth, acid production, adhesion, and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The methanol extract of A. continentalis showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.25, 0.5, 1, 2 and 4 mg/ml compared to the control group. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 60% at the concentration of 0.25 mg/ml and complete inhibition was observed at the concentration of 4 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan from sucrose, methanol extract of A. continentalis showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.25 mg/ml. The synthesis of insoluble glucan was decreased in the presence of 0.25 - 4 mg/ml of the methanol extract of A. continentalis. Hence, we conclude that A. continentalis might be a candidate of anticaries agent.
Induction of phase II enzymes is a major mechanism of chemoprevention. The induction levels of quinone reductase (QR) activity in cultured murine hepatoma (Hepa 1c1c7) cells by 80%-methanol extracts of traditional medicinal plants were measured. Among the tested 81 plants, the extracts of Aralia continentalis, Magnolia obovata, and Viscum album were found to induce QR activities over 250%. The maximum induction levels obtained were 401.9%, 270.5%, and 301.8% by treatments of the extracts of A. continentalis $(318\;{\mu}g/ml)$, M. obovata $(53.8\;{\mu}g/ml)$ and V. album $(80.6\;{\mu}g/ml)$, respectively. These QR induction activities were more potent than those of the known QR inducers, t-butylhydroquinone (170.1%) and ${\beta}-naphthoflavone$ (320.0%).
식물 천연추출물에서 항균력을 갖는 활성 물질을 분리하고 이를 구강 건강 관리 제품에 사용하려는 연구가 진행되고 있다. 본 연구에서는 유기용매를 사용하여 독활과 우방자로부터 추출한 복합 화합물에 대한 구강 감염균인 Streptococcus mutans의 특정 유전자 발현 변화를 분석하여 항균 기작을 분석하고자 하였다. 전사체 분석 결과, 두 가지 천연추출물에 의해 다양한 대사 및 생리 작용과 연관된 유전자의 발현이 공통적으로 증가하거나 감소하는 것으로 나타났다. 세 가지 유전자(SMU_1584c, SMU_2133c, SMU_921)는 공통적으로 높은 수준으로 발현되었으며, 특히 이 중 SMU_921 (rcrR)은 두 가지 sugar phosphotransferase system (PTS)의 전사 활성자로써 당원의 수송과 생물막 형성에 기여하는 것으로 알려져 있다. 또한, 우방자 추출물에 비해 다수의 유전자 발현 변화에 영향을 미치는 것으로 나타난 독활 추출물의 성분 분석을 진행하였고, 활성 분획의 가스 크로마토그래피-질량분석법(GC-MS)을 통해 두 가지 활성 단일 물질을 동정하였다. 물질 분리 과정에서 여러 유기용매 분획 중 hexane층(ACEH)의 항균 활성이 가장 높게 관찰되었다. 다양종 미생물 군집을 사용한 실험결과, S. mutans에 대한 ACEH의 항균 특이성이 관찰되었으나, 상대적으로 S. sanguinis와 S. gordonii의 생균수도 크게 감소하는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 독활 천연추출물의 광범위한 항균 활성을 시사하며, 동정한 단일 물질의 항균 기작을 분석하여 맞춤형 항균 소재 개발에 중요한 기초 자료를 제공할 수 있다.
본 연구는 RAW264.7 대식세포에 대한 우슬과 땅두릅 복합 열수추출물(1 : 2, 1 : 3, 1 : 5, 2 : 1, 3 : 1 및 5 : 1 비율)의 항염증 효과를 조사했다. 세포 독성은 CCK 분석을 사용하여 확인하였다. 우리는 ELISA 키트를 사용하여 $IL-1{\beta}$, IL-6 및 $TNF{\alpha}$를 측정함으로써 우슬 및 땅두릅 복합 열수추출물의 항염증 효과를 평가하였다. 우슬 및 땅두릅 복합 열수추출물은 LPS로 자극된 RAW264.7 대식세포에서 $IL-1{\beta}$ 및 $TNF{\alpha}$를 유의적으로 억제하였다. 복합 추출물의 다양한 비율을 비교하였을 때, 2 : 1 비율은 LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 훨씬 더 효능이 있었고 $TNF{\alpha}$의 생성 또한 억제하였다. 본 연구의 결과는 우슬 및 땅두릅 복합 열수추출물이 RAW264.7 대식세포에 대해 강력한 항염증 효과를 갖는다는 것을 보여주며, 이들 추출물은 염증 질환 예방을 위한 기능성 식품의 좋은 공급원이 될 수 있다고 사료된다.
본 연구는 추출 용매별 땅두릅 추출물과 Lactobacillus plantarum으로 발효한 후 용매별로 추출한 땅두릅 발효추출물을 이용하여 항염증 효과를 측정한 연구이다. 땅두릅은 중추신경 계통에 대한 흥분작용이 있고 혈압강하 작용이 알려져 있으며 관절염, 감기, 신경통, 류마티스, 피부가려움증 등에 쓰인다. LPS (lipopolysaccharide)로 염증을 유도한 마우스 유래 macrophage에서의 NO 생성 및 염증관련인자의 발현에 미치는 영향을 검토하여 항염증 소재로서의 이용 가능성을 확인하였다. 건조 땅두릅을 water, ethanol, hexane, ethyl acetate, butanol을 이용하여 추출한 추출물들과 L. plantarum으로 발효한 후 추출한 추출물들에서 RAW264.7 대식세포에 대한 독성 여부를 측정하였고, 세포에 대한 독성이 나타나지 않는 농도에서 추출물의 항염증 활성을 확인하였다. 본 실험에 사용된 추출물은 LPS로 유도된 NO 생성을 유의적으로 억제하였으며, 주요 염증 유발인자인 COX-2와 iNOS의 발현 또한 유의적으로 억제하는 효과를 나타냈다. 염증관련 cytokine인 $IL-1{\beta}$, IL-6 및 $TNF-{\alpha}$의 생성량 또한 유의적으로 감소시켰다. 이상의 결과로부터 땅두릅을 L. plantarum으로 발효한 후 water, ethanol, butanol로 추출하였을 때 염증 억제 효과가 있는 기능성 식품 소재로서의 개발 가능성이 있을 것으로 사료된다.
In the present study, we investigated the anticariogenic compounds from Aralia continertalis (A. continnentalis) has been isolated and identified by MS, $^1H-NMR$ and $^{13}C-NMR$. The MeOH extract was suspended in $H_2O$ and sequentially Partitioned with $CHCl_3$, EtOAc, and n-BuOH. The $CHCl_3$ fraction showed remarkable antibacterial activity against S. mutans. The antibacterial activity compounds against 5. mutans by MIC was isolated successively through the screening system and various chromatography methods. From this active chloroform subfraction, isolation and identification finally gave continentalic acid by spectroscopic methods (MS, $^1H-NMR$ and $^{13}C-NMR$) as an active principle. The compound, continentalic acid, showed significant growth, acid production, adhesion and water-insoluble glucan synthesis inhibitory effect against 5. mutars. These results suggest that continentalic acid from A. continentalis may inhibit cariogenic properties of S. mutans and these properties may provide some scientific rationales that the local inhabitants used the extracts for treatment of dental diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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