포유동물의 혈장 지단백의 일종인 apolipoprotein E (APOE)는 인지질 및 트리글리세라이드와 같은 지질과 콜레스테롤의 대사와 운반에 중요한 기능을 담당한다. 본 연구는 지질대사조절 관련 후보유전자로서 APOE 유전자를 대상으로 한우에서 이 유전자의 SNP를 탐색 발굴하고 SNP 유전자형이 육량 및 육질 등 도체형질에 미치는 영향을 분석하기 위하여 수행하였다. 먼저 혈연관계가 없는 한우 60두의 pooled DNA를 제작하여 APOE 유전자의 exon 4 영역을 포함하는 primer를 설계하여 PCR로 증폭한 결과 exon 4 영역내 2034번째 T>C 염기치환에 의한 SNP를 검출하였다. 후대검정우 총 309두에 대한 검정 개체별 SNP 유전자형을 판정하기 위하여 Acc I 제한효소를 이용하여 PCR-RFLP기법으로 분석한 결과 SNP 유전자형 출현빈도는 TT형 10.9%, TC형 46.9% 및 CC형 42.2%로 나타났으며, T와 C 대립유전자빈도는 각각 0.344와 0.656으로 추정되었다. 또한 APOE 유전자의 SNP 유전자형과 육량 및 육질 등 도체형질과의 연관성을 통계 분석한 결과 도체율 및 육색형질과의 유의적 연관성이 입증되었다. 즉, TT형을 가진 개체들이 CC형을 가진 개체들에 비해 도체율 값이 유의적으로 높았다(p<0.05). 또한 육색에서도 TT형을 가진 개체들이 CC형을 가진 개체들에 비해 좀 더 바람직한 육색을 나타내었다. 따라서 본 연구에서 검출한 한우 APOE 유전자의 SNP 유전자형은 한우의 육량지수 평가 및 도체율이 높은 개체선발을 위한 DNA marker로 활용 가능할 것으로 기대된다.
초저밀도 아포지단백(Very Low Density Apolipoprotein-II)은 조직의 지방단백질 분비 조성과 밀접한 관련이 있다고 알려진 유전자로서 최근 닭에서 성장 및 체구성과 매우 높은 연관이 있다고 알려져 있다. 본 연구는 닭의 3품종에서 PCR-RFLP 방법을 통해 apoVLDL-II 유전자의 유전자형을 분석하고 Broiler 형(B)과 Fayoumi 형(F)을 결정하였다. 각 품종간 유전자형 빈도는 한국 재래계에서 BB가 0.37, BF가 0.43, FF가 0.2로 검출되었고, 오계에서 BB가 0.2, BF가 0.6, FF가 0.2로 검출되었으며, 백색레그혼에서 BB가 0.16, BF가 0.84로 검출되었다. Broiler 형은 성장이나 체구성을 높이는 방향으로 작용한다는 기존의 보고를 바탕으로 본 연구에서 나타난 집단내 다양한 유전자형 분포는 재검증 작업을 거쳐 육종에 의해 이 형질들을 개량할 수 있음을 의미한다.
Purpose. The purpose of this study were to investigate the effects of a 12-week brisk walking program on triglycerides (TG) and apolipoprotein B (Apo B) and to compare these effects to those of a brisk walking plus diet program in middle-aged overweight/obese ($BMI{\geq}23$) Korean women with hypertriglyceridemia. Method. This analysis was done with nineteen middle-aged overweight/obese Korean women who completed either the brisk walking program (9 women) or the brisk walking plus diet program (10 women) for 12 weeks. The brisk walking consisted of walking for 20 to 50 minutes/day at an intensity of 40 to 70% of heart rate reserve (HRR) for 3 to 6 days/week. The diet consisted of 60 minutes of group education and 20 to 30 minutes of individual counseling every week. TG and Apo B were assessed pre- and post-intervention. Results. TG and Apo B decreased significantly after the brisk walking program (Z = -2.31, p = 0.021; Z = -2.59, p = 0.009). TG and Apo B lowering effects of the brisk walking program were not significantly different from those of the brisk walking plus diet program (U = 37.0, P = 0.549; U = 42.0, P = 0.842). Conclusion. Brisk walking can be an effective intervention for overweight/obese middle-aged women with hypertriglyceridemia in reducing cardiovascular risk by lowering TG and Apo B levels. Adding diet to brisk walking may have no additional significant effects on changes in TG and Apo B.
As fat consumption has increased in Korea , serum cholesterol concentrations have risen and the prevalence of atherosclerosis increased. The aim of the present study was to investigate the association among apolipoprotein E (Apo E) phenotypes, dietary fat consumption, plasma lipoprotein levels and fatty acid compositions of red blood cells in young healthy women. Seventy-one percent of participants had Apo E3/3, 14.9 percent had ApoE3/2 , 11.8% had Apo E4/3 and 1.2% had Apo E4.2. The subjects daily consumed approximately 1760kcal containing 29 energy % of fat. The ratio of polyunsaturated fat to saturated fat in a diet was 0. 73 . There were no significant differences of nutrient intakes according to Apo E phenotypes. Total cholesterol concentrations of subjects averaged approximately 160mg/dl , but 12 percent of them had over 200mg/dl, which is higher than the range recommended by the National Cholesterol Deucation Program. Notably, most subjects with 210mg/dl had Apo E4 isoforms. Subjects with Apo E4 isoforms had significantly higher total and LDL-cholesterol concentrations than those with Apo E3/2. Also subjects carrying Apo E4 isoforms tended to accumulated more fat in the body. Their BMI , WHR and arm fat area appeared to be how can arm fat area be greater no you mean grater, please check work vsage than subjects with Apo E3 isoforms, but not significantly. Fat intakes slightly influenced serum cholesterol levels. Myristic aicd intakes were positively correlated to serum total and LDL-choelsterol levels. Polyunsaturated fatty acid intakes were negatively correlated to serum total choelsterollevels. The results of 소냐 study suggest that , people with Apo E4 isoforms need to prevent the raising of serum total and LDL -cholesterol concentrations by reducing calorie and fat intakes and by maintaining a normal weight.
치커리 수용성 추출물을 $2\%$ 및 $4\%$ 수준으로 첨가한 식이를 Sprague-Dawle계 흰쥐에 2주간 투여하여 중성지질 대사에 미치는 영향을 검토하였다. 혈청 중성지질 농도는 대조군에 비해 치커리 추출물 투여군에서 현저히 감소하였다. Apolipoprotein B-함유 lipoprotein의 합성 및 분비에 필수적인 간장 microsomal triglyceride transfer protein (MTP)활성도 치커리 투여군에서 현저히 감소하였다. 간 조직에서 중성지질 합성의 중요 조절효소로 알려진 phosphatidate phosphohydrolase (PAP) 활성은 각 실험군간에 큰 차이는 없었다. 또한 혈청 및 간 조직의 콜레스테롤, 인지질, 유리지방산 농도도 각 실험군간에 유의적인 차이는 없었다. 이상의 실험결과에서 치커리 수용성 추출물 $2\%$ 및 $4\%$ 첨가는 간 조직에서 혈중으로 분비하는데 중요한 역할을 하는 MTP활성의 감소가 혈청중성지질 농도의 감소에 영향을 미치는 중요한 요인으로 사료되었다.
Apolipoprotein B-100 (Apo-B100) is a major component of low density lipoprotein (LDL). Apo B-100 protein has 4,536 amino acid sequence and these amino acids are classified into peptide groups A to G with subsequent 20 amino acids (P1-P302). The peptide groups were act as immunoglobulin (Ig) antigens which oxidized via malondialdehyde (MDA). The mimetic peptide P1 (EEEMLENVSLVCPKDAT RFK) out of D-group peptides carrying the highest value of IgG antigens were selected for structural studies that may provide antigen specificity. Circular Dichroism (CD) spectra were measured for peptide secondary structure in the range of 190-250 nm. Experimental results show that P1 exhibit partial of ${\beta}-sheet$ and random coil structure. Homonuclear (COSY, TOCSY, NOESY) 2D-NMR experiments were carried out for NMR signal assignments and structure determination for P1. On the basis of these completely assigned NMR spectra and distance data, distance geometry (DG) and Molecular dynamics (MD) were carried out to determine the structures of P1. The proposed structure was selected by comparisons between experimental NOE spectra and back calculated 2D NOE results from determined structure showing acceptable agreement. The total Root-Mean-Square-Deviation (RMSD) value of P1 obtained upon superposition of all atoms was in the range $0.33{\AA}$. The solution state P1 has mixed structure of ${\beta}-sheet$ (Glu[1] to Cys[12]) and random coil (Pro[13] to Lys[20]). These NMR results are well consistent with secondary structure from experimental results of circular dichroism. Structural studies based on NMR may contribute to the studies of atherosclerosis and observed conformational characteristics of apo B-100 in LDL using monoclonal antibodies.
Atherosclerosis arising from the pro-inflammatory conditions associated with chronic kidney disease (CKD) increases major cardiovascular morbidity and mortality. Rapamycin (RAPA) is known to inhibit atherosclerosis under CKD and non-CKD conditions, but it can cause dyslipidemia; thus, the co-application of lipid-lowering agents is recommended. Atorvastatin (ATV) has been widely used to reduce serum lipids levels, but its synergistic effect with RAPA in CKD remains unclear. Here, we analyzed the effect of their combined treatment on atherosclerosis stimulated by CKD in apolipoprotein E-deficient (ApoE-/-) mice. Oil Red O staining revealed that treatment with RAPA and RAPA+ ATV, but not ATV alone, significantly decreased the atherosclerotic lesions in the aorta and aortic sinus, compared to those seen in the control (CKD) group. The co-administration of RAPA and ATV improved the serum lipid profile and raised the expression levels of proteins involved in reverse cholesterol transport (LXRα, CYP7A1, ABCG1, PPARγ, ApoA1) in the liver. The CKD group showed increased levels of various genes encoding atherosclerosispromoting cytokines in the spleen (Tnf-α, Il-6 and Il-1β) and aorta (Tnf-α and Il-4), and these increases were attenuated by RAPA treatment. ATV and RAPA+ATV decreased the levels of Tnf-α and Il-1β in the spleen, but not in the aorta. Together, these results indicate that, in CKD-induced ApoE-/- mice, RAPA significantly reduces the development of atherosclerosis by regulating the expression of inflammatory cytokines and the co-application of ATV improves lipid metabolism.
Kim, Do-Hwan;Cho, Kwang-Ho;Moon, Byung-Soon;Son, Mu-Song;Jeong, Se-Jin;Lee, Hye-Jung;Hong, Seung-Heon;Kim, Hyung-Min;Um, Jae-Young
Advances in Traditional Medicine
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제6권4호
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pp.312-318
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2006
The association between apolipoprotein E (apoE) gene polymorphism and ischemic cerebrovascular disease (ICVD) has been controversial. These controversies may be due to inaccurate classification of patients and ethnic differences. The aim of the present study was to assess the relationship between apoE gene polymorphism and the development of ICVD in a population from Korea. We investigated 136 patients with ICVD and 357 controls without ICVD. No differences in the apoE genotypes frequencies ($X^{2}$ = 3.660, df = 5, P = 0.454) and even in the alleles frequencies ($X^{2}$ = 1.946, df = 2, P = 0.378) were observed in the ICVD patients compared with that in controls. The data have been compared with data found in other population groups. However, the risk of ICVD associated with apoE ${\varepsilon}3/{\varepsilon}4$ genotype was increased nearly 3-fold in subjects possessing the history of diabetes mellitus (OR 3.3, 95% CI 1.2-9.4, P = 0.026). We concluded that the apoE polymorphism is not associated with ICVD at least in the Korean population, but the apoE frequencies found in this study differ significantly from those obtained in Japanese.
Apolipoprotein B-100 (apo B-100), the main protein component that makes up LDL (Low density lipoprotein), consists of 4,536 amino acids and serves to combine with the LDL receptor. The oxidized LDL peptides by malondialdehyde (MDA) or acetylation in vivo act as immunoglobulin (Ig) antigens and peptide groups were classified into 7 peptide groups with subsequent 20 amino acids (P1-P302). The biomimetic peptide P143 (IALDD AKINF NEKLS QLQTY) out of C-group peptides carrying the highest value of IgG antigens were selected for structural studies that may provide antigen specificity. Experimental results show that P143 has β-sheet in Ile[1]-Asn[9] and α-helice in Gln[16]-Tyr[20] structure. Homonuclear 2D-NMR (COSY, TOCSY, NOESY) experiments were carried out for NMR signal assignments and structure determination for P143. On the basis of these completely assigned NMR spectra and proton distance information, distance geometry (DG) and molecular dynamic (MD) were carried out to determine the structures of P143. The proposed structure was selected by comparisons between experimental NOE spectra and back-calculated 2D NOE results from determined structure showing acceptable agreement. The total Root-Mean-Square-Deviation (RMSD) value of P143 obtained upon superposition of all atoms were in the set range. The solution state P143 has a mixed structure of pseudo α-helix and β-turn(Phe[10] to Glu[12]). These results are well consistent with calculated structure from experimental data of NOE spectra. Structural studies based on NMR may contribute to the prevent oxidation studies of atherosclerosis and observed conformational characteristics of apo B-100 in LDL using monoclonal antibodies.
Osteoarthritis (OA) is the most common rheumatic pathology. One of the major objectives of OA research is the development of early diagnostic strategies such as those using proteomic technology. Synovial fluid (SF) in OA patients is a potential source of biomarkers for OA. The efficient and reliable preparation of SF proteomes is a critical step towards biomarker discovery. In this study, we have optimized a pretreatment method for twodimensional gel electrophoresis (2DE) separation of the SF proteome, by enriching low-abundance proteins and simultaneously removing hyaluronic acid, albumin, and IgG. SF samples pretreated using this optimized method were then evaluated by 1DE and 2DE separation followed by immunodetection of cartilage oligomeric matrix protein (COMP), a known OA biomarker, and by the identification of 3 proteins (apolipoprotein, haptoglobin precursor, and fibrinogen D fragment) that are related to joint diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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