Kim, Byong-Kak;Kim, Ji-Hyun;Kim, Ha-Won;Choi, Eung-Chil
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.17
no.1
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pp.39-48
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1986
To find antitumor components in the shake-cultured mycelia of Volvariella bombycina, the mycelia were extracted with hot water. After the extract was dialyzed and freeze-dried, a protein-polysaccharide fraction was obtained and examined for antitumor activity against the solid form of sarcoma 180 in ICR mice. It showed 60.3% inhibition ratio at a dose of 20mg/kg/day for 10 days. It was found to consist of a polysaccharide moiety and a protein moiety. After gel filtration on Sepharose 4B, Fraction B was obtained and showed the highest inhibition ratio of 71.1%. When the antitumor component was examined for immunopotentiating activity, it was found to increase the macrophage accumulation in the peritoneal cavity as well as the antibody production of the spleen cells of the mice.
The carpophores of three Korean mushrooms, Coriolus versicolor, Pleurotus ostreatus and Lentinus edodes were respectively extracted with hot water and the extracts were dialyzed through Visking tube. They were found to exert an antitumor activity against sarcoma-180 implanted in mice. Especially, the inhibition ratio of the extract of Coriolus versicolor (100 mg/ Kg.i.p) was almost 100% . But all the extracts did not affect the growth of leukemia L517Y cells in vitro. Therefore these facts indicate that the extracts appear to stimulate cell-mediated immunity.
This study implicated that the CBT-AK5 purified from Lactobacillus casei (LAFTI L26) which showed antitumor activity in ICR mice. Hence, ICR mice were inoculated intraperitoneally Sarcoma-180 as well as CBT-AK5. Then we observed the life span and tumor increment of those ICR mice. Here our studies showed effect on two different way of treatment as intraperitoneally and orally treated in Sarcoma-180 infected ICR mice. We found that intraperitoneally treatment of Sarcoma-180 and CBT-AK5 is more effective than orally fed. The life span of the ICR mice were highly reduced after the inoculation of Sarcoma-180. Those effects like increment of body weight, the growth of ascites and solid were inhibited significantly after the treatment of CBT-AK5 in Sarcoma-180 infected ICR mice. Finally these studies suggested that CBT-AK5 isolated form Lactobacillus casei showed excellent antitumor activity against Sarcoma-180 infected ICR mice.
To develop potent anitumor polysac-charides from higher hungi of Korea the alcohol precipitated polysaccharides, which were obtained from hot water extracts of shake-cultured mycelia of eight species of basidiomycetes, were subjected to antitumor screening tests, using sarcoma 180 as a tumor cell. When administered i. p, at the dose level of 20mg/kg/day for ten days into the mice which were implanted with $1{times}10^{8}$ cells of sarcoma 180 twenty-four hour before the start of polysaccharide injection, the polysaccharides of Plutcus cervinus ISA-Pc-1004, Pleurotus pulmonarius, Hydnum repandum ISA-Hr-1006, and Laccaria laccata ISA-LI-1008 respectively showed inhibition ratios of 62.0%, 51.7%, 64.8%, and 57.8%. They were selected for further study, while those of Pancillus serotina ISA-Ps-1012, Laccaria amethystina ISA-La 1001, Pholiota adiposa ISA-Pa-1010, and Lepista spISA-Ls-1007 respectively showed inhibition ratios of -9.3%, 25.3%, 27.3% and 33.0%.
Neutral salt soluble [0.9% NaCl (Fr. NaCl)], hot water soluble (Fr. HW) and methanol soluble (Fr. MeOH) materials were extracted from Paecilomyces sinclairii. In vitro cytotoxicity tests. Fr. HW was not cytotoxic against MH3T3, Sarcoma 180 and HepG2 cancer cell lines at the concentration of $0{\sim}2,000\;{\mu}g/ml$, while HT-29 cell line was cytotoxic at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. Fr. NaCl and Fr. MeOH were slightly cytotoxic to the cell lines. Intraperitoneal injection with Fr. NaCl and Fr. MeOH exhibited antitumor activity with life prolongation effect of 32.3% in mice inoculated with Sarcoma 180. Fr. NaCl improved proliferation of spleen cells and the immunopotentiation activity of B lymphocyte by increasing spleen cell numbers and the alkaline phosphatase activity by $2.4{\sim}2.6\;and\;2.7{\sim}3.9$ folds, respectively. Fr. NaCl generated $89\;{\mu}M$ of nitric oxide (NO) when cultured with RAW 264.7, a mouse macrophage cell line, at the concentration of $50\;{\mu}g/ml$, while iipopolysaccharide, a positive control, produced $79\;{\mu}M$. The Fr. NaCl showed the hightest antitumor effect and activation of B lymphocytes and macrophage. From these results, antitumor effect of P. sinclaitii was likely due to immunopotentiation activity.
Augmentation of antitumor activity of antitumor drugs in combination with Lactobacillus casei HY2782 (LC2782) was studied against Sarcoma-180 (S-180) and Lewis lung carcinoma (3LL). Antitumor drugs used in this study were 5-fluorouracil (5-fu) and cyclophosphamide (CP). The prolongation effect of LC2872 on the life span of mouse intraperitoneally implanted with S-180 was stronger than that of OK-432 and BCG, while the inhibitory effect of OK-432 and BCG on the growth of 3LL solid tumor was a little stronger than that of LC2782. Average survival rates of mice administrated LC2782, OK-432 and BCG were 192%, 141%, and 112%, respectively, when that of the control was 100%, Intralesional administration of 5-Fu, CP, 5-Fu+LC2782 and CP+LC2782 resulted in 93%, 69%, 99% and 73% inhibition rates against 3LL solid tumor proliferation. The combination therapy of 5-Fu or CP with LC2782 significantly prolonged the life span of S-180-inoculated ICR mice. Average survival rates of mice administrated 5-Fu and CP alone were 115% and 99%. Furthermore, survival rates of mice administrated 5-Fu and CP in combination with LC2782 were 226% and 244%, respectively.
To investigate antitumor components in Korean higher fungi, the carpophores of Pholiota squarrosa belonging to the family Strophariaceae were collected and extracted with hot water. A protein-bound polysaccharide fraction was obtained by adding ethanol to the extract and by dialyzing through Visking tube. The fraction was examined for antitumor activity against sarcoma 180 implanted in mice. It showed an inhibition ratio of 78.7% at the dose of 20mg/kg/day. The tumor in two of the ten mice was completely regressed. The chemical analysis of the antitumor fraction by Anthrone and Lowry-Folin methods showed that it consisted of 42% polysaccharide and 55% protein. The enzyme fraction of the carpophores showed no proteolytic activity on casein.
To elucidate action mechanism of lyophyllan A, an antitumor polysaccharide of Lyophyllum decastes, its immunological activities were examined. Lyophyllan A increased significantly the weights of spleen and liver of mice. Lyophyllan A also restored the decreased thymic weight in tumor-bearing mice. It did not show any direct cytotoxicity against tumor cells, but showed immunopotentiating activities by increasing the number of the plaques in hemolytic plaque assays. Lyophyllan A increased the number of peritoneal exudate cells (PEC) and inhibited the growth of sarcoma 180 mixed with PEC. Moreover the macrophages from lyophyllan A-treated mice exhibited a strong cytotoxic activity towards L5178Y target cells.
A protein-polysaccharide fraction was isolated from the mycelial culture of a Korean basidiomycetous fungus, Hebeloma crustuliniforme, and was named HCA (Hebeloma crustulineforme fraction A). When intraperitoneally injected at 200 mg/kg/day once daily for 10 days, HCA inhibited the growth of sarcoma 180 solid tumor in ICR mice by 65.1% (p<0.05). HCA also exerted protective effect against leukopenia induced by cyclophosphamide with the protection ratio of 39.7% (p<0.01).
Pseudixus japonicus agglutinin (PJA) was isolated. And its characteristics were compared with those of concanavalin A (Con A). PJA is a glycopritein composed of 49.3% carbohydrate and 50.7% protein which had relatively high percentages of glutamic acid, aspartic acid and phenylalanine residues. The hemagglutinating activity of PJA was approximately one-eighth of that of Con A when tested with mouse crythrocytes. PJA failed to simulate the proliferation or transformation of human and mouse lymphocytes in contratst to Con A. PJA and Con A showed cytotoxicities against SNU-1 (human stomach cancer cells), SNU-CI (human colon cancer cells) and mouse Sarcoma 180 cells when tested by 3-(4, 5-dimethyl thiazol-2-yl)2. 5-diphenyl tetrazolium bromide (MIT) colorimetric assay. The antitumor activity of the lectin in vivo was also tested in Sarcoma 180 bearing mice. There was no significant difference in prologation of lifc span of the mice after the treatment with PJA and Con A for 10 consecutive days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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