Objectives : Hibiscus (Hibiscus sabdariffa L.) is rich in antioxidants such as flavonoids and anthocyanins and is known to have anti-inflammatory activity and anti-aging function of the skin, but there is no study on its effect on the skin barrier. This study aim to investigate the positive effect on the skin barrier by confirming the effect of water extracts of Hibiscus sabdariffa L. (WEHS) on the tight junction-related gene expression. Methods : The antioxidant efficacy of WEHS was investigated through ABTS and DPPH assays, and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium was performed to examine the effect on cell viability. quantitative Reverse transcription polymerase chain reaction and immunoblot analysis were performed to confirm the effect of WEHS on the expression of tight junction-related genes, and immunofluorescence microscopy was used to confirm the movement of Claudin 1 protein into tight junctions. Results : WEHS showed strong antioxidant activity and induced an increase in both mRNA and protein expression levels of Claudin 1 among tight junction-related genes. The strong localization of Claudine 1 protein increased by WEHS to the tight junction was confirmed by immunofluorescence microscopy. Conclusions : Hibiscus was confirmed through this study to show antioxidant activity and the function of promoting the expression of the tight junction Claudin 1 gene, suggesting that Hibiscus can be used as a material for the prevention and treatment of skin moisturizing and atopy, which have an important influence on tight junction.
본 연구는 불포화 인지질인 DLPC liposome에 도라지(Platycodon grandiflorum A. DC, PG)의 용매별 분획물 일정 량을 가하고, 산화제 benzoyl peroxide를 가한 후 시료의 항산화 작용을 비교 분석하였다. 도라지 용매별 추출물 중 ethylether 분획물인 PGMEE와 ethylacetate 분획물인 PGMEA는 $\alpha$-tocopherol의 경우 보다 훨씬 그 산화지수가 낮아두 분획물에 의한 강한 항산화력을 측정할 수 있었으며, 잘알려진 강력한 항산화제인 BHT(butylated hydroxytoluence)의 경우와 비슷한 항산화 효과를 나타내었다. 한편 PGMEE 분획층에 비타민 C를 일정량을 첨가함으로서 상호 보강 작용에 의한 항산화 상승효과를 본 결과, Vit C를 첨가하지 않았을 때보다 산화지수가 횔씬 낮아졌다. BHT 함유의 DLPC liposome의 경우도 Vit C에 의한 비슷한 추과를 나타내었다. 이상의 결과에 의하여 도라지의 PGMEE 분획층에는 BHT와 비슷한 강한 항산화 효과를 가진 물질의 존재가 분명하다고 사료되며 비타민 C 첨가로 인한 항산화 상승 효과도 본 연구결과에 의해 뚜렷이 알 수 있었다. 이와 같은 연구에 의해 여러 질병들의 원인이 될 뿐만 아니라 세포막 손상을 일으키는 활성 산소 또는 유리기의 생성억제 등 균형된 식생활을 통한 식품 섭취의 중요성이 매우크다고 인식되며 특히 식품으로서 애용되고 있는 도라지의 인지질 세포막에 미치는 항산화 효과가 식품으로서 약이 되는 기전 규명에 기초자료가될 것을 바라는 바이다.
식품 12종과 한약재 12종의 에탄을 추출물이 대추·오미자 약선소스의 항산화 및 관능적 특성에 미치는 영향을 알아보았다. 그 결과, 녹차, 쑥, 민트, 레몬 및 부추 등의 식품 추출물과 인삼, 솔잎, 갈근, 모과 및 귤홍 등의 한약재 추출물 첨가시 시료 소스는 높은 항산화능을 보였다. 이들 에탄을 추출물은 페놀성 화합물 함량과 전자공여능이 높고. 과산화물 생성량은 적어 항산화 효과도 큰 것으로 나타났다. 한편 녹차, 쑥, 인삼 및 솔잎 추출물은 특유의 맛과 향 때문에 시료 소스에 첨가시 기호도는 높지않았으나 레몬과 모과 등의 추출물은 강한 단맛과 신맛에 의해 기호도도 증가시켰다. 특히 레몬즙은 대추·오미자 약선소스의 항산화 효과 및 기호도를 높이는데 가장 적당한 것으로 나타났다.
Preservation of liquid semen is an important factor for breeding management in swine industry. Oxidative stress of spermatozoa during liquid preservation has a detrimental effect on sperm quality and decreases fertility. Objective of this study was to determine the effect of antioxidant, Quercetin, on capability of porcine liquid semen preservation. Freshly collected porcine semen from boars (n=3), having proven fertility was counted, diluted to $3{\times}10^7/mL$ and divided into 5 different semen extenders. Aliquots of diluted semen with different extenders were subjected to measure the pH, motility, viability and sperm DNA structure status on elapse time after preservation for 10 days. For the first 3 days, semen preserved in all 5 different extenders maintained their initial pH and either gradually decreased or increased thereafter, indicating lipid peroxidation has started. Sperm motility (r=0.52, p=0.01) and viability (r=0.55, p=0.03) had positive correlation with semen pH. Sperm motility was maintained well (p<0.05) in especially 2 extenders containing Tris and antioxidant compared to other extenders, suggesting both Tris and antioxidant worked as pH regulator and had beneficial effects on sperm characteristic during preservation. Sperm DNA structure status accessed by sperm chromatin structure assay on elapsed time after preservation, tended to be higher in semen preserved without antioxidant. Taken together, addition of antioxidant to extender prevents the sperm from oxidative stress during storage in mechanism by which antioxidant slows the lipid peroxidation, and thus reduced the reactive oxygen species in preserved porcine semen resulted in maintaining semen pH, sperm motility and viability for 7~10 days.
Objectives : Natural products containing bioactive compounds with high antioxidant activity are potentially important sources that can contribute to the improvement of various diseases. Therefore, the aim of this study was to investigate phenolic compounds of Cinnamomum cassia (C. cassia) ethanolic extract (CCEE). And then we evaluated the antioxidant effect. Methods : We used liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) to identify the compounds in CCEE. LC-MS/MS was performed in positive ion mode using Shimadzu, Nexera HPLC system and IDA TOF mass system. Solvent A was distilled water and solvent B was acetonitrile as mobile phase. The analysis was performed at a flow rate of 0.5 ml/min, column temperature of 35 ℃ and wavelength of 284 nm. The antioxidant effect of CCEE was analyzed using DPPH (2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical) and ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)). In addition, total phenolics and total flavonoids contents were measured to determine antioxidant effects. Results : Analysis using LC-MS/MS identified four compounds: Coumarin, Trans-cinnamaldehyde, Trans-cinnamic acid, and 2-Methoxycinnamaldehyde. Free radicals decreased in a concentration-dependent manner starting from 10 ㎍/ml of CCEE, and decreased to a level similar to Ascorbic acid (AA) from a concentration of 60 ㎍/ml onwards. Conclusions : Based on the findings, CCEE exhibits strong antioxidant activity as evidenced by the presence of Coumarin, Trans-cinnamaldehyde, Trans-cinnamic acid, and 2-Methoxycinnamaldehyde. Consequently, this study suggests that CCEE can serve as an important source of natural antioxidants and can be efficiently used in the management of oxidative stress diseases.
It has been suggested that oxygen-derived free radicals play an important role in the pathophysiology of acute gastric ulceration induced by NSAIDs and ischemia-reperfusion. Taurine is hypothetized to exert its protective effect on NSAIDs-induced gastric injury by its antioxidant properties. Protective effect of taurine on indomethacin-induced gastric mucosal lesion and its protection mechanism were investigated. Intragastric administration of 25 mg/kg of indomethacin induced hemorrhagic lesions on the glandular stomach in rats. Pretreatment with 0.25 or 0.5 g/kg of taurine one day before or for 3 days significantly reduced the gastric lesion formation and inhibited the elevation of lipid peroxide level in gastric mucosa. The luminol-dependent chemiluminescence of rat peritoneal neutrophils increased immediately after treatment of FMLP or indomethacin. Taurine (5-20 mM) inhibited chemiluminescence of neutrophils activated by FMLP. Human neutrophils (polymorphonuclear leukocytes) significantly adhered to the confluent monolayer of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) after coincubation with indomethacin. This neutrophil adhesion induced by indomethacin to HUVEC was prevented by taurine in a dose-dependent manner. These results indicate that the protective effect of taurine against NSAIDs-induced gastric mucosal injury is due to its antioxidant effect, which inhibits lipid peroxidation and neutrophil activation.
잊혀져가고 있는 전통주의 우수함을 알리고자 한국의 전통 반가주인 삼해주를 제조하고 시판되고 있는 곡주와 비교 실험하며, 생리활성 및 세포독성에 관한 연구를 진행하였다. 기존의 문헌에 소개된 방법을 변형하여 3가지 종류의 삼해주를 제조하였으며, 시중에서 곡주 5종을 구입하여 실험하였다. DPPH 라디칼 제거능과 아질산염 소거능은 곡주 G가 가장 뛰어났으며, ABTS 라디칼 제거능은 삼해주가 가장 우수하였다. 삼해주 중에서는 C 시료가 DPPH 라디칼 제거능, 아질산염 소거능, ABTS 라디칼 소거능이 가장 뛰어났다. 혈전용해능의 경우 삼해주 A-C가 13-17U로 다른 곡주에 비해 그 활성이 높게 나타났다. 각 시료에 대하여 10-160배까지 단계적으로 희석하여 HeLa, A549, L-132 세포에 처리하였을 때, 인체유래 자궁암 세포주인 HeLa 세포의 경우 10배 희석액에서 삼해주가 강한 세포 독성을 보였고, A549 세포의 경우 10배 희석액에서 삼해주의 세포독성 효과가 크나 시료에 따라 그 편차가 심하였다. L-132의 경우 10배 희석액에서 삼해주의 세포독성 효과가 다른 시료에 비해 강하였으나, 다른 암세포에 비해 약한 것을 알 수 있다. 본 연구의 결과에 의하면 삼해주에 존재하는 미지의 약리 성분이 생리 활성 및 암세포의 성장에 영향을 미치는 것으로 판단되었다. 이는 삼해주 제조 시 사용된 누룩과 오랜 발효 기간에 의한 영향으로 생각되며, 누룩에 대한 연구가 더 진행되어야 할 것으로 여겨진다.
치매유발제인 $AlCl_3$에 대한 rosmarinic acid의 영향을 알아보기 위하여 뇌세포종인 배양 C6 glioma 세포를 배양한 후 세포생존율을 비롯한 전자공여능(electron donating ability, EDA), SOD-유사활성(superoxide dismutase-like activity) 및 지질과산화(lipid peroxidation) 억제능을 조사하였다. 본 연구에서 $AlCl_3$는 배양 세포에 농도 의존적으로 세포생존율을 대조군에 비하여 유의하게 감소시킴으로서 세포독성을 나타냈다. 또한, $AlCl_3$의 $XTT_{50}$값이 $142.2{\mu}M$에서 나타남으로 이는 Borenfreund와 Puerner의 독성판정기준에 의하여 중간독성(mid-toxic)인 것으로 나타났다. 한편, rosmarinic acid가 $AlCl_3$에 미치는 영향에 있어서, $40{\mu}M$ rosmarinic acid 처리에서는 $AlCl_3$만의 처리에 비하여 세포생존율을 유의하게 증가시킴으로서 $AlCl_3$의 산화적 손상으로부터 세포손상을 보호하였다. 또한 rosmarinic acid는 전자공여능을 비롯한 SOD-유사활성 및 지질과산화의 억제효과를 보임으로서 항산화능을 나타냈다. 이상의 결과로 부터 산화적 손상이 $AlCl_3$의 독성에 관여하고 있으며, rosmarinic acid는 항산화능에 의하여 $AlCl_3$의 독성을 효과적으로 방어하였다. 따라서, rosmarinic acid와 같은 천연성분은 치매와 같이 산화적 손상과 관련된 병변의 치료적 개선을 위한 천연 소재로서의 가능성을 제시하였다.
본 연구에서는 Annona muricata 잎 추출물(graviola leaf extracts, GLE)의 항산화(antioxidant), 항균(antibacterial), 미백(whitening) 및 주름 개선(anti-wrinkle) 효과 등을 조사하였으며, 항산화(antioxidant) 효과에 대한 활성은 전자공여능 분석을 통해 측정하였다. 그 결과 GLE는 농도 의존적으로 전자공여능이 증가하는 것으로 나타났다. GLE의 항균 활성은 paper disc법으로 측정하여 나타냈으며, 표준물질인 ampicillin과 비교하여 메티실린내성 황색포도상구균 CCARM3115에서 비교적 높은 항균 활성을 나타내었다. GLE에 대한 미백(whitening) 효과 역시 tyrosinase 저해 활성 측정을 통해 진행하였으며, 그 결과 GLE는 농도가 증가함에 따라 tyrosinase 활성이 감소하는 것으로 나타났다. GLE 농도에 따른 L-tyrosine을 DOPA로 바꾸는 데 관여하는 hydroxylation 반응과 관련한 mushroom tyrosinase의 저해 활성은 표준물질인 arbutin에 비해 $125{\sim}250{\mu}g/mL$ 농도 범위에서 특히 높게 나타났다. B16-F10 cell에 대한 melanin 생합성 저해능은 농도 의존적으로 감소하는 경향을 보였으며, $100{\mu}g/mL$에서 76.7%를 나타났다. 주름 생성과 관련하여서는 elastase 저해 활성 측정을 통해 진행하였으며, 그 결과 동일한 농도에서 GLE 및 ursolic acid는 10.5, 56.5%로 나타났다. 이러한 결과를 통해 Annona muricata 잎 추출물(Graviola Leaf Extracts, GLE)이 항산화 및 미백 활성에 상당한 효과가 있음을 확인할 수 있었으며, 미백 화장품 성분으로서 과색소침착 치료에 유용할 것으로 기대된다.
Hair loss affects interpersonal relationships and causes psychological stress. In this study, we investigated the antioxidant activity of Cynanchi Wilfordii Radix (CWR) and its effects on dermal papilla (DP) cells. Antioxidant efficacy was examined by ABTS assay. To confirm the effect on cell activity, MTS assay was performed and cell count was directly measured by hemocytometer. The mRNA expression of genes involved in hair formation and hair loss formation was confirmed by quantitative RT-PCR. CWR has a strong antioxidant activity. Cell viability of DP cells was increased to 118.5% by treatment of 0.5 mg/ml CWR for 24 hours, but the effect on the cell number was insignificant. These results suggest that CWR increases mitochondrial activity without promoting cell proliferation. Treatment of DP cells with 0.5 mg/ml CWR resulted in 48.5% reduction of mRNA expression of type 2 $5{\alpha}$-reductase, a major cause of male hair loss. In addition, mRNA expression of bone morphogenetic pretein (BMP), fibroblast growth factor (FGF)7, and FGF10, which are closely related to hair growth, was also decreased. Reactive oxygen species (ROS) acts as a cause of hair loss. The excellent antioxidant efficacy of CWR is thought to be able to effectively remove ROS. The dihydrotestosterone produced by type 2 $5{\alpha}$-reductase in DP cells is a potent inducer of male pattern hair loss. The inhibitory effect of type 2 $5{\alpha}$-reductase mRNA on DP cells induced by CWR may induce a positive therapeutic effect of male pattern hair loss.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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