We have detected deoxynivalenol(DON) using a metal-oxide-semiconductor field-effect-transistor(MOSFET)-based biosensor. The MOSFET-based biosensor is fabricated by a standard complementary metal-oxide-semiconductor(CMOS) process, and the biosensor's electrical characteristics were investigated. The output of the sensor was stabilized by employing a reference electrode that applies a fixed bias to the gate. Au which has a chemical affinity for thiol was used as the gate metal to immobilize a self-assembled monolayer(SAM) made of 16-mercaptohexadecanoic acid(MHDA). The SAM was used to immobilize anti-deoxynivalenol antibody. The carboxyl group of the SAM was bound to the anti- deoxynivalenol antibody. Anti-deoxynivalenol antibody and deoxynivalenol were bound by an antigen-antibody reaction. In this study, it is confirmed that the MOSFET-based biosensor can detect deoxynivalenol at concentrations as low as 0.1 ${\mu}g$/ml. The measurements were performed in phosphate buffered saline(PBS; pH 7.4) solution. To verify the interaction among the SAM, antibody, and antigen, surface plasmon resonance(SPR) measurements were performed.
Epitope tagging is the process of fusing a set of amino acid residues that are recognized as an antigenic determinant to a protein of interest. Tagging a protein with an epitope facilitates various immunochemical analyses of the tagged protein with a specific monoclonal antibody. The monoclonal antibody H8 has subtype specificity for an epitope derived from the preS2 region of hepatitis B virus surface antigen. Previous studies on serial deletions of the preS2 region indicated that the preS2 epitope was located in amino acid residues 130~142. To test whether the amino acid sequence in this interval is sufficient to confer on proteins the antigenicity recognizable by the antibody H8, the set of amino acid residues in the interval was tagged to the amino terminal of ${\beta}$-galactosidase and to the carboxyl terminal of the truncated $p56^{lck}$ fragment. The tagged ${\beta}$-galactosidase, expressed in Escherichia coli, maintained the enzymatic activity and was immunoprecipitated efficiently with H8. The tagged $p56^{lck}$ fragment, synthesized in an in vitro translation system, was also immunoprecipitated specifically with H8. These results demonstrate that the amino acid sequence of the preS2 region can be used efficiently for the epitope tagging approach.
Since the first umbilical cord blood transplantation (CBT) in 1998, cord blood (CB) has now become one of the most commonly used sources of hematopoietic stem cells for transplantation. CBT has advantages of easy procurement, no risk to donor, low risk of transmitting infections, immediate availability and immune tolerance allowing successful transplantation despite human leukocyte antigen disparity. Several studies have shown that the number of cells transplanted is the most important factor for engraftment in CBT, and it limits the wide use of CB in adult patients. New strategies for facilitating engraftment and reducing transplantation-related mortality are ongoing in the field of CBT and include the use of a reduced-intensity conditioning regimen, double-unit CBT, ex vivo expansion of CB, and co-transplantation of CB and mesenchymal stem cells. Recently, the results of two international studies with large sample sizes showed that CB is an acceptable alternative source of hematopoietic stem cells for adult recipients who lack human leukocyte antigen-matched adult donors. Along with the intensive researches, development in banking process of CB will amplify the use of CB and offer the chance for cure in more patients.
Dendritic cells (DCs) play a significant role in establishing self-tolerance through their ability to present self-antigens to developing T cells in the thymus. DCs are predominantly localized in the medullary region of thymus and present a broad range of self-antigens, which include tissue-restricted antigens expressed and transferred from medullary thymic epithelial cells, circulating antigens directly captured by thymic DCs through coticomedullary junction blood vessels, and peripheral tissue antigens captured and transported by peripheral tissue DCs homing to the thymus. When antigen-presenting DCs make a high affinity interaction with antigen-specific thymocytes, this interaction drives the interacting thymocytes to death, a process often referred to as negative selection, which fundamentally blocks the self-reactive thymocytes from differentiating into mature T cells. Alternatively, the interacting thymocytes differentiate into the regulatory T (Treg) cells, a distinct T cell subset with potent immune suppressive activities. The specific mechanisms by which thymic DCs differentiate Treg cells have been proposed by several laboratories. Here, we review the literatures that elucidate the contribution of thymic DCs to negative selection and Treg cell differentiation, and discusses its potential mechanisms and future directions.
Kim, Juhyung;Kim, Hyung Kyu;Jang, Hye Jeong;Kim, Eunkyung;Kim, Moon Kyu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.4
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pp.547-553
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2015
The yeast surface-displayed cDNA library has been used to identify unknown antigens. However, when unknown target antigens show moderate-to-low abundance, some modifications are needed in the screening process. In this study, a directional random-primed cDNA library was used to increase the number of candidates for the unknown antigen. To avoid the loss of target yeast clones that express proteins at a low frequency in the cDNA library, a comprehensive monitoring system based on magnetic-activated cell sorting, fluorescence-activated cell sorting, and immunofluorescence was established, and a small number of target yeast cells was successfully enriched. These results showed that our optimized method has potential application for identifying rare unknown antigens of the human monoclonal antibody.
Haemophilus parasuis causes contagious porcine Gl$\ddot{a}$sser's disease leading to severe losses in the swine industry. In this study, we established an efficient Escherichia coli-based system for the expression of H. parasuis major outer-membrane protein (MOMP) that has been known as a good vaccine candidate against Gl$\ddot{a}$sser's disease. Use of an E. coli-derived pelB leader sequence made it possible to produce recombinant MOMP (rMOMP) as the soluble forms without an additional refolding process. Using two different animal models, it was evaluated that the rMOMP was capable of inducing a significant immune response and providing protection against H. parasuis infection.
The aim of the study was to clarify the role of gastrokine 1 in the process of formation and development of gastric cancer. The expression of gastrokine 1 in gastric cancer and corresponding non-cancerous gastric tissues of 52 gastric cancer patients was assessed with the real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunohistochemistry. We also analyzed the relationship between the expression level and clinicopathological characteristics. Gastrokine 1 gene and protein expression in gastric cancer tissues was in both cases significantly lower than in corresponding non-cancerous gastric tissues (both P<0.01), but no significant relationship was found with clinicopathological parameters including tumor location, depth of invasion, differentiation, lymph node metastasis, stage, gender, age and carcinoembryonic antigen (CEA), and carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9) level in peripheral blood preoperation of patients (P>0.05, respectively). Furthermore, gastrokine 1 gene expression was markedly lower in gastric cancer tissues of Helicobacter pylori (HP)-positive patients than negative ones (P<0.05). The result of the study showed that gastrokine 1 might play a significant role in the process of formation and development of gastric cancer as an anti-oncogene. Its effect might be weakened by HP infection.
Purpose: In this study, we evaluated unstable serum data of HBe antigen (HBeAg) or HBe antibody (HBeAb) in patients who experienced HBeAg seroconversion. This study have been performed to assist a medical technologist in the recognition of patients who were chronically infected with the hepatitis B virus (HBV). Materials and Methods: A total number of 3 patients were enrolled in this study. All patients experienced HBeAg seroconversion. Serum data of HBeAg and HBeAb were measured by radioimmunoassay. Results: The data of HBeAg or HBeAb showed an unstable change during seroconversion from HBeAg to HBeAb in chronic type B hepatitis (CBH). Conclusions: Serum data of HBeAg or HBeAb can change during HBe seroconversion. These data suggest that patients with HBe seroconversion can experience an unstable oscillation of HBeAg or HBeAb value from positive to negative. Unstable data can appear naturally due to the seroconversion process.
We investigated chemical-wounding effect on Agrobacterium-mediated Chinese cabbage transformation via vacuum infiltration. Pre-germinated or germinating Chinese cabbage seeds were infiltrated with Agrobacterium tumefaciens LBA4404 cells carrying either GUS gene (pBI121) or hepatitis B virus surface antigen DNA (pBIHBsAg). Prior to agroinfiltration process, the seeds were soaked in sodium hydrosulfite (SHS) solution or just in sterile water as a control. Comparative transformation efficiency was determined by both of histochemistry and ELISA. We could demonstrate that SHS solution treatment especially to 1-day or 2-days old germinating seeds efficiently improved transformation process, and therefore, transient expression level. This strongly indicated that Agrobacterium infection could be facilitated indeed by SHS-causing wounds on Chinese cabbage seeds.
This paper suggests that the immune network algorithm based on fuzzy set can effectively be used in tuning of a PID controller for multivariable process or nonlinear process. The artificial immune network always has a new parallel decentralized processing mechanism for various situations, since antibodies communicate to each other among different species of antibodies/B-cells through the stimulation and suppression chains among antibodies that from a large-scaled network. In addition to that, the structure of the network is not fixed, but varies continuously. On the other hand, a number of tuning technologies have been considered for the tuning of a PID controller. As a less common method, the fuzzy and neural network or its combined techniques are applied. However, in the case of the latter, yet, it is not applied in the practical field, in the former, a higher experience and technology is required during tuning procedure. Along with these, this paper used the fuzzy set in order that the stimulation and suppression relationship between antibody and antigen can be more adaptable controlled against the external condition, including noise or disturbance of plant. The immune network based on fuzzy set suggested here is applied for the PID controller tuning of multivariable process with two inputs and one output and is simulated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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