Antigen is substance causing disease derived from pathogen. Living organism has the immune system in terms of defense mechanism against antigen. Antigen is processed through several pathways such as phagocytosis, antibody action, complement activation, and cytotoxins by NK or cytotoxic T lymphocyte via MHC molecule. Lymph node (LN) is comprised of the complicated 3 dimensional network and several stromal cells. Fibroblastic reticular cells (FRC) are distributed in T zone for interaction with T cells. FRC produces the extra cellular matrix (ECM) into LN for ECM reorganization against pathogen infections and secretes homing chemokines. However, it has not so much been known about the involvement of the antigen process of FRC. The present report is for the function of FRC on antigen process. For this, FRC was positioned with several infected situations such as co-culture with macrophage, T cell, lipopolysaccharide (LPS) and TNFα stimulation. When co-culture between FRC with macrophage and T cells was performed, morphological change of FRC was observed and empty space between FRCs was made by morphological change. The matrix metallo-proteinase (MMP) activity was up-regulated by Y27632 and T cells onto FRC. Furthermore, inflammatory cytokine, TNFα regulated the expression of adhesion molecules and MHC I antigen transporter in FRC by gene chip assay. NO production was elevated by FRC monolayer co-cultured with macrophage stimulated by LPS. GFP antigen was up-taken by macrophage co-cultured with FRC. Collectively, it suggests that FRC assists of the facilitation of antigen process and LN stroma is implicated into antigen process pathway.
Yang Mhan-Pyo;Lee Chang-Woo;Kwun Jong-Kuk;Hasegawa Atsuhiko
Journal of Veterinary Clinics
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v.8
no.1
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pp.1-10
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1991
The B-lymphocyte differentiation from committed B-cell progenitors to antibody-secreting cells was discussed. B-cell progenitors derived from hematopoietic stem cells undergo the rearrangement of immunoglobulin(Ig) gene. The earliest cells as B-cell precursors have cytoplasmic Is(${\mu}$ chain). The entire Is molecule is expressed on the surface after synthesis of L chain. The resting B cells(Go stage) stimulated by binding antigen via Ig-receptors are activated(G$_1$ stage) and followed by proliferation(S stage), coupled with further selection(affinity maturation. class switch). The production of antibody against a particular antigen depends on the activation of B cells with surface Is capable of reacting with that antigen. This process does not occur in isolation but is controlled by helper and suppressor T cells and antigen presenting cells(APC). The mechanism of T cell-dependent B-cell response for production of antibody is largely explained by the cell to cell cooperation and soluble helper factors of T cells. 1) The antigen specific B cells and helper T cells are linked by Is-receptors, leading to the delivery of helper signals to the B cells. 2) Helper T cells recognize the processed antigen-derived peptides with the MHC class II molecules(la antigen) and is stimulated to secrete B-cell proliferation and differentiation factors which activate B cells of different antigenic specificity. The two models are shown currently 1) At low antigen concentration, only the antigen-specific B cell binds antigen and presents antigen-derived peptides with la molecules to helper T cells, which are stimulated to secrete cytokines(IL-4, IL-5, etc.) and 2) At high antigen concentration, antigen-derived peptides are presented by specific B cells, by B cells that endocytose the antigens, as well as by APC Cytokines secreted from helper T cells also lead to the activation of B cells and even bystander B cells in the on- vironmment and differentiate them into antibody-secreting plasma cells.
Ho, Chin Woi;Tan, Wen Siang;Chong, Fui Chin;Ling, Tau Chuan;Tey, Beng Ti
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.4
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pp.416-423
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2009
Hepatitis B core antigen(HBcAg) is an important serological marker used in the diagnosis of hepatitis B virus(HBV) infections. In the current study, a fast and efficient preparative purification protocol for truncated HBcAg from Escherichia coli disruptate was developed. The recombinant HBcAg was first captured by anion exchange expanded bed adsorption chromatography integrated with a cell disruption process. This online capture process has shortened the process time and eliminated the "hold-up" period that may be detrimental to the quality of target protein. The eluted product from the expanded bed adsorption chromatography was subsequently purified using size-exclusion chromatography. The results showed that this novel purification protocol achieved a recovery yield of 45.1% with a product purity of 88.2%, which corresponds to a purification factor of 4.5. The recovered HBcAg is still biologically active as shown by ELISA test.
Hemagglutinating antigen of Toxoplasma gondii was prepared and purified by the method of a slight modification of Tsunematsu, and the preparation of the skin test antigen (toxoplasmin) was made by means of acetone-ether treatment described by Nobute et al. With these antigens the passive hemagglutionation and skin tests were performed for the diagnosis of swine toxoplasmosis by using artificially infected pigs. The results obtained were summarized as follows: 1. The hemagglutinating antibody and the skin test antibody were demonstrated one and three weeks after infection, respectively. And these antibodies were maintained over nine weeks after infection. 2. The antigenicity of hemagglutinating antigen was stable when it was kept in frozen state, while was unstable in a liquid state. 3. Freeze-dried skin test antigen (toxoplasmin) was stable for two months or more if it was kept at $5^{\circ}C$ and room temperature, but in the liquid or reconstituted state it was unstable. 4. Freeze-dried skin test antigen could be preserved without loss of antigenicity for more than two months. 5. Passive hemagglutination test could be applied effectively at the early phase of the disease process and skin test at later phase, mainly for epidemiological survey. However, by combiniation of these methods, the more accurate results could be obtained.
Enterotoxigenic E. coli (ETEC) cause an acute diarrhea (white scour) in both animals and humans. The disease process initially involves the adherence and colonization of the mucosal surface of the small intestine, followed by the elaboration of a heat-labile enterotoxin (LT) and/or heat-stable enterotoxin (ST). Intestinal adherence or colonization by ETEC is generally mediated by a specific surface-associated pilus (fimbrial) antigen that endows the bacteria with the capacity to adhere to epitherial cell surface. Fourteen monoclonal antibodies (MAbs) directed against pili antigens of ETEC were obtained by cell fusion/hybridoma technique. They were characterized by indirect immunofluorescence assay (IFA), and divided into four groups: specific to K99 antigen (group 1), cross-reactive with K99 and F41 antigens (group 2), specific to K88 antigen (group 3) and specific to 987P and K88 antigens (group 4), respectively. These MAbs demonstrated the distinct pili (K) antigens on the surface of ETEC by IFA, and could be utilized as diagnostic reagent for the identification of ETEC. When eighty-seven field isolates of E. coli from piglet with diarrhea were tested by group 3 MAb, fourty-two strains (48.3%) has K88 pilus antigen suggesting that this is one of the major pilus antigen of ETEC present in fifeld.
Shin, Young Kee;Choi, Eun Young;Kim, Seok Hyung;Park, Seong Hoe
IMMUNE NETWORK
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v.1
no.1
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pp.1-6
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2001
The identification of tumor-specific antigens has represented a critical milestone in cancer diagnosis and therapy. Clinical research in this area for leukemia has also been driven over the past few decades by the hope that surface antigens with restricted tissue expression would be identified. Disappointingly, only a small number of the leukemic antigens identified to date, meet sufficient criteria to be considered viable immunophenotypic markers. In this paper, we nominate anti-JL1 monoclonal antibody as an immunodiagnostic and immunotherapeutic candidate for leukemia. The JL1 molecule appears to be a novel cell surface antigen, which is strictly confined to a subpopulation of limited stages during the hematopoietic differentiation process. Despite the restricted distribution of the JL1 antigen in normal tissues and cells, anti-JL1 monoclonal antibody specifically recognizes various types of leukemia, irrespective of immunophenotypes. On the basis of these findings, we propose JL1 antigen as a tumor-specific marker, which shows promise as a candidate molecule for diagnosis and immunotherapy in leukemia, and one that spares normal bone marrow stem cells.
To study the replication process of the single-stranded DNA parvovirus KBSH-isolated from normal human cell cultures-in actively dividing embryonic swine kidney cells, amount of the synthesized viral hemagglutination (HA) antigen and the overall rate of viral double-stranded replicative form(RF) DNA synthesis were wxamined. The initiation of viral RF KNA synthesis and the decrease of host DNA synthesis rate in viral infected cells occurred almost same time at 15-16 hour post infection(PI). And the release of viral HA antigen to media followed at 24 hour PI, concurrently the overall rate of viral RF DNA synthesis reaching its maximum. Evidence is presented which indicates that successful performance of viral RF DNA replication requires proteins synthesized in viral infected cells at 10-14 hour PI.
Background: Identification of antigen-specific T cells has yielded valuable information on pathologic process and the disease state. Assays for quantification of inflammatory cytokines or lytic-granule molecules have been generally used to evaluate antigen specific T cell response, however their applicability have been hampered due to the limited source of autologous antigen-presenting target cells (APC). Methods: K562, a leukemic cell line deficient of human leukocyte antigen (HLA), was transfected with a gene encoding HLA-A*02 (K562/ A*02) and its function as stimulator cells in inducing activation of HLA-matched T cells was evaluated by IFN-${\gamma}$ enzyme linked immunospot (ELISPOT) assay. Results: The stable transfectant K562/ A*02 pulsed with HLA- A*02 restricted peptide could specifically induce IFN-${\gamma}$ secretion by CD8+ T cells compared to no detectable secretion by CD4+ T cells. However, CD56+ NK cells secreted IFN-${\gamma}$ in both K562/ A*02 with peptide and without peptide. The number of IFN-${\gamma}$ secreted CD8+ T cells was increased according to the ratio of T cells to K562 and peptide concentration. Formalin-fixed K562/ A*02 showed similar antigen presenting function to live K562/ A*02. Moreover, K562/ A*02 could present antigenicpeptide to not only A*0201 restricted CD8+ T cells but also CD8+ T cells from A*0206 donor. Conclusion: These results suggest that K562/ A*02 could be generally used as target having specificity and negligible background for measuring CD8+ T cell responses and selective use of K562 with responsder matched HLA molecules on its surface as APC may circumvent the limitation of providing HLA-matched autologous target cells.
Purpose: This study carried out the Quality by Design (QbD)6σ process to verify the effectiveness and equivalence of the finished D-antigen quantitative test method, and compared the OFAT-based method validation and test result acceptance criteria with the Analytical Quality by Design (AQbD)-based method validation and test method. This is a study on how to reduce the risk of delay in permit change by increasing the reliability of permit data in the existing method by statistically analyzing the results. Methods: With the QbD6σ process, the effectiveness and equivalence of the D-antigen quantitative test method were verified with the data of the existing test method and the new test method. Results: Method validation tests are performed based on AQbD. Critical Method Parameters are identified through risk assessment, and single/combined actions are verified by designing and performing tests for Critical Method Parameters (analysis of variance, full factorial design method). Method validation can be effectively accomplished with the QbD6σ process. Conclusion: The use of QbD6σ can be used to achieve satisfactory results for both pharmaceutical companies and regulators by using appropriate statistical analytical methods for method validation as required by regulatory agencies.
International Journal of Control, Automation, and Systems
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v.1
no.4
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pp.453-458
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2003
The anomaly-detection algorithm based on negative selection of T cells is representative model among self-recognition methods and it has been applied to computer immune systems in recent years. In immune systems, T cells are produced through both positive and negative selection. Positive selection is the process used to determine a MHC receptor that recognizes self-molecules. Negative selection is the process used to determine an antigen receptor that recognizes antigen, or the nonself cell. In this paper, we propose a novel self-recognition algorithm based on the positive selection of T cells. We indicate the effectiveness of the proposed algorithm by change-detection simulation of some infected data obtained from cell changes and string changes in the self-file. We also compare the self-recognition algorithm based on positive selection with the anomaly-detection algorithm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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