Exo-polysaccharide (BWS) obtained from submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium was fractionated. Antitumor activity of their fractions was investigated in comparison with the mycelial polysaccharide fractions. Eight kinds (BWS-DN, BWS-DA, BWS-DN-GI, BWS- DA-GI, MWS-DN, MWS-DA, MWS-DN-GI and MWS-DA-GI) of polysaccharide fractions were obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel chromatography from BWS and MWS, which were isolated from culture fiuid and mycelial cell, respectively. The anticomplementary activities (ITCH$_{50}$%) of the exo-polysaccharide fractions showing 15% to 30% were lower than those of mycelial polysaccharide fractions showing 15% to 70%. The acidic fractions of BWS-DA and BWS-DA-GI fractionated from BWS, showed the highest activity of 30%. In the MTT assay, BWS-DN and MWS against mouse leukemia L1210 exhibited high inhibition ratio of 86 and 89%, respectively at the concentration of 600 $\mu$g/ml. High inhibition ratio of 50% (IC$_{50}$) was achieved for BWS, BWS-DA and MWS-DA fractions against human colon adenocarcinoma COLO-205 and for BWS-DA, BWS-DN and MWS-DN fractions against human leukemia HL-60 at the concentra- tion of 300 $\mu$g/ml among the six polysaccharide fractions, respectively.
상황버섯 자실체의 열수 및 알칼리 추출다당류에 대한 약리 효과는 다음과 같다. 1. 분자량은 10kD 부근에서 주를 이루고 있었으며, IR은 다당류의 전형적인 peak 흡수대를 나타냈다. 2. 항암 활성과 보체 활성에 있어서는 열수추출 다당류에서 높게 나타났으며, 지질 과산화 저해능은 알칼리 추출 및 열수 추출 분획에서 각각 71.3%와 55.8%의 저해율을 나타내었다. 상기와 같은 결과를 종합하여 볼 때 상황버섯 자실체의 열수 및 알칼리 추출물은 당과 단백질로 구성된 단백 다당류였으며, 열수 추출과 알칼리 추출에 의한 약리활성 정도는 유사한 것으로 조사되었다.
산사추출물의 DPPH free radical 소거법에 의한 항산화활성은 ethyl acetate 분획($RC_{50}=4.39{\mu}g/m{\ell}$), butanol 분획($RC_{50}=6.25{\mu}g/m{\ell}$)에서 강한 항산화 활성을 보였으며, ${\alpha}$-tocopherol이나 BHA보다 유사하거나 강한 항산화 활성을 나타냈다. Linoleic acid에 대한 항지질과산화 활성 실험은 15일 째에 물층을 제외한 추출물, 분획물에서 높은 활성을 나타내었다. 박테리아에 대한 항균실험은 Staphylococcus aureus에서만 활성을 보이지 않았을 뿐 다른 피검균에서는 높은 활성을 보였다. 다만 fungi strain인 Candida albicands에 대해 각각 250 및 $500{\mu}g/m{\ell}$의 생육 억제 농도를 나타내었다. 항보체 활성화능을 측정한 결과, 물 층 18.4%를 제외한 다른 분획물은 10% 이하의낮은 억제효과를 보이거나 활성이 나타나지 않았다. 따라서 산사 추출물은 항산화 활성, 항지질과산화 활성, 항미생물 활성이 우수하였다. 이러한 결과를 바탕으로 산사 추출물을 이용하여 식품 및 음료 등과 같은 기능성 식품으로서의 다양한 산업적 응용분야에 널리 응용될 수 있을 것으로 생각된다.
괴화추출물은 DPPH free radical 소거법에 의한 항산화 활성 실험에서는 ethyl acetate 분획($RC_{50}=3.13{\mu}g/mL$), butanol 분획($RC_{50}=6.25{\mu}g/mL$)에서 강한 항산화 활성을 보였으며, ${\alpha}$-tocopherol이나 BHA보다 유사하거나 강한 항산화 활성을 나타냈다. Linoleic acid에 대한 항지질과산화 활성 실험은 15일째에 물층을 제외한 추출물, 분획물에서 높은 활성을 나타내었다. 박테리아에 대한 항균실험은 Staphylococcus aureus에서만 활성을 보이지 않았을 뿐 다른 피검균에서는 높은 활성을 보였다. 다만, fungi strain인 Candida albicands에 대해 각각 $250{\mu}g/mL$, $500{\mu}g/mL$의 생육 억제 농도를 나타내었다. 항보체 활성화능을 측정한 결과 물층 21%를 제외한 다른 분획물은 10% 이하의 낮은 억제효과를 보이거나 활성이 나타나지 않았다. 따라서 괴화 추출물은 항산화 활성, 항지질과산화 활성, 항미생물 활성이 우수하였다. 이러한 결과를 바탕으로, 괴화 추출물을 이용하여 식품 및 음료 등과 같은 기능성식품으로서의 다양한 산업적 응용분야에 널리 응용될 수 있을 것으로 생각된다.
The chemical properties and physiological activities of the freeze-dried stromata of Cordyceps militaris were examined. A proximate analysis exhibited that the stromata consisted mainly of crude carbohydrate (74.3%), crude protein (11.5%), and moisture content (8.7%), with a low content of crude ash (4.%) and fat (1.3%). The carbohydrate was mostly composed of glucose (88.6%). A large quantity of essential fatty acids, including linolenic acid (33.8%) was also observed. An analysis of the component amino acid showed a relatively high ratio of the essential amino acids, lysine (101.2 mg/g), methionine (62.7 mg/g), and acidic amino acids of glutamic aicd (57.5 mg/g) and aspartic acid (43.9 mg/g), whereas a low of tyrosine content (4.7 mg/g). An examination of the cordycepin content indicated tht the stromata and mycelium-embedded media (silkworm pupae) contained 0.2% and 0.5%, respectively. From the examination of the physiological activities, based on methanol extract (M), ethylacetate extract (EA), and hot-water extract (HW) fractions of the stromata, the hot-water extract (HW) fraction showed the most potent intestinal immune modulating activity, anticoagulant activity, and anticomplementary activity, whereas the ethylacetate extract (EA) fraction exhihited a radical scavenging activity. Therefore, the results from the present study indicate that the stromata of C. militaris contain various healthy chemical ingredients, and that especially boiled water extract of whole body would apprear to provide beneficial physiological activities.
Chemical properties and physiological activities of the freeze-dried synnemata of Beauveria bassiana were examined. A proximate analysis showed that the synnemata consisted mainly of carbohydrate (49.86%), protein 11.36%), and a moisture content of 30.64%. It contained a low amount of crude ash (4.76%) and fat (3.38%). The carbohydrate was composed mainly of mannose (52.3%), galactose (31.5%), glucose (13.2%), and rhamnose (3%). Trace amounts of arabinose, xylose, and fructose were present. Major amino acids In the synnemata were glutamic acid, glycine, aspartic acid, arginine, threonine, alanine, valine, leucine, lysine, and aspartic acid with the amounts of 30.42, 25.22, 17.17, 15.12, 12.65, 15.23, 12.47, 11.47, 14.24, and 17.17 mg/g, respectively. Among extracts from the synnemata, the hot-water extract showed 67% of anticomplementary activity compared to that of the positive control, followed by ethyl acetate extract (17%) and methanol extract (15%). The hot-water extract also had anticoagulant activity with 55 sec of coagulating time and this fraction exhibited the most potent Intestinal immune system modulating activity. The methanol extract showed the highest inhibitory activity (25%) on the 12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate-induced superoxide ($O_2^-$) generation, followed by hot-water extract (18%) and ethyl acetate extract (10%). The data in the present study indicate that the extract of Beauveria bassiana synnemata contains some healthful chemical ingredients and it could provide beneficial physiological activities. These features of the synnemata should be of interest to the food industry as well as other industrial fields.
차가버섯의 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적의 배양조건을 조사하고, 세포내 외 다당체의 항보체 활성과 대식세포의 lysosomal enzyme 활성을 관찰하였다. 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적 pH, 온도, 및 교반속도는 각각 5.5, $25^{\circ}C$, 150 rpm으로 나타났으며, 배양기간은 11일째 최대 균사체 생장(10.89 g/l)과 세포외다당체 생산(1.25 g/l)을 보였다. 항보체 활성은 세포내 외 다당체의 처리 농도가 높을수록 활성이 증가함을 보였고, 대식세포의 lysosomal enzyme 활성은 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 음성대조군에 비해 세포내 다당체는 약 2.2배, 세포외 다당체는 약 2배 정도 증가하였다.
잔나비버섯 자실체로부터 열수추출하여 얻어진 고분자 및 저분자 분획의 이화학적 특성 및 생리활성 대하여 검토하였다. 고분자와 저분자 분획은 당과 단백질 및 소량의 hexosamine을 함유하고 있었다. 구성 당은 주로 glucose, galactose, mannose와 소량의 xylose, fructose, ribose 및 arabinose 등으로 구성되었으며, 아미노산의 경우는 당과 단백질의 결합력에 관여하고 있는 Ser과 Thr를 다량 함유하고 있는 것으로 조사되었다. 고분자 분획의 분자량은 10 kD 부근에서 주를 이루고 있는 것으로 나타났다. 항보체활성은 고분자 분획에서 높았으며, 항체생성능은 대조군에 비해 약간 증가하는 양상을 나타내었다. 탐식능, NO 및 $TNF-{\alpha}$ 생성능은 서로 상관성이 있는 것으로 조사되었다. 효소적 및 비효소적 지질과산화 유발에 대한 영향은 고분자 및 저분자 분획에서 모두 억제능을 나타내었다. 이와 같이 잔나비버섯 자실체로부터 추출한 고분자 및 저분자 분획은 면역활성 및 지질 과산화 억제효과 있는 것으로 조사되었다.
도라지는 약리성분을 많이 함유하고 있으며 식품 및 생약재료로 널리 사용되고 있다. 재배도라지 24년근 및 3년근의 주요성분을 동정하기 위하여 약리성분을 분석하고 비교하였다. 재배도라지의 에탄올 추출물에서는 24년근에서 역상column을 사용한 HPLC분석에서 retention time이 약 50분 이후부터 3년근에는 보이지 않았던 peak가 나타나고 있어 연수에 따라 다수의 약리성 물질이 생성되거나 미량물질이 생성되었다. 재배도라지의 sterol 조성비 및 saponin 함량에서는 24년근과 3년근간에는 별다른 차이가 없었다. 재배도라지 15년근및23년근, 인삼6년근, 더덕3년근 모두 유의성있는 항보체 활성효과는 없었다.
목질진흙버섯 자실체와 배양 균사체의 열수추출 및 열수 추출물의 에탄올, UF처리 분획들에 대한 약리 효과를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Sarcoma 180 암세포 증식 저지율은 자실체 열수 총 분획(Fr. I)보다 비교적 고분자인 다당류 분획(Fr. II, Fr. III, Fr. IV)에서 $80.4{\sim}85.9%$로 높게 나타났다. 면역계에 미치는 영향으로 보체계 활성화는 $10.1{\sim}13.6%$, 대식세포의 NO 생성능은 자실체 및 균사체 모든 분획에서 생성되었으며, $TNF-{\alpha}$생성능은 NO 생성능이 높았던 분획들에서 높은 생성능을 나타내었다. 효소적 및 비효소적 지질과산화 유발에 대한 영향은 목질진흙버섯 자실체와 배양 균사체의 모든 분획에서 지질 과산화 억제능을 나타내었고, 유리기 제거능에 있어서는 농도의존적으로 효과가 있는 것으로 나타났으며, DPPH에 대한 Fr. III의 $SC_{50}$은 $32.0\;{\mu}g/mL$로 조사되었다. 상기와 같은 결과들로부터 목질진흙버섯 자실체와 배양 균사체의 열수추출 및 열수 추출물의 에탄올, UF처리 분획들은 항암활성, 면역활성, 지질 과산화 억제효과 및 유리기 제거능이 있음을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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