We determined the inhibitory activity of the essential oil fraction obtained by steam distillation from the fresh and dried leaves of Perilla frutescens var. acuta against some pathogenic Salmonella and Vibrio spp. The activities of compounds isolated from the essential oils, apiol and myristicin, were also tested and the results were compared with those of the essential oil fraction. The Perilla essential oil fraction and its main components showed significant inhibition against antibiotic-susceptive and antibiotic-resistant strains of the tested Salmonella and Vibrio strains. Synergistic or additive effects were identified by combing the oils with ampicillin by checkerboard-titer tests. We conclude that essential oils from P. frutescens can be useful in the treatment of Salmonella and Vibrio infections and as safe additives to food materials for the prevention of contamination of food by these bacteria. This is especially important because of the rapid increase in antibiotic-resistant strains, which could cause severe symptoms in humans.
Vibrio spp. are aquatic bacteria that are ubiquitous in warm estuarine and marine environments. Especially, V. vulnificus and V. cholerae are currently known to cause potentially fatal infections in humans. This study investigated the distribution and antibiotic resistance of V. vulnificus and V. cholerae isolated from coastal areas of Gyeongsangnam-do in 2022. A total of 252 samples of water, shellfish and coastal sediment were collected from 7 locations along the coast, and 124 samples of fishery products were collected from markets. Among the 252 samples, forty-four V. vulnificus (11.7%) and fourteen V. cholerae non-O1/non-O139 (3.7%), none of which carried the ctx gene, were isolated. Out of the 124 samples, 6 (4.8%) tested positive for V. vulnificus and V. cholerae was not detected. The isolation rates of V. vulnificus and V. cholerae showed a significant correlation with environmental factors such as seawater temperature and salinity. In an antibiotic resistance test, V. vulnificus was susceptible to amikacin, gentamicin, imipenem trimethoprim/sulfamethoxazole, and ciprofloxacin, but resistant to cefoxitin (100.0%), followed by tetracycline (9.1%). Multidrug resistance was also observed. Continuous monitoring of Vibrio pathogens with water temperature and salinity is expected to help reduce the outbreaks, and rational use of antibiotic agents is needed to prevent the accession of antibiotic-resistant microorganisms in aquatic ecosystems.
2019년 11월, 국내의 뱀장어 양식장에서 양식 중이던 뱀장어가 피부궤양 및 피부의 점상출혈 소견을 보이며 지속적으로 폐사하였다. 일련의 폐사는 2019년 11월부터 12월까지 지속되었다. Vibrio 속 균주 1E1-2는 첫 번째 폐사 사례에서 폐사한 뱀장어의 출혈성 복수에서 분리되었고 균주 2A3-1는 두 번째 폐사 사례에서 폐사한 뱀장어의 복수에서 분리되었으며 균주 3K1-2는 세 번째 폐사 사례에서 폐사한 뱀장어의 신장에서 분리되었다. 16S rRNA gene 시퀀스 분석으로, 분리균주 1E1-2와 3K1-2가 V. fluvialis NBRC 103150T와 가장 높은 유사도를 나타내며 V. fluvialis로 동정되었으며, 균주 2A3-1는 V. plantisponsor NBRC103148T와 가장 높은 유사도를 나타내며 V. plantisponsor로 확인되었다. 항생제 감수성 실험 결과로, V. fluvialis 1E1-2는 tetracycline과 chloramphenicol에 대하여 중등도의 감수성을 보였고 trimethoprim-sulfamethoxazole에 대하여 내성을 나타내었다. V. plantisponsor 2A3-1는 ciprofloxacin과 levofloxacin에 대하여 중등도의 감수성을 나타내었고 trimethoprim-sulfamethoxazole에 대하여 내성을 나타내었다. V. fluvialis 3K1-2는 tetracycline에 대하여 중등도의 감수성을 나타내었고 ampicillin과 trimethoprim-sulfamethoxazole에 대하여 내성을 나타내었다. 이는 국내 양식 뱀장어에서의 항생제 내성 비브리오 감염증 사례로, 의미 깊은 보고라고 할 수 있다.
The emergence and spread of antibiotic-resistant bacteria have been increasing with anthropogenic contamination. Understanding the prevalence and distribution of these resistant bacteria in environments is crucial for effectively managing anthropogenic pollutants. Lake Gyeongpo in the Gangwon Province of South Korea is known for its diverse ecological features and human interactions. The lake is exposed to pollutants from nonpoint sources, including urban areas, agricultural practices, and recreational activities, which can introduce antibiotics and foster antibiotic resistance in bacteria. The present study investigates Lake Gyeongpo as a potential reservoir for antibiotic-resistant bacteria in a natural ecosystem. A total of 203 bacterial isolates were collected from six sampling locations in Lake Gyeongpo during May, July, and November 2022. Most isolates were taxonomically identified as Pseudoalteromonas, Bacillus, Shewanella, and Vibrio spp.; their abundance showed a spatiotemporal distribution. An antibiotic susceptibility test was conducted on 75 isolates using the disk diffusion method with six drugs according to the CLSI guideline; 42 isolates were resistant to one or more antibiotics. Among these, 15 isolates were identified as multidrug resistant bacteria. This finding suggests the potential anthropogenic impact on Lake Gyeongpo and provides valuable insights into the dissemination of antibiotic resistance caused by anthropogenic pollutants.
To develop a new effective and safe natural antibiotics and antioxidant the essential oil was extracted from the roots of Anthriscus sylvestris by steam distillation. Its composition was analyzed by GC-MS. The activities of the essential oil fraction and its main components were evaluated against antibiotic-susceptible and -resistant strains of some food-born bacteria. In addition the synergism was examined with this oil combined with antibiotic by checkerboard titer test. The antioxidant activities were determined by in 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazil (DPPH) free radical scavenging activity test and reducing power assay. The essential oil fraction of A. sylvestris revealed significant inhibiting activities against antibiotic-susceptible and -resistant species of Vibrio and Shigella with MICs ranged from 1.00~4.00 mg/ml. It showed synergistic or additive effects when it was combined with amphicillin or trimethoprim/sulfamethoxazole (1 : 9). Additionally, the essential oil fraction of A. sylvestris exhibited significant DPPH free radical scavenging activity and the reducing power.
The antibiotics-resistance profiles of 28 strains of Vibrio parahaemolyticus isolated from seawater were investigated. All of the strains studied were resistant to ampicillin (100%), but susceptible to 12 other antibiotics. The minimum inhibitory concentration (MIC) of V. parahaemolyticus to ampicillin was as high as $1,024-2,048\;{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$. The phenotype of strain 8 changed from ampicillin-resistant to susceptible with an in-frame deletion mutant of VPA0477, a putative ${\beta}$-lactamase gene, and the MIC for ampicillin of the mutant strain was $1{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$. In conclusion, our findings suggest that the VPA0477 gene acts as a ${\beta}$-lactamase in ampicillin-resistant V. parahaemolyticus strains.
이 실험은 제주도내 양식장으로부터 유입수와 방출수의 다제내성(MDR)을 가진 Vibrio 균의 plasmid profiling을 위해 진행하였다. Plasmid profiling을 위해 사용한 다제내성을 가진 균주는 디스크 확산법을 통해 확인하였고, 유입수와 방출수으로부터 각각 150개의 Vibrio 균주를 분리하였다. 모든 다제내성 균주를 대상으로 plasmid profiling을 실시하였으며, 유입수와 비교하여 방출수에서 많은Vibrio 균이 열거되었다(유입수 39%, 방출수 61%). 방출수에서는 neomycin, sulfamethoxazole, amoxicillin 및 oxytetracycline의 내성을 가진 균주가 유의적으로 많은 것으로 확인되었고, 대조적으로 Vibrio 균주는 florfenicol, chloramphenicol, ciprofloxacin 및 nalidixic acid에 더 민감한 것으로 확인이 되었다. 99종의 다제내성 균주(유입수 39종과 방출수 60종) 중에서 총 58종(유입수 38종과 방출수 20종)이 1.7 kb에서 10 kb 이상의 플라스미드를 가지고 있는 것을 확인하였으며 플라스미드 크기마다 19가지의 다른 다제내성 패턴을 보였다. 6종의 유입수와 4종의 방출수에서 다제내성 균주는 특이적인 plasmid profile이 확인되었다. 방출수 샘플은 보다 많은 플라스미드를 가진 다제내성 Vibrio 균주와 다양한 plasmid profile들과 다제내성 패턴을 가지고 있었고 이는 양식장의 저장탱크가 항생제내성 유전자의 저장소 역할을 할 수 있다는 점을 시사한다. 양식장의 방출수에서 plasmid를 가진 다제내성 Vibrio 균주의 존재는 항생제 내성 유전자의 전파에 기여할 수 있으며 이로 인해 인간의 건강을 위협할 수 있다.
This study investigated the role of plasmids and their relationship with the multiple antibiotic resistance of 30 Vibrios sp. isolated from molluscs and crustaceans sampled from the Kerala coastal waters of India. The biochemical identification and antibiotic resistance profiles were determined, followed by the plasmid profiles, conjugation and transformation efficiencies. The results showed a considerable difference in the level of bacterial resistance to various antibiotics; while all 30 strains were found to be MAR Vibrios sp. and their resistance patterns varied. All the strains were resistant to amoxycillin, ampicillin and carbeniciliin. 87% were resistant to rifampicin; 74% to cefuroxime; 67 to streptomycin; 53% to norfloxacin and ciprofloxacin and 47% to furazolidone and nalidixic acid. In addition to their antibiotic resistance, the plasmid DNA of the MAR Vibrios strains isolated from the molluscs and crustaceans was also studied. Nine strains isolated from crustaceans and molluscs were found to harbor 1-3 plasmids with sizes varying from 5. 98 kb to 19. 36 kb. The average transformation efficiency was about $5{\times}10^{-8}$ and the conjugation efficiency varied from $2.1{\times}10^{-3}$ to $10^{-9}$. A further study of antibiotic resistance patterns may be useful to test the extent of drug resistance in seafoods and help to devise a nationwide antibiotic policy.
A tetracycline resistant Vibrio parahaemolyticus, capable of growing on TCBS medium containing tetracycline, was isolated from cultivated fishes. A gene responsible for the tetracycline resistance was cloned from chromosomal DNA of the V. parahaemolyticus strain using Escherichia coli KAM3, which lacks major multi-drug efflux pumps (${\Delta}acrB$) as host cells. The nucleotide sequence and homology analysis revealed an open reading frame (ORF) for tetracycline resistance protein (TetB). In order to characterize the antibiotic resistance of TetB originated from the V. parahaemolyticus strain, the gene was sub cloned into plasmid pSTV28. The resulting plasmid was designated as pSTVTetB and transformated into E. coli KAM3. E. coli KAM3 cells harboring the recombinant plasmid pSTVTetB are able to grow on plates containing tetracycline and oxytetracycline but not doxycycline, indicating that the tetB gene confers the tetracycline- and oxytetracycline-resistance to the host cell.
This study was performed to determine the antibiotic susceptibility profiles of Salmonella spp., coliforms, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Vibrio spp. isolated from broiler carcasses, aquacultured flounders, hamburgers, and lettuce, which are foods consumed in large quantities in Korea. Salmonella spp. and L. monocytogenes were isolated only from broiler carcasses and Salmonella spp. had a high multidrug resistance rate of 61.1%. Meanwhile, coliforms and S. aureus were isolated from all four foods tested in this experiment. The multidrug resistance rate of coliforms from broiler carcasses was 50%, and that of Vibrio spp. from flounders was 71.4%. The resistance to tetracycline, streptomycin, ampicillin or carbenicillin was common regardless of the kind of food or isolate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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