• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권10호
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• pp.1597-1604
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• 2006

To screen for an anti-yeast substance (AYS), many bacteria were isolated from soil and a strain AY2000 was selected. The strain AY2000 was identified as Rahnella aquatilis by morphology, biochemical properties, and 16S r-RNA nucleotide sequence analyses. The strain AY2000 showed anti-yeast activity against Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae, whereas R. aquatilis ATCC33071 as a type strain did not show the activity against the yeasts under the same condition. The growth of yeast cell was significantly inhibited by AYS produced by the strain AY2000, as shown by optical density and MTT assay. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the AYS against S. cerevisiae and C. albicans at $28^{\circ}C\;was\;20{\mu}g/ml\;and\;60{\mu}g/ml$, respectively. The MIC of AYS against hyphae of C. albicans at $37^{\circ}C\;was\;600{\mu}g/ml$. Scanning electron microscopic analysis revealed that yeast cells treated with AYS had an irregular form with a wrinkled and rough surface.

• 미생물학회지
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• 제47권2호
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• pp.163-166
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• 2011

항 진균제의 인체에 대한 부작용을 완화시키는 방법은 부작용이 적은 새로운 항 진균제 개발이나 기존 항 진균제와 혼용하여 상승효과를 나타내는 물질이 필요하다. 이를 위해 Rahnella aquatilis AY2000가 생산하는 항 효모물질은 일종의 단백질성 고분자 물질이란 점에서 기존 항 진균제와 차이가 있다. 이 항 효모물질은 유도기나 대수증식 기에 있는 효모 생육을 억제시켰으며, cell cycle 분석에서 sub-G1기에 속하는 세포수의 증가 없이 세포를 arrest시켰다. 따라서 항 효모물질은 Candida albicans에 정균작용을 나타내었다. 또한 in vitro 실험에서 이 항 효모물질과 itraconazole이나 fluconazole을 병용한 후 fractional inhibitory concentration index 분석을 행한 결과 항 효모활성이 더욱 상승되었다. 결론적으로 이 항 효모물질은 정균 작용을 가질 뿐만 아니라 azole계의 항 진균제와 혼용하면 상승효과를 가짐으로 부작용이 적은 새로운 개념의 항 진균제로 개발할 가치가 있을 것이라고 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제37권4호
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• pp.361-364
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• 2009

AYS(Anti-yeast substance)는 열에 의해 항효모 활성이 쉽게 약화되는 물질로서 trehalose의 사용이 AYS의 열에 대한 불안정성을 어느 정도 극복할 수 있을 것인지를 조사하기 위해 trehalose가 첨가된 AYS와 trehalose가 첨가되지 않은 AYS에 대한 항효모 활성을 비교 측정하였다. 그 결과 trehalose가 첨가된 AYS는 고온($50-70^{\circ}C$)에서 단시간(2 hr) 동안 열처리한 경우에 trehalose가 함유되지 않은 AYS에 비해 그 활성이 비교적 잘 유지되었다. 따라서 trehalose를 AYS에 첨가하면 열처리 후에도 AYS의 항효모 활성을 다소 보호할 수 있다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권4호
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• pp.285-290
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• 2008

Rahnella aquatilis AY2000 균주는 항효모성 물질(AYS)을 생산하지만, AYS가 저장 중에 활성이 감소되는 경향이 있었다. 따라서 본 연구에서는 AYS활성이 저하되는 원인을 알아보기 위하여 AYS에 다양한 이화학적인 처리를 행하였다. 그 결과 열처리가 AYS의 활성을 감소시키는 하나의 인자이며, AYS를 침전시키는 유기용매인 methanol의 사용 또한 AYS의 활성을 감소시키는 원인이었다. 또한 $\beta$-mercaptoethanol 과 dithiothreitol 등 thiol화합물 역시 AYS의 활성을 감소시키는 인자로 작용하였으나, pH, EDTA나 NaCl은 AYS의 활성저하를 가져오지 않았다. 한편, 정제과정에서 AYS의 조성분 중 다당류와 미지의 물질(230 nm)을 DEAE-cellulose 이온교환수지로 분리시키면 AYS의 활성이 완전히 소실되지만, AYS를 Sephacryl S-400 gel 여과를 행하여 이들 성분이 분리되지 않은 상태에서는 그 활성이 잘 유지되었다. 본 실험에 사용된 AYS의 MIC는 S. cerevisiae 대해 $7.8-15.6{\mu}g/mL$ 범위로 측정된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제33권2호
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• pp.90-95
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• 2005

An Actinomycetes producing an anti-VRSA (vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) substance was isolated from soil. The cultural, morphological, physiological and phylogenetic analyses of an isolated strain were investigated for identification. Cultural characteristics based on ISP (International Streptomyces Project) were as follows: white aerial mycelium, yellow reverse side, and good growth on various medium. Also, the isolate did not produce the soluble pigment. Morphological characteristics were showed cylindrical spore chain and smooth spore surface by SEM (Scanning Electron Microscope). Physiological characteristics were showed LL-type by DAP isomer analysis and detected glycine, glutamic acid and alanine. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA provided a clue that the isolated strain was actually a member of the genus Streptomyces, because the determined sequence exhibited a higher homology with Streptomyces echinatus. The isolate was identified to be a genus of Streptomyces sp.. The optimal culture conditions for the maximum production of anti-VRSA substance by Streptomyces sp. were attained in a culture medium composed of $2.0\%$ (w/v) glucose, and $0.4\%$ (w/v) yeast extract. The anti-VRSA substance was highly produced after 5 days of culture. Optimal pH and temperature conditions for the production of anti-VRSA substance were pH 7.0 and $28^{\circ}C$, respectively.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제3권1호
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• pp.52-63
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• 2000

Non-specific reaction has been a problem in doing, especially, research and diagnosis for infectious agents. Avidin-biotin-peroxidase complex (ABC) techniques has widely been used to amplify a reaction. Photobacterium damse1a subsp. piscicdia (formerly Pasteurella piscicida) exhibited a capacity to bind with streptavidin non-specifically. The band, estimated 26 K Da in Western blotted paper, was blocked with biotin but incompletely. In an attempt to explore an involvement of the non-specific substance in attaching piscine cells, cell attachment test performed using anti- Ph. d. subsp piscicida sera raised mouse and rabbit exhibited slightly blocking effects for Mediterranean (1736) and significantly for Japanese (Sp 92144) isolate. Biotin decreased the attachment ability significantly for Sp92144 but it was not effective to 1736. Both isolates showed greatly enhanced attachment ability with poly-L-lysin. The non-specific binding substance was contained in bacterial extracellular products (ECPs). The substance was able to purified with 2-imminobiotin affinity column, the purified substance appeared to have 4 bands in silver staining, and had a carbohydrate branch. This purified substance showed cytotoxic effects selectively between 5 piscine cell lines. Moreover, it stimulated rainbow trout macrophage in terms of reduction of cytochrome cas well as yeast phagocytosis, significantly.

• 동의생리병리학회지
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• 제24권2호
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• pp.258-265
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• 2010

Atopic dermatitis (AD) is a chronically relapsing pruritic inflammatory skin disease. To find new anti-inflammatory products for skin inflammatory disease such as AD and contact dermatitis, we produced the effective microorganism fermentation substance (EM-S) by fermentation of medicinal plants with effective microorganisms including photosynthetic bacteria, lactic acid bacteria and yeast, screened the effects of EM-S on NC/Nga model mice. Murine AD-like skin lesions were made by painting Dermatophagoides farinae (Df) extract. Topically applied EM-S significantly reduced clinical severity score, ear thickness and histological grade in AD-like NC/Nga mouse model by Df antigen sensitization. In addition, the serum IgE and Th2 chemokine levels (TARC/CCL17, MDC/CCL22 and CTACK/CCL27) were significantly reduced by EM-S. Futhermore, skin tissue expressions of Th2 chemokines were significantly reduced by EM-S. These results demonstrate that topical application of EM-S may be improve the AD-like skin lesion by suppressing IgE and Th2 chemokines.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권3호
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• pp.215-220
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• 2008

본인 등이 분리한 Rahnella aquatilis AY2000균주는 S. cerevisiae나 C. albicans에 대한 항효모 작용이 있다. 그러나, AY2000균주는 한천이 함유된 고체배지에 배양하면 항효모 작용을 항상 관찰할 수 있었으나, 액체배양에서는 AYS의 활성이 불안정하여, AYS의 생산과 저장 동안에 그 활성이 소실되곤 하였다. 따라서 AY2000균주가 액체배양에서 안정된 AYS를 생산하도록 배지조성의 변화와 배양조건을 검토하기 위해 항효모 활성을 중심으로 실험을 행하였다. 그 결과 AY2000균주를 YM배지에 배양시킨 AYS의 MIC는 $23.5{\mu}g/mL$이었으나, MYCS배지에 AY2000균주를 배양시킨 AYS의 S. cerevisiae에 대한 MIC는 $15.6{\mu}g/mL$였다. 또한 AY2000균주를 MYCS배지를 사용하여 배양온도에 따라 항효모 활성을 측정한 결과 $25^{\circ}C$와 MYCS배지의 초기pH를 5.5로 조정하였을 때 MIC는 $15.6{\mu}g/mL$ 유지되었으나, 그외에는 항효모 활성이 약화되었다. MYCS배지에서 탄소원으로 포도당이나 설탕을 사용하면 MIC가 $15.5{\mu}g/mL$ 다른 탄소원에 비해 항효모 활성이 강하였다. 또한 MYCS배지에 사용된 질소원으로 $NH_4$-citrate는 농도가 증가 될 수록 AYS의 항효모 활성이 저하되었으며 오히려 $NH_4$-citrate를 배지에서 제거하는 편이 항효모 활성이 양호하였다. 반면에 금속이온으로 $FeCl_3$를 $NH_4$-citrate가 제외된 MYCS배지에 $100{\mu}M$을 첨가하여 AY2000균주를 배양하면 AYS의 S. cerevisiae에 대한 MIC는 $7.8{\mu}g/mL$. 강한 항효모 활성을 나타내었다. 또한 AY2000균주는 $NH_4$-citrate가 제거되고 $100{\mu}M$ $FeCl_3$를 첨가한 MYCS배지(pH 5.5)에서 배양하면 12-24시간 동안에는 MIC가 $7.8{\mu}g/mL$을 유지하였으나, 그 후 48-60시간 동안에는 MIC가 $31.3{\mu}g/mL$로 항효모 활성이 감소되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제42권3호
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• pp.312-315
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• 2014

인체 면역증강제로 활용 가능성을 조사하기 위해 R. aquatilis AY2000 균이 생산하는 당단백질인 AYS의 면역세포에 대한 독성과 면역증강 효과를 조사하였다. 그 결과 AYS는 적혈구에 대한 용혈작용과 hPBMC에 대한 증식 또는 사멸효과는 나타내지 않았으나, 배양 중인 hPBMC를 응집시키는 효과를 나타내었다. 또한 AYS는 in vitro에서 hPBMC에 작용하여 염증성 cytokine인 IL-6, IFN-${\gamma}$, TNF-${\alpha}$와 IL-5 생성을 유도하였고, 생쥐에서 AYS는 alum에 비해 항-BSA의 생산력을 더욱 증가시켰다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권3호
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• pp.379-382
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• 2013

Rhanella aquatilis AY2000 균주가 생산하는 일종의 당단백질인 항효모성 물질 (AYS)에 대한 항암활성을 조사하기 위해 in vitro에서 암세포에 대한 AYS의 세포독성을 조사하였다. 그 결과 AYS는 인체의 Jurkat T 세포와 마우스의 sarcoma 180 세포에 대해서는 세포독성을 나타내지 않았으나, 인체 대장암세포인 colon cancer TH20 세포에는 세포독성을 나타내었다. 또한 이 AYS는 62.5에서 500 ${\mu}g/ml$까지 농도의존적으로 인체대장암세포에 대해 세포독성을 증가시켰다. 뿐만 아니라 이 AYS와 시판 항암제를 혼합하여 처리한 결과 시판 항암제를 단독으로 처리한 것 보다 인체대장암세포에 대한 항암효과가 더욱 상승되었다.