• BMB Reports
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• 제38권3호
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• pp.294-299
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• 2005

In this report, we describe the high-yield secretory expression of the recombinant human anti-HBsAg Fab fragment from Pichia pastoris that was achieved by co-integration of the genes encoding the heavy and light chains (both under the control of alcohol oxidase promoter) into the genome of the yeast cells. The fed-batch fermentations were carried out in a 5 L scale. Both chains of the Fab were successfully expressed upon methanol induction. The absorbance ($OD_{600}$) of the broth can reach 350~500 at the end of fed-batch phase. After the induction, the expression level of the recombinant Fab (soluble) reached 420~458 mg/L. The recombinant Fab fragment was purified from the crude culture supernatant by ion exchange chromatography and the purity of the recombinant Fab fragment was over 95%. The affinity activities of the crude fermentation supernatant and the purified Fab were analyzed by indirect ELISA, which showed that the purified recombinant Fab fragment had high affinity activity with hepatitis B surface antigen.

• 대한핵의학회:학술대회논문집
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• 대한핵의학회 1999년도 제38차 추계학술대회
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• pp.26.2-26.2
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• 1999

• KSBB Journal
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• 제17권1호
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• pp.20-25
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• 2002

We performed a basic experiment for rapid, on-line, real-time measurement of HBsAg by using a surface plasmon resonance biosensor to quantify the recognition and interaction of biomolecules. We immobilized the anti-HBsAg polyclonal antibody to the dextran layer on a CM5 chip surface which was pre-activated by N-hydroxysuccinimide for amine coupling. The binding of the HBsAg to the immobilized antibody was measured by the mass increase detected by the change in the SPR signal. The binding characteristics between HBsAg and its antibody followed typical monolayer adsorption isotherm. When the entire immobilized antibody was interacted, there was no additional, non-specific binding observed, which suggested the biointeraction was very specific as expected and independent of the ligand density. No significant steric hindrance was observed at 17.6 nm/$mm^2$ immobilization density. The relationship between the HBsAg concentration in the sample solution and the antigen bound to the chip surface was linear up to ca. $40\mu\textrm{g}$/mL, which is much wider than that of the ELISA method. It appeared the antigen-antibody binding was increased as the immobilized ligand density increased, but verification is warranted. This study showed the potential of this biosensor-based method as a rapid, simple, multi-sample, on-line assay. Once properly validated, it can serve as a more powerful method for HBsAg quantification replacing the current ELISA method.

• Journal of Preventive Medicine and Public Health
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• 제21권2호
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• pp.329-339
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• 1988

간기능에 대한 음주와 흡연의 영향을 보기 위해서 1986년 12월 25일부터 1987년 4월 30일까지 약 4개월에 걸쳐 대구의료원을 찾은 채용신체검사 수검자들 중에서 AST 및 ALT 활성도검사, 간염 항원 항체검사, 간디스토마 피내반응검사를 실시한 900명의 검사성적과 설문지를 분석하여 AST 및 ALT 이상자율을 비교검토 하였다. AST 및 ALT 이상자율을 유해인자 수별로 보면 간기능 유해요인수의 증가에 따라 이상자율이 높았다. 특히 HBs-Ag, 음주 및 흡연의 상호복합작용에 있어서 AST 및 ALT 이상자율이 높았다. 단일 음주군, 흡연군에 대한 연령에 따른 AST 및 ALT 이상자율은 유의한 상관성이 없었고, 30대에서 다소 이상자율이 높게 나타났다. 단일 음주군의 AST 및 ALT 이상자율은 음주기간이 길 수록, 음주량이 많을 수록, 음주빈도가 잦을 수록 증가하는 경향을 보였다. 다만, 막걸리와 소량의 맥주 음주자에게서는 이상자가 없었다. 단일 흡연군의 전이효소 활성치 이상자율도 흡연기간이 길 수록, 일일 흡연량이 많을 수록 증가하는 경향이었다. 음주 및 흡연군에 대한 AST 및 ALT의 이상자율은 변량상관행렬에서 음주와 흡연기간이 길수록, 흡연량 및 나이가 많을수록 높았으며, 다중회귀분석결과는 음주기간, 음주량 및 음주빈도와는 유의한 상관성을 보였으나, 흡연량, 흡연기간과는 유의한 상관성이 없었다. AST 및 ALT의 이상율에 대한 이들 선택된 변수들은 13.0%의 설명력을 가지고 있다.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제5권5호
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• pp.362-365
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• 2000

A rapid immunochromatographic assay kit using whole blood to screen hepatitis B surface antigen was developed and evaluated by using sera from 240 patients. The reference diagnosis was based on the results obtained with GENEDIA Anti-HBs Rapid kit which is very similar to the above kit except for the use of serum. The test demonstrated a good correlation with the reference immunochromatographic assay kit, that is, the sensitivity and the specificity of the kit was 100%, respectively. The rapid test kit using whole blood should be more convenient and useful for the diagnosis of hepatitis B virus because the kit does not need machines and time to prepare serum. In addition, this kit is safe from inadvertent infection during sample treatment because the blood is sterilized with hydrogen peroxide, eliminates the procedure required to prepare serum and reduces the possibility of exposure to infectious agents.

• Journal of Preventive Medicine and Public Health
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• 제27권4호
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• pp.747-761
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• 1994

Workers' periodic health examination is the main tools used to manage the health problems of most workers in Korea. The most common health problem found in workers' periodic health examination is liver disorder. Liver disorder is also one of the most common health problems in general population and one of the leading causes of mortality in adult population. Regulation proposed by government (No. 207, Ministry of Labor, 1992) defines the criteria for selection of workers with the liver dysfunction for further evaluative examination and the examination items used for diagnosis of the workers with liver dysfunction. This study was designed to evaluate the proficiency of each examination items presently defined in Regulation and propose the optimal examination items for detection of the liver disorders found by workers' periodic health examination. Study subjects are 186 workers with abnormal liver function tests in screening examination of workers' periodic health examination. Questionnaire survey including past history of liver disorder, drinking history, height and weight was done. Physical examination by physician, routine test items defined by Regulation (SGOT, SGPT, $\gamma$-GTP, protein, albumin, total and direct bilirubin, alkaline phosphatase, $\alpha$-feto protein, HBsAg and anti-HBs), anti-HCV antibody test and liver ultrasonography were done. Results are as follows; 1. Result of evaluative examination utilizing only the items defined in Regulation was; There were 75 workers with suspected live. disorder(40.3%), 63 with no liver dysfunction (33.9%), 13 with suspected hepatitis B(7.0%), 10 workers with hepatitis B(5.4%), 10 workers with hepatitis B carrier state(5.4%), 10 with alcoholic liver disorders(5.4%), 5 with fatty liver(2.7%). When alternative diagnostic criteria applying additional examination items (drinking history, body mass index, anti-HCV antibody and ultrasonography) diagnosability of liver disorder was increased. When all four items were included, final results were; 23 workers (17.8%) with hepatitis B (10 carriers, 13 suspects and 10 hepatitis B), 10 (5.4%) with hepatitis C(4 carriers, 5 suspects and 1 hepatitis C), 13(7.0%) with alcoholic liver disorder, 45(24.2%) with fatty liver (40 suspects, 5 fatty liver), 410%) with suspected liver disorders and 44 (23.7%) with normal liver. 2. Of examination items defined by Regulation, only SGOT, SGPT, $\gamma$-GTP and HBsAg were significantly different in abnormal rate and mean value, and all other laboratory findings did not showed significant difference between two groups. Drinking history, body mass index and anti-HCV antibody test which are the items that authors included in this study, also showed significant difference between two groups. Utilization of body mass index (BMI) for abnormal liver function group in diagnosis of fatty liver had high specificity (97.6%) but sensitivity (22.3%) was low. Therefore we suggest that SGOT, SGPT, $\gamma$-GTP, HBsAg, alcohol drinking history, BMI and anti-HCV Ab were useful for diagnosis of liver disorders among worker's periodic health examination.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제11권1호
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• pp.73-80
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• 2004

목 적 : 소아 HBV 만성 감염 환자들에 대한 연속적인 임상적 소견, 생화학 검사 및 혈청학적 표지자의 변화를 분석하여 이들간의 연관성을 알아보았다. 방 법 : 1995년 7월 1일부터 2000년 6월 30일까지 5년간 가톨릭대학교 성빈센트병원 소아과를 방문하여 6개월 이상 추적이 가능하였던 HBV 만성감염 소아 90명을 대상으로 하였다. 이들 모두는 HBV 표지자인 HBsAg, anti-HBs, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgG와 간기능 검사를 시행하였다. 결 과 : 첫 내원시 대상 모두가 무증상이었고 HBV 만성 감염의 가족력이 83%에서 있었다. HBeAg 양성이 81%, HBeAg 음성, anti-HBe 양성이 16%, HBeAg, anti-HBe 모두 음성인 경우가 3%로 성별간의 차이는 없었고, 대상군의 연령을 0~5, 6~10, 11~15세로 나누었을 때 HBeAg 양성은 각각 90%, 96%, 61%로 10세 이하의 양성률이 11~15세에 비해 의미있게 높았다(P=0.001). 혈청 ALT치는 40 IU/L 이하, 41~80 IU/L, 81~200 IU/L, 201 IU 이상인 경우가 각각 64%, 17%, 10%, 9%이었고 HBeAg 양성군이 음성군에 비해 ALT의 비정상인 경우가 의미있게 많았다(P=0.036). HBeAg에서 anti-HBe로 전환된 경우가 73명 중 11명에서 발생하였고 이들 모두에서 anti-HBe의 전환 전에 ALT치의 증가가 관찰되었다. HBeAg 및 HBsAg의 연간 자연소실율은 각각 9.7%, 0.6%이었다. 결 론 : HBV 표지자 및 생화학적 검사치의 변화양상을 숙지하는 것은 이와 관련된 연구를 시행할 때 대상을 선정하고 또한 질환에 대한 치료 여부, 치료제의 선택 및 효과를 검토할 때 필요한 사항이며 각 개인의 HBV 만성 감염의 악화 예후인자를 찾기 위하여 증상이 없더라도 보유자에 대한 계속적인 관찰은 매우 중요하다고 생각된다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제13권2호
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• pp.272-278
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• 1996

B형 간염 표면항원(HBsAg)의 4가지 주요 아형 조사를 통해 HBsAg과 B형 간염표면항체가 모두 양성인 환자에서 항원과 항체의 아형이 다름을 밝힘으로 항원-항체 공존을 이해하게 되었으며, 감염경로를 추적하는 역학적 조사, 인구이동양상의 지표에 유용하게 사용될 수 있다. 현재까지 우리나라의 HBV 아형에 관한 연구는 전체적인 빈도의 조사나 HBsAg과 anti-HBs가 공존하는 경우에서 아형이 가지는 의미에 대한 것이 전부였다. 본 연구에서는 영남대학교 의과대학 부속병원에서 만성 간질환으로 진단받고 경과추적중인 HBsAg 양성인 환자 214명을 대상으로 혈청에 존재하는 HBsAg 아형을 단세포군 항체를 이용한 혈청학적 방법으로 조사하였다. 214명의 검체중 206명(93.9%)에서 adr, 6명(2.8%)에서 adw, 2명(0.9%)에서 ayr, 2명(0.9%)에서 ar, 3명(1.4%)에서 adwr로 나타났으며 ayw는 한 례에서도 발견되지 않았다. 아형과 질환의 중증도 사이에는 유의한 연관성은 발견되지 않았다. 결론적으로 만성 간질환 환자에서 adr이 가장 많고 질환의 중증도와 아형간에 유의한 연관성은 발견되지 않았지만, 아형이 만성 B형 바이러스 간염의 간경변증이나 간세포암으로의 진행과 예후에 영향을 미치는지 밝히기 위해서는 좀 더 연구를 진행하여야 할 것이다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
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• 제6권2호
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• pp.140-151
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• 2003

목 적: 소아 만성 B형간염의 치료제로 interferonalpha(IFN)가 널리 이용되어 왔으며 약 30~40%에서 치료효과가 나타나는 것으로 보고되어 왔다. 그러나 우리나라에서 소아를 대상으로 IFN 치료를 시행한 후 장기 추적관찰을 통한 연구는 충분히 이루어지지 않은 상태로, 본 연구에서는 소아 만성 B형간염에서의 IFN 치료 효과와 그에 영향을 미치는 요인들을 장기 추적하여 분석하고자 하였다. 방 법: 1982년 5월부터 2002년 7월까지 약 20년 동안 연세의대 세브란스병원 소아과에 내원하여 HBsAg, HBeAg 및 HBV-DNA가 6개월 이상 양성 소견을 보여 만성 B형간염으로 진단받은 환아 378 명 중 IFN 치료를 시행받은 113명을 대상으로 하였으며, 남녀 비는 2.3 : 1이었고, 진단 당시의 평균 연령은 $11.1{\pm}4.1$세이었다. IFN은 300만 unit를 주 3회 근육 주사하였으며, 주기적으로 외래에서 B형 간염 표지자와 간기능검사를 시행하였다. 치료받은 환아는 4~114개월($48.1{\pm}33.4$개월) 동안 추적 관찰하였으며, IFN 치료 후 재발한 경우는 lamivudine 또는 IFN 재치료를 시행하였다. 결 과: IFN 치료에 대한 반응은 HBeAg과 HBV-DNA의 음전 및 ALT값의 정상화로 정의하였으며 반응군은 82례(72.6%), 비반응군은 32례(28.3%)로 두 군 간에 임상적으로 유의한 차이는 없었다. IFN 치료 후 HBeAg은 총 113례 중 87례(77%)에서 음전 되었고, anti-HBe는 79례(70%)에서 양전, HBV-DNA는 84례(74.3%)에서 음전되었다. HBeAg, HBV-DNA 모두 음전 된 환아는 82례(72.6%), HBV-DNA 만 음전된 환아는 2례(1.8%)였으며, HBeAg만 음전된 환아는 5례(4.4%)였다. HBsAg은 6례(5.3%)에서 음전, anti-HBs는 11례(9.7%)에서 양전되었다. ALT 값은 91례(80.5)에서 정상화되었다. IFN 치료 후 HBeAg 및 anti-HBe, HBV-DNA, HBsAg 및 anti-HBs의 음전 및 양전이 일어나는 기간을 생명표를 이용하여 통계 분석한 결과 HBeAg의 5년 음전율은 78%, 10년 음전율은 90%로 최고조를 보였으며, anti-HBe는 5년 양전율이 77%, 10년 양전율이 84%로 최고조를 보였다. 또한 치료 후 HBV-DNA의 5년 음전율은 80%였고, 10년 음전율은 88%로 최고조를 이루었다. 또한 HBsAg의 음전율과 anti-HBs 의 양전율은 5년 후 각각 6.7% 및 13%로 최고조를 이룬 후 계속 추적 관찰하는 동안 변화가 없었다. IFN 치료 후 HBeAg의 음전 및 anti-HBe의 양전은 각각 평균 $14.1{\pm}17.0$개월 및 $16.1{\pm}17.7$개월 걸렸고, HBV-DNA의 음전은 평균 $14.2{\pm}14.1$개월이 소요되었다. HBsAg은 단지 5%의 환아에서만 음전되었으며 평균 $14.2{\pm}12.1$개월이 걸렸다. 치료 후 혈청 ALT값이 정상화 되는 데는 평균 $11.1{\pm}14.4$개월이 걸렸다. 시간의 경과에 따른 치료 전 혈청 ALT값, HBV-DNA값, 치료 전 환아의 연령이 B형 간염 표지자의 반응에 미치는 영향을 Cox model로 분석한 결과, 치료 전 ALT값이 높을수록 HBV-DNA가 통계학적으로 가장 의미 있게 음전되었다(p=0.027). HBeAg과 anti-HBe는 통계학적으로 의미는 없었으나 치료 전 혈청 ALT값이 높을수록 음전(p=0.18) 및 양전(p=0.079)이 증가되는 경향을 보였다. 기타 치료 전 혈청 HBV-DNA값과 연령은 B형간염 표지자의 반응에 미치는 영향은 통계학적으로 의미가 없었다. IFN 치료 후 총 82례의 반응군 중 11례(13.4%)에서 재발하였다. 이중 3례에서 lamivudine 치료를 시행하였으며, 2례에서 치료에 반응하였다. 3례에서는 IFN를 재치료하여 이 중 1례에서 치료 효과가 있었으며, 나머지 3례는 특별한 치료 없이 표지자들이 혈청변환(seroconversion)되었다. IFN 치료에 반응을 보이지 않거나 재발된 총 9례에서 lamivudine 치료를 시행하였으며, 이 중 3례(33%)에서 혈청변환이 있었다. 결 론: 소아 만성 B형간염에 대한 IFN의 치료효과를 10년간 장기 추적한 결과 B형간염 표지자의 혈청 변환율이 72.6%로 높은 치료 반응률을 보이고, 또한 재발률이 13.4%로 비교적 낮은 훌륭한 치료제로 확인되었다. 그러나 HBsAg 음전율은 5.3%에 불과하기 때문에 향후 IFN 치료가 소아 만성 B형간염의 간질환 합병증, 간세포암 발생률 및 생존율에 미치는 영향에 대한 장기적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
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• 제23권4호
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• pp.311-318
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• 2020

Chronic hepatitis B viral (HBV) infection remains a major health threat, especially in high-prevalence areas. Most infants infected by mother-to-infant HBV transmission become chronic carriers. In Taiwan, many important preventive interventions have been implemented to block the perinatal transmission of HBV in the past 35 years. The first nationwide universal HBV vaccination program was launched in Taiwan in July 1984. The three-dose HBV vaccine completion rate reached 98.1% in 2018. The prevalence of Hepatitis B surface antigen (HBsAg) decreased from 9.8% in pre-vaccinated period in 1984 to 0.5% in the vaccinated cohort in 2014. The incidence of hepatocellular carcinoma in children aged 6-9 years significantly declined from 0.52 to 0.13 per 100,000 children born before and after 1984, respectively. Furthermore, we have performed a maternal HBV screening program during pregnancy since 1984, with the screening rate peaked at 93% in 2012. The HBsAg- and HBeAg-seropositive rate in pregnant women declined from 13.4% and 6.4% in 1984-1985 to 5.9% and 1.0% in 2016, respectively. To closely control perinatal HBV infection, we have administered hepatitis B immunoglobulin immediately after birth and checked the serum level of HBsAg and anti-HBs in high-risk babies born to HBsAg-seropositive mothers, irrespective of their HBeAg status, since July 2019. We have also adopted short-term antiviral treatments such as tenofovir 300 mg daily in the third trimester for highly viremic mothers and reduced the perinatal infection rates from 10.7 to 1.5%. Through all these efforts, we expect to meet the global goal of eliminating HBV infection by 2030.