The present study was carried out to investigate the effects of EGF and anti-EGF on early embryonic development and hatching in mice. Developmental and hatching rates of mouse em-bryos from 2-cell to morular stage which were cultured in Ham's FlO medium supplemented with EGF (1-1,000 ng/ml) or anti-EGF (whole serum diluted from 1:10 to 1:1,000) were compared to those of control When mouse early 2-cell embryos were cultured in the EGF supplemented medium, blastulation was accelerated compared with control. Hatching rate was also significantly (p
Growth factors (GFs) produced by the embryo or by the maternal reproductive tract have been reported to regulate the embryonic development and differentiation. Among GFs, EGF as a mitogen plays a role in mitosis and functional differentiation of trophectoderm cells in mouse. The present study was carried out to investigate the effect of EGF on development of mouse embryos and to localize EGF in the mouse oocytes and embryos, which has been reported to be detected in the reproductive tract in mammals. To investigate the effect of EGF on the development of the embryo, mouse 2-cell embryos were cultured to blastocysts stage in Ham's F10 medium, treated with EGF(10-50 ng/ml) for 72 hrs. Immunocytochemistry was performed from oocyte to blastocyst stage with anti-EGF and anti-Mouse IgG, in order to determine the stage which EGF would be expressed in mouse. Exogenous EGF (more than 10 ng/ml) in the culture medium improved the developmental and hatching rates in the mouse embryos. As a result of immunocytochemistry, the embryonic EGF was expressed after the late 4-cell stage. EGF is thought to enhance preimplantation embryonic development and hatching. Exogenous EGF in the culture medium is thought to activate EGF receptor in the late 4-cell embryos and to enhance blastulation and hatching in mouse embryos. It is concluded that EGF enhances the developmental and hatching rates in the mouse embryos.
Kim, E.Y.;Kim, M.K.;Yoon, S.H.;Park, S.P.;Chung, K.S.;Lim, J.H.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.24
no.1
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pp.21-26
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1997
This study was undertaken to examine the expression of EGF-R protein on ICM obtained from mouse IVF/IVC blastocyst by immunosurgery and indirect immunofluorescence(IIF). ICM cells used for this experiment were obtained from immunosurgery of mouse blatstocysts produced at 96 h after IVF, and recovered ICMs were assayed for cell viability and expression of EGF-R. The results obtained in this experiment were summarized as follows: when blastocysts were exposed to rabbit anti-mouse serum (antiserum) for 15-30 min. and then transferred them to guinea pig serum (complement) for 15-60 min., recovery rates of isolated ICMs were 8.0-84.2%. Especially, the best recovery (84.2%) of ICMs was obtained when exposure time to antiserum and complement was 30 min. and 60 min., respectively. In addition, when viability of isolated ICMs after immunosurgery was assessed by live/dead staining method, in all groups viability (93.8-100.0%) of isolated ICMs were not damaged if separated from TE cell. Also, we detected the expression of EGF-R on ICM cell by IIF. Therefore, these results suggest that EGF-R expression on the ICMs can stimulate the higher usablity of exogenous EGF to improve the preimplantation embryo development in vitro.
Thioredoxin (TRX) protein is an antioxidant responsible for reducing other proteins by exchanging cysteine thiol-disulfide and is also known for its anti-allergic and anti-aging properties. On the other hand, epidermal growth factor (EGF) is an important material used in the cosmetics industry and an essential protein necessary for dermal wound healing facilitated by the proliferation and migration of keratinocytes. EGF also assists in the formation of granulation tissues and stimulates the motility of fibroblasts. Hence, genetically modified soybeans were developed to overexpress these industrially important proteins for mass production. A single-dose oral-toxicity-based study was conducted to evaluate the potential toxic effects of TRX and EGF proteins, as safety assessments are necessary for the commercial use of seed-specific protein-expressing transgenic soybeans. To achieve this rationale, TRX and EGF proteins were mass purified from recombinant E. coli. The single-dose oral-toxicity tests of the TRX and EGF proteins were carried out in six-week old male and female Institute of Cancer Research (ICR) mice. The initial evaluation of the single-dose TRF and EGF treatments was based on monitoring the toxicity signatures and mortality rates among the mice, and the resultant mortality rates did not show any specific clinical symptoms related to the proteins. Furthermore, no significant differences were observed in the weights between the treatment and control groups of male and female ICR mice. After 14 days of treatment, no differences were observed in the autopsy reports between the various treatment and control groups. These results suggest that the minimum lethal dose of TRX and EGF proteins is higher than the allowed 2,000 mg·kg-1 limit.
본 연구는 체외생산된 소 배반포기배의 inner cell mass (ICM) 세포에서 epidermal growth factor-receptor (EGF-R)의 발현 유무를 immunosurgery와 indirect immunofluorescence (간접 면역 형광방법)을 이용하여 조사하고자 실시하였다. 본 실험에 사용된 ICM 세포는 체외수정 후 7∼8일째에 회수된 소 배반포기배로부터 immunosurgery 방법을 실시하여 얻어졌으며, 회수된 ICM세포는 live/dead 염색방법을 통한 생사 유무와 EGF-R 발현 유무 조사에 공시되었다. 특히, 배반포기배에 대한 immunosurgery를 위해 trophectoderm 세포에 대한 rabbit anti-bovine trophectoderm cell antibody (RABTE)를 제조하여 사용하였다. 결과를 요약하면 다음과 같다. ICM세포의 회수율은 RABTE와 guinea pig serum (complement)에 각각 15∼30분과 15∼60분동안 처리했을 경우 16.7∼74.2%였으며, 또한 처리시간이 각각 30분과 30분일 때 가장 높은 회수율(74.2%)을 얻었다. Immunosurgery 후 얻어진 ICM세포의 생존 유무를 조사하기 위해 live/dead 염색 방법을 이용하였던바, ICM세포의 생존율은 complement가 60분 처리된 군(69.3%)을 제외한 모든 처리군에서 84.0∼91.6%의 높은 생존율을 나타냈다. 또한, 회수된 ICM세포에 대한 EGF-R의 존재를 확인하였다. 따라서, ICM세포에서의 EGF-R의 발현은 인위적으로 첨가된 EGF의 이용 가능성을 높임으로서 체외에서의 착상전 배 발달을 증진시킬 수 있을 것으로 사료된다.
Rutin is a well-known flavonoid found in buckwheat. Recent studies have demonstrated that the biological actions of rutin include anti-inflammatory and anti-cancer effects, but the underlying molecular mechanisms of these actions are not yet fully understood. Neoplastic cell transformation is considered a major event that contributes to carcinogenesis, and the present study aimed to determine whether rutin would exert anti-tumor effects via the results suggest that rutin exerted a potent inhibitory influence on the molecular activity of the MEK/ERK and MKK4/JNK pathways and strongly attenuated EGF-induced neoplastic cell transformation. These findings provide insight into the biological actions of rutin and the molecular basis for the development of new chemoprotective agents.
Kang, Jin Sun;La, Ha Na;Bak, Sun Uk;Eom, Hyo Jung;Lee, Byung Kyu;Shin, Hee Je
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.45
no.2
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pp.175-184
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2019
The epidermal growth factor (EGF) has a intrinsic function of inducing growth and proliferation of cells through interacting with cell membrane receptors in human epidermis and dermis layer. These functions of EGF are used as a main ingredient for wound healing medicines and anti-aging cosmetics. As a cosmetic ingredient, the EGF has a problem in exhibiting its natural efficacy due to the lack of the ability to penetrate through the stratum corneum, which is known as the skin barrier. In this study, a recombinant human epidermal growth factor ($MTD_{151}-EGF$) fused with the macromolecule transduction domain $(MTD)_{151}$ with the skin penetration ability was developed to improve the skin penetration efficiency of the EGF. Expression of $MTD_{151}-EGF$ was performed in E. coli transformed with a vector encoding the $MTD_{151}-EGF$ gene and then purified. The purified $MTD_{151}-EGF$ was evaluated using cell proliferation assay, cytotoxicity test and skin penetration test by franz diffusion cell assay and artificial skin. Cell proliferation activity of $MTD_{151}-EGF$ purified to high purity of 99% or above was equivalent to the EGF or better, and cytotoxicity was not observed. In addition, the $MTD_{151}-EGF$ showed an excellent penetration efficiency compared to the EGF in the skin penetration test with EGF and $MTD_{151}-EGF$ labeled by FITC in an artificial skin penetration model. Based on the quantitative analysis of the penetrating substance using franz diffusion cell assay, the amount of penetration was about 16 times more than that of EGF. These results can be regarded as an effective alternative to improve the existing physical transdermal penetration method related to the use of various active ingredients for cosmetics.
Aim: To investigate signaling pathways for reversal of EGF-mediated multi-drug resistance (MDR) in hepatocellular carcinoma (HCC) models. Materials and Methods: HCC MDR cell strain HepG2/adriamycin (ADM) and SMMC7721/ADM models were established using a method of exposure to medium with ADM between low and high concentration with gradually increasing concentration. Drug sensitivity and reversal of multi-drug resistance by EGF were determined and the cell cycle distribution and apoptosis were analyzed by flow cytometry. Phosphorylation of ERK1, ERK2, ERK5 and expression of Bim were detected by Western blotting. Results: The results showed that HepG2/ADM and SMMC7721/ADM cells were resistant not only to ADM, but also to multiple anticancer drugs. When used alone, EGF had no anti-tumor activity in HepG2/ADM and SMMC7721/ADM cells in vitro, while it increased the cytotoxicity of ADM. EGF induced cell apoptosis and G0/G1 phase cell cycle arrest in HepG2/ADM And SMMC7721/ADM cells, while enhancing activity of p-ERKs and up-regulated expression of BimEL. Conclusions: EGF might enhance the chemosensitivity of HepG2/ADM and SMMC7721/ADM cells via up-regulating p-ERKs and BimEL protein.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.102-102
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2002
Heparin-bindin epidermal growth factor (HB-EGF) is one of the EGF family to be expressed at the time of implantation in the mouse uterus. Although HB-EGF has been shown to stimulate the development of embryo and uterus in the mouse, its correlation between cell adhesion molecules remains undefined. Integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$, one of the cell adhesion molecules, is an important mediator of cell-substratum and cell-cell adhesion in implantation. In the present studies, we investigated the effects of HB-EGF on the embryonic development, initiation of implantation and expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in in vitro culture, blocking of HB-EGF, RT-PCR and immunofluores cence analysis. The results showed that HB-EGF significantly improved the developmental rate of hatched embryos (24.1%, p<0.01) and outgrowth embryos (42.5%, p<0.01). On the other hand, this growth factor showed no offset before the hatching embryonic stage. Analysis of RT-PCR showed that HB-EGF upregulated the expression level of integrina $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunit genes on the preimplantation embryo and outgrowth of blastocyst (120hr and 144hr after hCG injection). Immunofluorescence analysis showed that the integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunits localized at the pericellular borders and cell-cell contact areas. Increase in fluorescence intensity was observed in the HB-EGF treated embryos. Intrauterine injection of an anti-HB-EGF antiserum at day 3 significantly decreased the number of implantation sites (14.4, p<0.01) and significantly increased the number of recovered embryos(6.4, p<0.05) at day 5. From these results, it imply that HB-EGF improve the embryo development and accelerated the expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in the preimplantation mouse embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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