Dollar spot caused by Sclerotinia homeocarpa is one of major diseases in putting greens. Microorganisms antagonistic to S. homeocarpa, a pathogen of dollar spot, were primarily screened through in vitro tests, including dual culture method and triple layer agar diffusion method. In vivo tests were also conducted to select the best candidate for a biocontrol microorganism, using pot experiment. Bacillus subtilis EW42-1 and Trichoderma harziaum GBF-0208 were finally selected as biocontrol agents against dollar spot. Relative Performance Index(RPI) was used as a criterion of selecting potential biocontrol agents. B. subtilis EW42-1 and T. harzianum GBF-0208 showed resistance to several agrochemicals mainly used in a golf course. B. subtilis EW42-1 and T. harzianum GBF-0208 suppressed effectively the disease progress of dollar spot like synthetic fungicide tebuconazole in the nursery where dollar spot had seriously occurred. B. subtilis EW42-1 and T. harzianum GBF-0208 have a potential to be biocontrol agents for the control of dollar spot.
Sixteen isolates showing relatively strong antagonicity against the ginger rhizome rot pathogen, Pythium zingiberum, were selected among the 155 isolates from ginger rhizome surfaces and rhizospheres of ginger cultivation fields in Wanju, Chonbuk. The isolate, 'HB 26-5'showing the strongest antagonicity was finally selected by testing duration of inhibition effect and pathogenicity to ginger. The isolated antagonistic microorganism, 'HB 26-5' was rod shape, gram positive and formed endospore. The isolate produced acids utilizing glucose, arabinose, xylose and mannitol, and acetoin at VP test, and grew anaerobically. Temperature range for growth was from 10 to 4$0^{\circ}C$ . Reaction to catalase and gelatin, hydrolysis were positive, and casein hydrolysis and indol production were negative. Based on the mycological characters and the fatty acid composition, it was identified as Bacillus polymyxa. The pathogenicity test of isolated Bacillus polymyxa 'HB 26-5'on 22 crop cultivars resulted that only the lettuce was influenced in germination, and the others were not affected.
Kim, WonChan;Seo, SangHyun;Lee, ChangHee;Park, JunHong;Kang, SangJae
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.49
no.3
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pp.251-258
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2016
A rhizobacterium LPN-2, which showed strong antifungal activity and auxin producing ability, was isolated from a farmland in North Gyeongsang Province, South Korea. Based on analysis of the 16S rDNA sequence, strain LPN-2 was identified as a novel strain of Burkholderia and was designated as Burkholderia sp. LPN-2. In vitro experiments showed that the isolated stain LPN-2 significantly produced auxin within 48 hr incubation. In order to check for PGPR function we performed in vivo growth promoting test in different crops, including mung bean, pea and cabbage. Application of Burkholderia sp. LPN-2 showed dramatic growth promoting effect on all the tested plants. We also confirmed siderophore and cellulase productions by Burkholderia sp. LPN-2 using CAS blue agar and CMC plate test. Further treatment with LPN-2 and the crude culture broth was effective in suppressing anthracnose in vitro test and also reduced incidence and severity of anthracnose in apple and pepper. Taken together, we conclude that Burkholderia sp. LPN-2 might be used as organic fertilizer for effective crop production in organic farming.
Antagonistic microorganisms against $Rhizoctonia$$solani$ were isolated and their antifungal activities were investigated. Two hundred sixteen bacterial isolates were isolated from various soil samples and 19 isolates were found to antagonize the selected plant pathogenic fungi with varying degrees. Among them, isolate C9 was selected as an antagonistic microorganism with potential for use in further studies. Treatment with the selected isolate C9 resulted in significantly reduced incidence of stem-segment colonization by $R.$$solani$ AG2-2(IV) in Zoysia grass and enhanced growth of grass. Through its biochemical, physiological, and 16S rDNA characteristics, the selected bacterium was identified as $Bacillus$$subtilis$ subsp. $subtilis$. Mannitol (1%) and soytone (1%) were found to be the best carbon and nitrogen sources, respectively, for use in antibiotic production. An antibiotic compound, designated as DG4, was separated and purified from ethyl acetate extract of the culture broth of isolate C9. On the basis of spectral data, including proton nuclear magneric resonance ($^1H$ NMR), carbon nuclear magneric resonance ($^{13}C$ NMR), and mass analyses, its chemical structure was established as a stereoisomer of acetylbutanediol. Application of the ethyl acetate extract of isolate C9 to several plant pathogens resulted in dose-dependent inhibition. Treatment with the purified compound (an isomer of acetylbuanediol) resulted in significantly inhibited growth of tested pathogens. The cell free culture supernatant of isolate C9 showed a chitinase effect on chitin medium. Results from the present study demonstrated the significant potential of the purified compound from isolate C9 for use as a biocontrol agent as well as a plant growth promoter with the ability to trigger induced systemic resistance of plants.
This study was carried out to identity the effects of antifungal bacteria isolated from the soil grown kiwi fruit plants on the growth inhibition of Botrytis cinerea causing gray mold in kiwi fruit plants in the southern districts of Jeonnam. Two hundred and fifty antagonistic microorganisms were isolated and examined into the antifungal activity against Botrytis cinerea. We screened and isolated four bacterial strains which strongly inhibited Botrytis cinerea from the soil grown kiwi fruit plants. And the best antifungal bacterial strain which called CHO 163 was finally selected. Antagonistic microorganism CHO 163 was identified to be the genus Bacillus sp. based on the morphological and biochemical characterization. Bacillus sp. CHO 163 showed 86.9% of antifungal activity against Botrytis cinerea. By the bacterialization of culture broth and heated filtrates of culture broth, Bacillus sp. CHO 163 showed almost all of antagonistic activity against Botrytis cinerea. And we also confirmed that in vitro the treatment of Bacillus sp. CHO 163 cultured by SD+B+P broth efficiently controled the growth of Botrytis cinerea causing gray mold in kiwi fruit plants.
The purpose of this study was to investigate eco-friendly measures to manage major diseases which cause heavy economic damages to ginseng. Morphological, physicochemical, and molecular biological species identification was carried out after isolating useful antagonistic bacteria from ginseng fields. In addition, optimal conditions for mass culture were established, and he efficacy of the bacteria in the prevention of the diseases was verified in the field. The results showed that about 150 bacteria were extracted from 150 ginseng fields in the whole county. Among them, B. pyrrocinia LA101 was finally selected, which had a strong antagonistic potency against Alternaria panax, Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, and Cylindrocarpon destructans on agar media. The B. pyrrocinia LA101 is a baculiform gram-negative bacterium identified as Burkholderia pyrrocinia according to results from an API(Analytical Profile Index) kit, 16S rRNA, and gyrase gene sequencing analysis. It was donated to the microbe bank of the Agricultural Genetic Resources Center at the National Academy of Agriculture Science under the Rural Development Administration on September 28, 2011 (Donation No. KACC91663P). A patent for the mass culture technology was granted in August 2012 (Patent No. 10-1175532).
This study was conducted to examine the antagonism of useful microbes against soybean sprout rotting pathogens and their effect on the growth of soybean sprouts. The antagonism against soybean sprout rotting pathogens and the effect on the growth of soybean sprouts were examined by using P. areofacience 14H-3, P. fluorescens R1-12 and B. cereus Yell, bacteria were shown to inhibit mycellial growth of Rhizotonia solani strongly. The results of this study are summarized as follows. P. areofacience 14H-3 and B. cereus Yell were highly antagonistic against Rizoctonia solani, while they were especially highly antagonistic against bacterial diseases. The effect of inhibiting the proliferation of soybean sprout rotting pathogens was also examined by adding the culture solution for antagonistic bacteria to the PDA. Both P. areofacience 14H-3 and P. fluorescens Rl-12 showed the inhibition rate of 78.8%, while B. cereus Yell did 52.9%. The fresh weight and length of soybean sprouts were measured after raising them with added antagonistic microbes and culture medium. Soybean sprouts treated with B. cereus Yell showed increased higher, compared with those not treated with it. Soybean sprouts were also raised in the culture solution with antagonistic bacteria to examine the growth of soybean sprouts. Soybean sprouts treated with the culture solution of 200 times showed better growth than those not treated with it. Analyze proximate composition in soybean sprout showed that moisture, ash, total sugar did not appear difference, but in case of crude protein B. cereus Yell(8.9%) increased about 2 times than control(3.6%), but occasion of crude fat and crude fiber were P. areofacience 14H-3, P. fluorescens Rl-12 increased about each 2 times than control. In occasion of vitamin, bacterial antagonist(9.4∼10.8mg%) was more higher than control(9.9mg%).
A large patch disease caused by Rhizoctonia solani AG2-2 (IV) is a serious problem in Korean lawngrass (Zoysia japonica) sites including golf courses and sports fields in Korea. Antagonistic microorganisms against R. solani AG2-2 (IV) were isolated from various forest and crop soil sources in Southern Korea. Among the 61 isolates, I-009, FRIN-001-1, and YPIN-022 strains showing dramatic inhibition of the mycelial growth of R. solani AG2-2 (IV) in the pairing culture were selected as the most potential antagonistic microorganisms for this study. Based on the 16s RNA sequence comparison, I-009 and FRIN-001-1 isolates were identified as Bacillus spp., while YPIN-022 isolate belongs to the genus Pseudomonas. The greater inhibition (clear) zone between two edges of the selected and pathogenic microbes ranged from 11 to 15 mm in three selections, but the others averaged to 7 mm out of 30 mm distance. In another antifungal test using culture filtrate, those three isolates represented a range of 51.7 to 63.5% suppression potential. The selected isolates also inhibited significantly the stem-segment colonization by R. solani AG2-2 (IV) in vivo test by 28.1%, 43.0%, and 23.7% when inoculated with I-009, FRIN-001-1, and YPIN-022, respectively. The highest antagonistic activity for the large patch disease was demonstrated by the isolate FRIN-001-1, which will be useful for developing a bio-pesticide against Rhizoctonia.
We investigated the effect of nitrogen fixing Azotobacter bioinoculant on the mycelial growth and the rate of substrate utilization by Pleurotus eous. The synergistic or antagonistic role of the microorganism during dual culturing with the mushroom or the competitor molds Trichoderma viride, and Trichoderma reesi was studied. Azotobacter was inhibitory to the molds, which are competitive to the mushroom in the seed spawn substrate, but was synergistic towards the mushroom. The growth, substrate utilization potential as total nitrogen content and cellulase enzyme activities of the mushroom in the seed spawn substrate were also enhanced in the presence of the bioinoculant at lower inoculum concentrations, upto 5 ml broth culture per spawn bottle.
Synthetic agro-chemicals have been widely used to control diseases on paprika but these days negative attention has been increasing to use of them because of several adverse effects. This research was conducted to isolate and to characterize the antagonistic microorganism to control major paprika diseases, gray mold rot, fruit and stem rot, phytophthora blight, sclerotium rot, and wilt disease. Analysis of the fatty acid and analysis of the 16S rDNA gene sequence revealed that YKJ1 isolated in this research belongs to a group of Serratia marcescens. Specially, 16S rDNA gene sequence of YKJ1 showed 99% of sequence similarity with S. marcescens. Observation through the optical microscope revealed that YKJ1 suppressed the spore germination and the hyphal growth of pathogens. YKJ1 treatment on pathogens induced marked morphological changes like hyphal swelling and degradation of cell wall. In the case of phytophthora blight, the zoosporangium formation was restrained. S. marcescens found in this study call as S. marcescens-YKJ1 and it may be valuable as one of biological control agents against major diseases of paprika in the future even though it is require to be tested with more study on field test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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