Electrical impedance spectroscopy is used to detect membrane fouling in-situ in reverse electrodialysis. The impedance data for the AMX membrane being fouled in the reverse electrodialysis are plotted and analyzed by Nyquist and admittance method. The meaningful graphical analyses for the fouling phenomena could be done by both Nyquist and admittance method. In addition, the unstable initial fouling stage was identified by the admittance data with high standard deviation, and the structural change of the fouling layer formed at the surface of anion-exchange membranes with the operation time of reverse electrodialysis was also detected.
A sensitive optical waveguide lightmode spectroscopy-based immunosensor was developed to detect vitellogenin in seawater flatfish (Paralichthys olivaceus). For this purpose, anion-exchange column chromatography with DE-52 resin was used to purify flatfish vitellogenin from flatfish serum containing vitellogenin that had been induced using an intraperitoneal $17{\beta}$-estradiol injection. The anti-flatfish vitellogenin antibody used as the biological component of the above immunosensor was prepared using the purified flatfish vitellogenin. The change in the incoupling angle according to the complexation between the flatfish vitellogenin and its antibody, immobilized over an optical grating coupler sensor chip, was measured to calculate the sensor response. The immunosensor was quite specific to flatfish vitellogenin binding, based on no sensor response in the case of bovine serum albumin immobilization. When plotted using double-logarithmic scales, the sensor responses increased linearly in flatfish vitellogenin concentrations of 0.00675-67.5 nM, with a detection limit of 0.0675 nM. The reusability during seven repetitive measurements was reasonably fair for the preliminary screening of flatfish vitellogenin.
To find pharmacologically active hybrids among the inter-order protoplast fusants of Lentinula edodes and Ginoderma lucidam the antitumor test was performed and the fusant P22 was selected among them. The hot water and alkaline extracts from the cultured mycelia of P22 were purified and separated into four fractions by DEAE-cellulose anion exchange chromatography. When a dose of 20 mg/kg/day of each fractions was injected into ICR mice by i.p., the tumor inhibition ratio of Fr. IV against solid sarcoma 180 was the higher than any other fraction. Fr. IV was a protein-bound polysaccharide which was composed of 69. 12% polysacchafide and 9.76% protein and the molecular weight of Fr. IV was $6.7{\times}10^4$ dalton.
Lactobacillus salivarius subsp. salivarius CNU27 possessed a high level of ${\alpha}$-galactosidase activity. Purified ${\alpha}$-galactosidase was obtained after sonication of harvested cell pellet followed by DEAE-Sephadex A-50 and Mono Q anion exchange chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 8,994 units/mg protein which is 17.09 times higher than that in crude extract. The native enzyme was a monomer with a molecular mass of 56,397.1 dalton. The optimum temperature and pH for the enzyme were $40^{\circ}C$ and 6.0, respectively. The enzyme was stable between 25 and $50^{\circ}C$. However, ${\alpha}$-galactosidase activity was lost rapidly below pH 4.5 and above pH 8.5. The enzyme activity decreased to 6.73% and 4.30% of the original activity by addition of $Cu^{2+}$ and $Hg^{2+}$, respectively. Other metal compounds did not affect the enzyme activity significantly. The enzyme liberated galactose from melibiose, raffinose, and stachyose. The rate of substrates hydrolysis was measured by HPLC. Raffinose, stachyose and melibiose were completely decomposed after 24 hr at $40^{\circ}C$.
chondroitin sulfates were isolated from the mud snail. For the quantitative analysis of enzymatic digestion products of isolated chondroitin sulfates, strong anion exchange-high performance liquid chromatography (SAX-HPLC) was performed. by the action of chondroitinase ABC, three unsaturated disaccharides$ 2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-D-galactose $$({\Delta}Di-OS), $2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-6-O-sulfo-D-galactose ({\Delta}Di-6S) and 2-acetamide-2-deoxy-3-O-({\beta}-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-4-O-sulfo-D-galactose ({\Delta}Di-4S)$ were produced from the mud snail chondroitin sulfates. The analysis showed that relative proportion of ${\Delta}Di-OS/{\Delta}Di-6S/{\Delta}Di-4S$ was 58.7/3.1/38.2. The immunomodulating activity of chondroitin sulfate was examined by cell proliferation assay and these results suggest that it might be a immunosuppressant.
Protozoan parasites of the genus Leishmania cause a number of important human diseases. One of the key determinants of parasite infectivity and survival is the surface glycoconjugate lipophosphoglycan (LPG). In addition, LPG is shown to be useful as a transmission blocking vaccine. Since culture supernatant of parasite promastigotes is a good source of LPG, we made attempts to characterize functions of the culture supernatant, and membrane LPG isolated from metacyclic promastigotes of Leishmania major. The purification scheme included anion-exchange chromatography, hydrophobic interaction chromatography and cold methanol precipitation. The purity of supernatant LPG (sLPG) and membrane LPG (mLPG) was determined by SOS-PAGE and thin layer chromatography. The effect of mLPG and sLPG on nitric oxide (NO) production by murine macrophages cell line (J77 4.1 A) was studied. Both sLPG and mLPG induced NO production in a dose dependent manner but sLPG induced significantly higher amount of NO than mLPG. Our results show that sLPG is able to promote NO production by murine macrophages.
The concern for dissolved phosphate in water/wastewater has been increasing because of the risk for eutrophication. A variety of conventional and advanced technologies were applied to meet the enforced new regulation of phosphate around the world. However, there still remained a lot of challenge because most introduced/developed method, for example, biological and physic-chemical treatment is not easy to satisfy the new regulation of phosphate in water. In order to meet the new regulation, the application of ion exchanger has been tried which showed that the removal efficiency for phosphate was strongly determined by in the presence of the competing ion, especially sulfate. As results, a new class of ion exchanger governed by ligand exchange was developed and investigated to increase the selectivity for phosphate. The current study using organic/inorganic anion exchanger developed with Lewis acid-base interaction confirms the selectivity for phosphate over sulfate. According to isotherm test and column test, the value of the maximum phosphate uptake (Q) showed 64 mg/g as $po{_4}^{3-}$ and the breakthrough for phosphate occurs after 1000 min and completely finishes at 2500 min, respectively.
The performance of all-vanadium redox flow battery (VRFB) was tested with an increase of the current density. APS membrane (anion exchange membrane) and GF050CH (cabon felt) were used as a separator and electrode, respectively. An average energy efficiency of the VRFB was 79.5%, 68.1%, and 62.8% for the current density of $60mA/cm^2$, $120mA/cm^2$, and $160mA/cm^2$, respectively. It was confirmed that VRFB can be used as a energy storage system at the higher current density even if the energy efficiency was deceased about 21%.
Glycosaminoglycans (GAGs) were isolated from the porcine testis, and their immuno-modulating and anticoagulant activity was investigated. From anion exchange chromatography (Dowex Macropolous Resin) used for further isolation of porcine testis GAGs (PT-GAGs), two fractions (PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16) eluted by different salt concentration were obtained. In immunomodulating activity test, PT-GAG-1.5, but not PT-GAG-16, significantly enhanced the growth of murine peritoneal macrophages. In addition, treatment with PT-GAG-1.5 induced the production of cytokines, interleukin-1$\beta$ (IL-1$\beta$), interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), from murine microphages. Unexpectedly, both of PT-GAGs had no effect on the growth of murine splenocytes. The anticoagulant activity of PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16 was examined by activated partial thromboplastin time (aPTT) assay and thrombin time (TT) assay. Both of PT-kGAGs significantly increased the clotting times of aPTT and TT in a dose-dependent manner. The anticoagulant activity of PT-GAG-16 was found to be higher than that of PT-GAG-1.5. These results suggest that PT-GAGs possess biological activities such as immunomodulating activity and anticoagulant activity.
The alkaline invertase ($\beta$-D-fructofuranoside fructohydrolase, EC 3.2.1.26) was isolated and characterized from the hypocotyls of mung bean (Phaseolus radiatus L.). The enzyme was purified by consecutive step using diethylaminoethyl (DEAE)-cellulose anion exchange, 1st Sephadex G-200, DEAE-Sephadex A50 and 2nd Sephadex G-200 chromatography. The overall purification was about 77-fold with a yield of about 6%. The finally purified enzyme exhibited a specific activity of about 48 $\mu$mol of glucose produced mg-1 protein min-1 at pH 7.0 and appeared to be a single protein by nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). The enzyme had the native molecular weight of 450 kD and subunits molecular weight of 63 kD and 38 kD as estimated by Sephadex G-200 chromatography and SDS-PAGE, respectively, suggesting that the enzyme is a heteromultimeric protein composed of two types of subunits. On the other hand, the enzyme appeared to be not a glycoprotein according to the results of Con A chromatography and glycoprotein staining. The enzyme had a Km for sucrose of 19.7 mM at pH 7.0 and maximum activity around pH 7.5. The enzyme was most active with sucrose as substrate, compared to raffinose, cellobiose, maltose and lactose. These results indicate the alkaline invertase is a $\beta$-fructofuranosidase.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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