Natural killer (NK) cells play have a crucial role in the early phase of immune responses against various pathogens. We compared characteristics of canine NK cells against two canine mammary carcinoma cell lines, REM134 and CF41.Mg. REM134 showed higher expression of progesterone receptor, proliferative cell nuclear antigen, Ki67, multiple drug resistance, Bmi-1, c-myc, E-cadherin, and human epidermal growth factor receptor type-2 than that of CF41.Mg. For specific expansion and activation of NK cells, we isolated CD5 negative cells from canine peripheral blood mononuclear cells and co-cultured K562 cells in the presence of interleukin (IL)-2, IL-15, and IL-21 for 21 days. As a result, we found that expression markers of activated NK cells such as NKp30, NKp44, NKp46, NKG2D, CD244, perforin, granzyme B, and tumor necrosis factor alpha were highly upregulated. In addition, we found there was upregulated production of interferon gamma of activated NK cells against target cells such as REM134 and CF41.Mg. Specifically, we observed that cytotoxicity of NK cells against target cells was more sensitively reacted to CF41.Mg than REM134. Based on the results of this study, we recommend the development of an experimental application of CF41Mg, which has not been reported in canine mammary carcinoma research.
Kim, Seon-Mi;Lim, Seong-In;Song, Jae-Young;Hyun, Bang-Hun
Korean Journal of Veterinary Research
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v.52
no.4
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pp.259-262
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2012
Classical swine fever (CSF) is a highly contagious disease among swine that has an important economic impact on worldwide. One clinical symptom of CSF is leukopenia, in particular lymphopenia, which is a characteristic event that occurs early in the course of CSF. Though lymphopenia associated with apoptosis, the pathogenic mechanism underlying the lymphopenia has not been well studied. To understand these mechanisms, we investigated the response of porcine B cell lines to infection with SW03, virulent strain isolated from swine tissue in Korea. This study demonstrated that SW03-infected L35 cell were induced apoptosis through the detection of activated caspase-3. In addition, SW03 infection leaded to alterations in pro-apoptotic, Bax, and anti-apoptotic, Bcl-xL proteins of Bcl-2 family. Our results would suggest that SW03-infected L35 cells induced apoptosis via intrinsic mitochondrial pathway.
Dong-Kun Yang;Sangjin Ahn;Hye Jeong Lee;Minuk Kim;Jong-Taek Kim;Ju-Yeon Lee;Yun Sang Cho
Clinical and Experimental Vaccine Research
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v.13
no.3
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pp.253-258
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2024
Purpose: The immunogenicity of vaccines containing the canine adenovirus (CAdV) type 2 (CAdV-2) variant has not yet been reported. We prepared a novel inactivated CAdV-2 variant vaccine using the CAV2232-41 strain, and evaluated its safety and immunogenicity in raccoon dogs. Materials and Methods: The growth kinetics of CAV2232-41 were determined using Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cells. The nucleotide sequences of CAV2232 and CAV2232-41 were determined by next-generation sequencing. To generate the CAdV-2 variant vaccine, CAV2232-41 propagated in the MDCK cells was inactivated with 0.1% formaldehyde. Two vaccines were prepared by blending inactivated CAV2232-41 with Cabopol and Rehydragel adjuvants. Safety and immunogenicity of the CAV2232C and CAV2232R vaccines were evaluated in guinea pigs. Safety and immunogenicity of the CAV2232C vaccine were also evaluated in raccoon dogs. The virus neutralizing antibody (VNA) titer against CAV2232-41 was measured in sera collected from immunized guinea pigs and raccoon dogs. Results: CAV2232-41 showed the highest viral titer on days 4-6 post-inoculation and had a deletion in the E3 gene, which was confirmed as a CAdV-2 variant. Guinea pigs inoculated with CAV2232C showed slightly higher VNA titers than those inoculated with CAV2232R 2 weeks after booster vaccination. Raccoon dogs immunized with the CAV2232C vaccine developed high mean VNA titers, while non-vaccinated raccoon dogs were antibody-negative. Conclusion: The CAV2232C vaccine is safe and induces a protective VNA titer in raccoon dogs.
Canine adenovirus type 2 (CAV-2) infection results in significant respiratory illness in dogs. Isolating and culturing CAV-2 allows for investigations into its pathogenesis and the development of vaccines and diagnostic assays. In this study, we successfully isolated a virus from a naturally infected dog in Gyeonggi-do, Korea. The virus was propagated in Madin-Darby canine kidney (MDCK) and Vero cells and showed a specific cytopathic morphology that appeared similar to a bunch of grapes. The virus was first confirmed as CAV-2 based on these cytopathic effects, an immunofluorescence assay, hemagglutination assay, and electron microscopy. The viral titer of the isolate designated APQA1601 reached $10^{6.5}$ 50% tissue culture infections dose per mL in MDCK cells and exhibited no hemagglutination units with erythrocytes from guinea pig. The virus was also confirmed by polymerase chain reaction and next-generation sequencing. The APQA1601 strain had the highest similarity (~99.9%) with the Toronto A26/61 strain, which was isolated in Canada in 1976 when the nucleotide sequences of the full genome of the APQA1601 strain were compared with those of other CAV strains. Isolating CAV-2 will help elucidate the biological properties of CAV-2 circulating in Korean dogs.
Bovine parainfluenza virus type 5 (bPIV5) was isolated from cattle with downer cow syndrome in 2012, and included both respiratory and neurotropic pathogens from a variety of animals. In the current study, we conducted serosurveillance using sera obtained from seven Korean farms and optimized a reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay to detect bPIV5. The overall seropositive rate for Korean cattle was 21.4% (163/760). A farm located near the city of Milyang in Gyeoungnam province had a markedly elevated seropositive rate for bPIV5 compared to that of the other six farms. The regional seropositive rates were 4.2% (8/192) for Haman, 19.5% (18/55) for Hwasung, 73.9% (65/88) for Milyang, 26.0% (50/192) for Namwon, 1.0% (1/96) for Uljin, 13.5% (13/96) for Yeongju, and 32.7% (8/41) for Yongin. The sensitivity and specificity of three RT-PCR primer sets used to amplify the conserved fusion gene of bPIV5 were also evaluated. An RT-PCR assay using the bPIVFR3 primer set was 10-fold more sensitive than the assays using the two other primer sets and did not result in non-specific amplification. These results demonstrated that the bPIFR3 primer set can be used to detect bPIV5.
Streptococcus is one of the major pathogen groups inducing bovine mastitis. The aim of this study was to investigate the antimicrobial resistance patterns of Streptococcus species isolated from bovine mastitis milk samples in Korea from 2016 to 2021. In total, 181 (10.3%) Streptococcal isolates were collected from 1,761 quarter milk samples at 122 farms; S. uberis 39.2% (n=71), S. dysgalactiae 29.3% (n=53), S. equinus 9.9% (n=18), S. suis 6.1% (n=11), S. parauberis 4.4% (n=8), S. lutetiensis 3.9% (n=7), others 7.2% (n=13). However, S. agalactiae was not isolated. The isolates showed the highest resistance rate to tetracycline (55.2%) followed by erythromycin (45.3%) and pirlimycin (36.5%). In contrast, all isolates were susceptible to ceftiofur, cephalothin, penicillin/novobiocin, and only single S. equinus isolate was resistant to both ampicillin and penicillin. Of 181 isolates, 64 (35.4%) were multidrug resistance (MDR). The resistance to pirlimycin of S. uberis (73.2%) was much higher than that of other species (0~36.4%). All S. suis isolates were resistance to tetracycline. S. dysgalactiae showed lower resistance to erythromycin, pirlimycin and tetracycline than S. uberis and S. suis. The rate of MDR was relatively higher among S. uberis (73.2%) than among S. suis (36.4%), S. dysgalactiae (15.1%), others (0%). In conclusion, antimicrobial resistance in Streptococcus spp. should be regularly examined for appropriate therapies because the resistance patterns were various among the individual species.
Baek, Dong Jin;Kwon, Hyoun Chul;Mun, Ah Lyum;Lim, Joo Ri;Park, Sung Won;Han, Jin Soo
Animal Bioscience
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v.35
no.1
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pp.147-152
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2022
Objective: This study was conducted to obtain an objective index that can be quantified and used for establishing an animal welfare certification standard in Korea. For this purpose rumen pH, ruminating time, milk yield, milk quality, and blood components of cows reared in farms feeding high forage level (90%) and farms feeding low forage level (40%) were compared. Methods: Data on rumen pH, rumination time, milk yield, milk fat ratio, milk protein ratio, and blood metabolism were collected from 12 heads from a welfare farm (forage rate 88.5%) and 13 heads from a conventional farm (forage rate 34.5%) for three days in October 2019. Results: The rumination time was longer in cattle on the welfare farm than on the conventional farm (p<0.01), but ruminal pH fluctuation was greater in the cattle on conventional farm than the welfare farm (p<0.01). Conventional farms with a high ratio of concentrated feed were higher in average daily milk yield than welfare farms, but milk fat and milk production efficiency (milk fat and milk protein corrected milk/total digestible nutrients) was higher in cattle on welfare farms. Blood test results showed a normal range for both farm types, but concentrations of total cholesterol and non-esterified fatty acid were significantly higher in cows from conventional farms with a high milk yield (p<0.01). Conclusion: The results of this study confirmed that cows on the animal welfare farm with a high percentage of grass feed had higher milk production efficiency with healthier rumen pH and blood metabolism parameters compared to those on the conventional farm.
Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious disease affecting cloven-hoofed animals and causes severe economic loss and devastating effect on international trade of animal or animal products. Since FMD outbreaks have recently occurred in some Asian countries, it is important to understand the relationship between diverse immunogenomic structures of host animals and the immunity to foot-and-mouth disease virus (FMDV). We performed genome wide association study based on high-density bovine single nucleotide polymorphism (SNP) chip for identifying FMD resistant loci in Holstein cattle. Among 624532 SNP after quality control, we found that 11 SNPs on 3 chromosomes (chr17, 22, and 15) were significantly associated with the trait at the p.adjust <0.05 after PERMORY test. Most significantly associated SNPs were located on chromosome 17, around the genes Myosin XVIIIB and Seizure related 6 homolog (mouse)-like, which were associated with lung cancer. Based on the known function of the genes nearby the significant SNPs, the FMD resistant animals might have ability to improve their innate immune response to FMDV infection.
Korea is carrying out weed quarantine by plant quarantine regulations including heat-treatment method to prevent the influx of exotic weeds. In order to confirm suitability for current heat-treatment criteria and find field-applicable methods which can completely devitalize quarantine weed seeds, the conditions for heat-treatment with/without 40% relative humidity were studied with 9 species among quarantine weed seeds and one weed species similar to quarantine weed. Dry heat-treatments had been tested under various temperatures and time conditions. All seeds were dead at the conditions of $95^{\circ}C$ for 48 hours, $100^{\circ}C$ for 36 hours, $110^{\circ}C$ for 24 hours, $121^{\circ}C$ for 4 hours and $130^{\circ}C$ for 30 minutes. Heat-treatments at 40% relative humidity resulted in complete seed death at the conditions of $85^{\circ}C$ for 36 hours and $90^{\circ}C$ for 16 hours. The above results show that current heat-treatment criteria are not suitable for several quarantine weeds and these conditions could be applied as a quarantine method to prevent the influx of quarantine weeds along with agricultural imports. More specific conditions for heat tolerant species such as Picris echioides and heat susceptible species such as Cuscuta spp. are necessary and will improve plant quarantine process in devitalizing quarantine weed seeds with different heat tolerances.
Yerim Yu;Yong-Bong Lee;Jae-Kwang Jwa;Hyoung-ho Mo;Heungsik Lee;Youngjin Park
Korean journal of applied entomology
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v.62
no.3
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pp.131-137
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2023
The striped fruit fly, Zeugodacus scutellata (Diptera: Tephritidae), is one of important pests in Cucurbitaceae plants. The cuelure is currently using with various forms for surveillance to the Z. scutellata male as well as Z. cucurbitae, Z. tau, and Bactrocera tryoni, which are categorized as prohibited-quarantine fruit flies in Korea. This study was conducted to verify the attraction effect of applying the cuelure in different forms in field conditions. In this study, we used cuelure by 3 different forms as solid, liquid, and wax to striped fruit flies using the Steiner trap. The trap was placed in two Jeju and one Gyeongbuk regions and the number of attracted flies by each cuelure form is monitored by every 2 weeks during 2021. Attraction effect on Z. scutellata was significant difference by different cuelure forms in two Jeju regions. Liquid and wax forms of cuelure showed high attraction number to the Z. scutellata male compared with solid form when flies were occurred with high population from July to August in Jeju. However, there was no significant difference on attraction effect at low population in Juju and Gyeongbuk by different forms. Based on field assay, liquid and wax form of cuelure are recommended for surveillance against Z. scutellata male. Furthermore, these results also strongly suggest that the attractant, liquid and wax forms of cuelure, could be effective for surveillance to quarantine fruit flies such as Z. cucurbitae, Z. tau, and B. tryoni in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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