Animal testing was used traditionally in the cosmetics industry to confirm product safety, but has begun to be banned; alternative methods to replace animal experiments are either in development, or are being validated, worldwide. Research data related to test substances are critical for developing novel alternative tests. Moreover, safety information on cosmetic materials has neither been collected in a database nor shared among researchers. Therefore, it is imperative to build and share a database of safety information on toxicological mechanisms and pathways collected through in vivo, in vitro, and in silico methods. We developed the CAMSEC database (named after the research team; the Consortium of Alternative Methods for Safety Evaluation of Cosmetics) to fulfill this purpose. On the same website, our aim is to provide updates on current alternative research methods in Korea. The database will not be used directly to conduct safety evaluations, but researchers or regulatory individuals can use it to facilitate their work in formulating safety evaluations for cosmetic materials. We hope this database will help establish new alternative research methods to conduct efficient safety evaluations of cosmetic materials.
The skin exposure to solar irradiation and photoreactive xenobiotics may produce abnormal skin reaction, phototoxicity. Phototoxicity is an acute light-induced response, which occurs when photoreacive chemicals are activated by solar lights and transformed into products cytotoxic against the skin cells. Multifarious symptoms of phototoxicity are identified, skin irritation, erythema, pruritis, and edema that are similar to those of the exaggerated sunburn. Diverse organic chemicals, especially drugs, are known to induce phototoxicity, which is probably from the common possession of UV-absorbing benzene or heterocyclic rings in their molecular structures. Both UVB (290~320 nm) and UVA (320~400 nm) are responsible for the manifestation of phototoxicity. Absorption of photons and absorbed energy (hv) by photoactive chemicals results in molecular changes or generates reactive oxygen species and depending on the way how endogenous molecules are affected by phototoxicants, mechanisms of phototoxcity is categorized into two modes of action: Direct when unstable species from excited state directly react with the endogenous molecules, and indirect when endogeneous molecules react with secondary photoproducts. In order to identify phototoxic potential of a chemical, various test methods have been introduced. Focus is given to animal alternative test methods, i.e., in vitro, and in chemico assays as well as in vivo. 3T3 neutral red uptake assay, erythrocyte photohemolysis test, and phototoxicity test using human 3-dimensional (3D) epidermis model are examples of in vitro assays. In chemico methods evaluate the generation of reactive oxygen species or DNA strand break activity employing plasmid for chemicals, or drugs with phototoxic potential.
Human eyes and skin are frequently exposed to chemicals accidentally or on purpose due to their external location. Therefore, chemicals are required to undergo the evaluation of the ocular and dermal irritancy for their safe handling and use before release into the market. Draize rabbit eye and skin irritation test developed in 1944, has been a gold standard test which was enlisted as OECD TG 404 and OECD TG 405 but it has been criticized with respect to animal welfare due to invasive and cruel procedure. To replace it, diverse alternatives have been developed: (i) For Draize eye irritation test, organotypic assay, in vitro cytotoxicity-based method, in chemico tests, in silico prediction model, and 3D reconstructed human cornealike epithelium (RhCE); (ii) For Draize skin irritation test, in vitro cytotoxicity-based cell model, and 3D reconstructed human epidermis models (RhE). Of these, RhCE and RhE models are getting spotlight as a promising alternative with a wide applicability domain covering cosmetics and personal care products. In this review, we overviewed the current alternatives to Draize test with a focus on 3D human epithelium models to provide an insight into advancing and widening their utility.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.22
no.1
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pp.84-101
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1996
To minimize the use of animals in toxicity testing, and to reduce the cost in vivo test, more rational test method was described which determines, in the same animal, photoxic and photoallergic potential of a substance, and is daptable to routine testing. The other purpose of this study was to investigate the usefulness of in vivo alternatives ; photostability and spectrophotometric carbonyl assay. In this modified photosensitization model, animal numbers and resting periods, the number and method of topical application were simplified. Two positive photoreactive agents, Benzocaine and 6-methyl coumarine, showed a similar photoallergic potential to that of Ichikawa's method. Two sunscreens, Octyl methoxy cinnamate, Butyl methoxyl dibenzoyl methane, hardly showed photoallergic potentials. The photostability test could be used in the step of prescreening of photosensitization potential because most of the photoreactive agents represented the reduction of more than 20% in the absorbance. And photoreactive agents have a high potential of photosensitization in the sddessment of spectrophotometric carbonyl level although two sunscreens have a low possibility of photosensitization. Therefore this method was assumed as a valuable in vivo alternatives in the respect even in the very low concentrations which phototoxicity test using almonella showed no phototoxic potential.
Nam, Gi Baeg;Cho, Sun-A;Cho, Jun-Cheol;Kim, Chanho;Kim, Yoo-Jin;Lee, John Hwan;Shin, Kyeho
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.38
no.4
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pp.305-310
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2012
Through our entire life, oral care products such as toothpaste are used. Thus the safety of oral care products used every day to our mouth is very important. As the previous study in animal tests or clinical trials, surfactant in toothpaste may cause the oral irritation. However, EU cosmetics legislation prohibits animal testing of cosmetics and its ingredient for animal welfare. Therefore the development of alternative in vitro test has been actively performed to replace or reduce using the animal in many areas. However, the way to evaluate oral mucosal toxicity has been done using animal models or clinical trials from now on. Even more, the experiment with human oral 3D tissue or human oral cell line is used recently. The aim of this study is the development of oral mucosal irritation method without using animal for the safety of the oral care product. We developed in vitro test method for oral irritation by using human oral cell line (YD-38 cell) acceptable to toothpaste which contains insoluble material. By the results of this assay, we could discriminate toothpaste with or without irritating substance as same manner in animal studies reported previously. In addition, we confirmed that toothpaste for babies and children toothpaste irritated oral musoca lower than the general adult toothpaste. The present study suggest that this new in vitro method by using human oral cell line (YD-38 cell) could be used for evaluation of oral irritation without using animal.
This study was conducted to evaluate the adequacy of an alternative a.m.-p.m. testing scheme for milk yield in comparison with the official test method based on weighing two milkings within 24 h. A total of 8,309 p.m. milking weights and 6,767 a.m. milking weights from 72 Holstein cows raised at N.L.R.I. were collected between October 2000 and November 2001. Ratios were computes for daily milk yield to a.m. and p.m. milking weights(direct yield ratios) and ratios of a.m. and p.m. milking weights to daily milk yield (inverse yield ratios). Analysis of variance indicated that the milking interval is the most important source of variation for yield ratios. Adjustment factors for estimating daily milk yield from single milking weights were derived through regression analysis of direct and inverse yield ratios on the length of the milking interval. Daily milk yield was estimated more precisely and accurately when adjustment factors were used than when single milking weights were doubled. In conclusion, alternative recording of a.m. and p.m. milking weights led to reliable estimates of milk yields.
In the modern pork industry, selection of high intramuscular fat (IMF) in pigs is necessary to improve pork quality. Ultrasound has been used previously to predict subcutaneous fat thickness and IMF in the longissimus muscles of line pigs and Real-time ultrasound has also been reported as a reliable method for estimating IMF in live pigs. So we estimate the correlation between meat quality traits and IMF percentage to investigate the possibility of utilizing real-time ultrasound technology for predicting IMF percentage in line pigs to improve pork quality. The genetic and phenotypic correlations for chemical intramuscular fat (CIMF) and ultrasound intramuscular fat (UIMF) were estimated to be 0.75 and 0.76, respectively. These results suggest that genetic factors strongly influence meat quality. The genetic and phenotypic correlation between UIMF and CIMF were 0.75, 0.76, respectively. The heritability of UIMF and CIMF were 0.48 and 0.50, respectively. So we concluded that CIMF can be replaced with UIMF and Ultrasound machines can be used to test IMF in live swine. In future, UIMF can be utilized to improve pork quality as an alternative to CIMF.
In virucidal efficacy testing, the chemical inactivation cannot be determined for all viruses due to the difficulties or the inability to culture sufficiently or the risk of exposure to the viruses. Therefore, disinfectants against these viruses could be evaluated by different methods and surrogate viruses are used as alternative. In this study we developed a method for efficacy testing of veterinary disinfectants using one of the candidate surrogate viruses, bacteriophage MS2, as part of the research on the selection of surrogate viruses for efficiency of efficacy testing of veterinary disinfectants. This method is based on the Animal and Plant Quarantine Agency (APQA) guidelines for efficacy testing of veterinary disinfectants. Bacteriophage and disinfectant are reacted in suspension in accordance with the APQA guidelines and then a newly established double agar layer method is applied for the efficacy test. The double agar layer method is summarized as follows: 1) The bottom agar with 1.5% agar is boiled and cooled before poured into petri dishes at volume of 20 mL, and dried under biological safety cabinet. 2) The top agar with 0.7% agar is boiled and kept at 50℃ before E. coli culture was seeded. 3) The serially diluted bacteriophage MS2-disinfectant mixtures 0.05 mL and E. coli host 0.01 mL (OD600 0.2~0.3) are mixed with 5 mL of top agar and incubate them at 50℃ for 5 min for reaction. 4) The resulting mixture is poured over top of a bottom agar plate and rocked sufficiently to ensure that the top agar covers the entire surface of the bottom agar. 5) The double agar layer is then placed under biological safety cabinet to allow the agar layer to solidify and subsequently incubated at 37℃ for 24 hr. 6) Following incubation, the plates may be inspected for plaques and record results.
Proceedings of the National Institute of Ecology of the Republic of Korea
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v.4
no.1
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pp.49-62
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2023
Phthalates are animal carcinogens. Potassium hydrogen phthalate (KHP), which has the least complicated structure among phthalates, is used for the analysis of total organic carbon and formaldehyde. However, its toxicity has not been confirmed. A 24-hour acute toxicity test was performed using Daphnia magna, a water flea used to evaluate aquatic toxicity owing to its high sensitivity. The lowest observed effect concentration of KHP was found to be 240 mg/L. The effects of phosphorus, nitrogen, and Cr(6+), which are able to be discharged along with KHP, were also confirmed using tests. At 240 mg/L KHP, toxicity increased as phosphorus, nitrogen, and Cr(6+) increased. In addition, tests were performed to confirm the half maximal effective concentration of KHP. Through 10 test repetitions, the average ecotoxicity value was found to be 0.3, the average half maximal effective concentration was 327.75 mg/L, and the coefficient of variation (%) was 3.16%; because the latter value is lower than 25%, which is what is generally suggested for the water pollution standard method, the reproducibility of the tests is sufficient to replace the existing standard reference toxicity test that uses potassium dichromate. In addition, the half maximum effective concentration of potassium hydrogen phthalate is approximately 218 times more than that of potassium dichromate; therefore, toxicity is relatively low. In conclusion, KHP is a feasible alternative to the highly toxic potassium dichromate for performing the standard reference toxicity test.
Objectives Effects of nanoparticles including zinc oxide nanoparticles, titanium oxide nanoparticles, and their mixtures on skin corrosion and irritation were investigated by using in vitro 3D human skin models ($KeraSkin^{TM}$) and the results were compared to those of an in vivo animal test. Methods Skin models were incubated with nanoparticles for a definite time period and cell viability was measured by the 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5-diphenyltetrazolium bromide method. Skin corrosion and irritation were identified by the decreased viability based on the pre-determined threshold. Results Cell viability after exposure to nanomaterial was not decreased to the pre-determined threshold level, which was 15% after 60 minutes exposure in corrosion test and 50% after 45 minutes exposure in the irritation test. IL-$1{\alpha}$ release and histopathological findings support the results of cell viability test. In vivo test using rabbits also showed non-corrosive and non-irritant results. Conclusions The findings provide the evidence that zinc oxide nanoparticles, titanium oxide nanoparticles and their mixture are 'non corrosive' and 'non-irritant' to the human skin by a globally harmonized classification system. In vivo test using animals can be replaced by an alternative in vitro test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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