연속형 $CO_2$ 레이저와 펄스형 $CO_2$ 레이저를 이용한 돼지 피부절개 시 창상 치유에 미치는 영향을 평가하고자 본 실험을 실시하였다. 다섯 마리의 돼지(Landrace x Yorkshire) (45-51 kg, 4-6 개월령, 수컷 3마리, 암컷 2마리)를 이용 하였고, 각각의 돼지에서 우측 및 좌측의 등쪽 피부에 대칭적으로 연속형 $CO_2$ 레이저와 펄스형 $CO_2$ 레이저를 이용하여 절개($2{\times}2{\times}2cm^2$) 하였다. 양측 피부 절개는 Maxon 3-0 를 이용하여 봉합하였다. 수술 후 3, 7, 14, 21일에 병리조직학적 검사를 실시하였다. 창상 부위의 재상피화는 연속형 $CO_2$ 레이저 군에 비해 펄스형 $CO_2$ 레이저군에서 더 많이 이루어졌다. 육아조직 형성은 창상후 경과일 3일에 펄스 $CO_2$ 레이저군에서 유의적으로 높게 나타났다(P < 0.05). 섬유아세포는 창상후 경과일 7일에 펄스형 $CO_2$ 레이져군에서 유의적으로 많게 형성되었다(P < 0.05). 결론적으로 피부절개 시에 있어서 펄스형 $CO_2$ 레이저는 연속형 $CO_2$ 레이저에 비하여 재상피화, 육아조직형성 및 섬유아세포가 더 높게 나타났으며, 레이저 시술에 따른 조직손상을 적게 나타내었다. 따라서 피부절개 시에 있어서 펄스형$CO_2$ 레이저가 연속형 $CO_2$ 레이저 보다 더 적합할 것으로 판단된다.
Biodegradable barrier membrane has been demonstrated to have guided bone regeneration capacity on the animal study. The purpose of this study is to evaluate the effects of cultured calvarial cell inoculated on the biodegradable barrier membrane for the regeneration of the artificial bone defect. In this experiment 35 Sprague-Dawley male rats(mean BW 150gm) were used. 30 rats were divided into 3 groups. In group I, defects were covered periosteum without membrane. In group II, defects were repaired using biodegradable barrier membrane. In group III, the defects were repaired using biodegradable barrier membrane seeded with cultured calvarial cell. Every surgical procedure were performed under the general anesthesia by using with intravenous injection of Pentobarbital sodium(30mg/Kg). After anesthesia, 5 rats were sacrificed by decapitation to obtain the calvaria for bone cell culture. Calvarial cells were cultured with Dulbecco's Modified Essential Medium contained with 10% Fetal Bovine Serum under the conventional conditions. The number of cell inoculated on the membrane were $1{\times}10^6$ Cells/ml. The membrane were inserted on the artificial bone defect after 3 days of culture. A single 3-mm diameter full-thickness artificial calvarial defect was made in each animal by using with bone trephine drill. After the every surgical intervention of animal, all of the animals were sacrificed at 1, 2, 3 weeks after surgery by using of perfusion technique. For obtaining histological section, tissues were fixed in 2.5% Glutaraldehyde (0.1M cacodylate buffer, pH 7.2) and Karnovsky's fixative solution, and decalcified with 0.1M disodium ethylene diaminetetraacetate for 3 weeks. Tissue embeding was performed in paraffin and cut parallel to the surface of calvaria. Section in 7${\mu}m$ thickness of tissue was done and stained with Hematoxylin-Eosin. All the specimens were observed under the light microscopy. The following results were obtained. 1 . During the whole period of experiment, fibrous connective tissue was revealed at 1week after surgery which meant rapid soft tissue recovery. The healing rate of defected area into new bone formation of the test group was observed more rapid tendency than other two groups. 2 . The sequence of healing rate of bone defected area was as follows ; test group, positive control, negative control group. 3 . During the experiment, an osteoclastic cell around preexisted bone was not found. New bone formation was originated from the periphery of the remaing bone wall, and gradually extended into central portion of the bone defect. 4 . The biodegradable barrier membrane was observed favorable biocompatibility during this experimental period without any other noticeable foreign body reaction. And mineralization in the newly formed osteoid tissue revealed relatively more rapid than other group since early stage of the healing process. Conclusively, the cultured bone cell inoculated onto the biodegradable barrier membrane may have an important role of regeneration of artificial bone defects of alveolar bone. This study thus demonstrates a tissue-engineering the approach to the repair of bone defects, which may have clinical applications in clinical fields of the dentistry including periodontics.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제34권3호
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pp.250-265
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2008
Distraction osteogenesis is a well-established clinical treatment for limb length discrepancy and skeletal deformities. Appropriate mechanical tension-stress is believed not to break the callus but rather to stimulate osteogenesis. In contrast to fracture healing, the mode of bone formation in distraction osteogenesis is primarily intramembranous ossification. Although the biomechanical, histological, and ultrastructural changes associated with distraction osteogenesis have been widely described, the basic biology of the process is still not well known. Moreover, the molecular mechanisms in distraction osteogenesis remain largely unclear. Recent studies have implicated the growth factor cascade is likely to play an important role in distraction. And current reserch suggested that mechanical tension-stress modulates cell shape and phenotype, and stimulates the expression of the mRNA for bone matrix proteins. The purpose of this study is to examine the pattern of expression of growth factors($TGF-{\beta}1$, IGF-I, bFGF) and extracellular matrix proteins(osteoclacin, osteonectin) related to osteogenesis by osteodistraction of the mandible in rabbits. 24 rabbits is used for this experiment. Experimental group are gradual distraction(0.7mm, twice/day), acute distraction(1.4mm, twice/day) and control group is only osteotomized. After 5 days latency, osteotomic site is distracted for each 7 days and 3.5 days. Consolidation period is 28 days. The animal is sacrificed at the 3th, 7th, 14th, 28th. The distracted bone is examined by immunohistochemical analysis and RT-PCR analysis. The results obtained from this study were as follow : No significant difference was found on clinical examination according to distraction rate, but gradual distraction was shown to improve regenerate bone formation on radiographic and histologic examination. Growth factors and extracelluar matrix proteins expression increased in distraction group than control group. From these results, it could be stated that graudal distraction is shown to improve and accelerate bone formation and mechanical stress like distraction has considerable effects on osteogenesis related factors. And rabbit is the most appropriate animal model for further reseach on the molecular mechanisms that mediate osteodistraction. It is believed that understanding the biomolecular mechanisms that mediate distraction osteogenesis may guide the development of targeted strategies designed to improve distraction osteogenesis and accelerate bone healing.
Purpose: The aim of this study was to assess the possible paracrine effect of bone morphogeneticprotein-2 (BMP-2) at the experimental site on the adjacent control site for validating a rabbit calvarial defect model as a means of verifying the effect of BMP-2. Methods: Sixteen rabbits were divided into two groups (n=8 in each) according to whether or not BMP-2 would be used. Two circular defects (8 mm in diameter) were created side by side, 2 mm apart, in the calvarium of all of the rabbits. In each animal, one of the defects was grafted with either BMP-2-loaded carrier or carrier material alone. The control defects adjacent to these grafted defects, designated CB (the nongrafted defect adjacent BMP-2-loaded carrier-grafted defect) and CC (the nongrafted defect adjacent to carrier only-grafted defect), respectively, were the focus of this study, and were filled only with a blood clot in all of the animals. Histologic observation and histomorphometric analysis were performed at 2 and 8 weeks (n=4 animals per point in time) after surgery. Results: There was no noteworthy difference in the healing pattern, and no statistically significant differences in histomorphometric parameters such as the defect closure, new bone area, or total augmented area between the CC and CB groups. Conclusions: The results of this study suggest that rabbit calvarial defects separated by a distance of 2 mm are suitable for evaluating the effects of BMP-2 and the control defect can be regarded not to be affected by BMP-2 applied defect.
본 연구는 성체우의 FS, MS, C-MS를 배양액에 첨가하여 세포증식과 난포의 성장과 배란에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 실시하였다. 세포증식은 세포수와 MTT assay을 실시하여 확인하였다. 그 결과 세포증식은 혈청첨가 배양액에 따라 유의적인 차이를 나타내었다. 특히 근육위성세포의 세포증식은 MS를 첨가한 배양액에서 높은 반면 면역세포의 증식은 FBS에서 배양한 세포에 비해 낮은 것을 확인하였다. 또한 난포의 성장 및 배란을 관찰한 결과 난포의 성장에 유의한 차이가 없었으나 군간 차이를 보였으며 배란율과 비례적이었고, 배란율은 FBS와 C-MS가 첨가된 배양액에서 유의적으로 높은 것을 관찰할 수 있었다(P<0.05). FBS군과 C-MS 군 간에는 차이가 없었다. 3T3-L1 세포에서 창상치유는 FS에서 배양한 세포에서 빠른 회복을 나타냈으며, 증식은 MS에서 높게 나타났다(p<0.001). 따라서 본 결과는 세포배양 과정에서 세포에 따른 혈청의 선택은 매우 중요하다는 근거자료를 제시 하였으며, 분리 된 성별 특이 한우 혈청은 FBS의 대체 물질로서 사용이 가능할 것으로 사료된다.
Shuaibing Shi;Hefan Dong;Xiaoyou Chen;Siqi Xu;Yue Song;Meiting Li;Zhiling Yan ;Xiaoli Wang ;Mingfu Niu ;Min Zhang;Chengshui Liao
Journal of Veterinary Science
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제24권3호
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pp.44.1-44.17
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2023
Background: Antibiotic resistance is a significant public health concern around the globe. Antimicrobial peptides exhibit broad-spectrum and efficient antibacterial activity with an added advantage of low drug resistance. The higher water content and 3D network structure of the hydrogels are beneficial for maintaining antimicrobial peptide activity and help to prevent degradation. The antimicrobial peptide released from hydrogels also hasten the local wound healing by promoting epithelial tissue regeneration and granulation tissue formation. Objective: This study aimed at developing sodium alginate based hydrogel loaded with a novel antimicrobial peptide Chol-37(F34-R) and to investigate the characteristics in vitro and in vivo as an alternative antibacterial wound dressing to treat infectious wounds. Methods: Hydrogels were developed and optimized by varying the concentrations of crosslinkers and subjected to various characterization tests like cross-sectional morphology, swelling index, percent water contents, water retention ratio, drug release and antibacterial activity in vitro, and Pseudomonas aeruginosa infected wound mice model in vivo. Results: The results indicated that the hydrogel C proved superior in terms of cross-sectional morphology having uniformly sized interconnected pores, a good swelling index, with the capacity to retain a higher quantity of water. Furthermore, the optimized hydrogel has been found to exert a significant antimicrobial activity against bacteria and was also found to prevent bacterial infiltration into the wound site due to forming an impermeable barrier between the wound bed and external environment. The optimized hydrogel was found to significantly hasten skin regeneration in animal models when compared to other treatments in addition to strong inhibitory effect on the release of pro-inflammatory cytokines (interleukin-1β and tumor necrosis factor-α). Conclusions: Our results suggest that sodium alginate -based hydrogels loaded with Chol-37(F34-R) hold the potential to be used as an alternative to conventional antibiotics in treating infectious skin wounds.
Recently, frequently using hyperbaric oxygen therapy is known for its effectiveness on the healing of problem wounds such as osteomyelitis, osteoradionecrosis and gas gangrenous wound etc. The main objectives of this study was to determine the best protocol of its application of hyperbaric oxygen therapy. Author used 238 rats (Sprague-Dawley strain) deviding into 2 Groups, experimental I group for skin and experimental II group for palatal mucosal ischemic wounds, and observed its effects by microscopically. The obtained results summarized as follows; 1. Severe infiltration of inflammatory cells was observed in initial stages of both control and experimental I group. The infiltration showed decreasing tendency at 5th day of experimental D, E, F group while at 8th day in control group In d, f of experimental II group showed decreasing tendency at 8th experimental day while at 12th day in control group. 2. Macrophages appeared at 2nd day in D of experimental I group while at 6th day in control group. In d, f of experimental II group appeared at 6th day while at 10th day in control group. 3. As to the proliferation of capillary blood vessels showed at 3-4 day in most of experimental I group severely while at 8th day in control group. In experimental II group, it was at 8th day and 12th day respectively. 4. The proliferation of fibroblasts showed rather rapider in experimental I group, at 4-6th day, while at 8th day in control group. In experimental II group, it was at 8th day and 12th day respectively. 5. As to the collagen formations, it was at 4th day in experimental I group while at 8th day in control group. In experimental II group, it was at 6th day and 10th day respectively. 6. 5 rats (2.0 %) in E group and 8 rats (3.4 %) in f group showed oxygen toxic reaction, such as unstable attitude and tremor, during the experiments. This hyperbaric oxygen animal experiments disclosed excellent effects on the ischemic wound healing and it is thought to be the best protocol of its application was on D group (2.5 ATM. and 2 hrs, exposure).
Lee, Woo-Young;Um, In Chul;Kim, Min-Keun;Kwon, Kwang-Jun;Kim, Seong-Gon;Park, Young-Wook
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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제36권6호
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pp.280-284
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2014
Purpose: This study evaluated woven silk textile for burn wound dressing materials in an animal model. Methods: Ten rats were used in this experiment. Full-thickness $2{\times}2cm$ burn wounds were created on the back of the rats under anesthesia. In the experimental group, the wounds were treated with three different dressing materials from woven silk textile. In the control group, natural healing without any dressing material was set as control. The wound surface area was measured at five days, seven days, and 14 days. Wound healing was evaluated by histologic analysis. Results: There were no statistically significant differences among groups at five days post injury. The mean defect size at seven days was largest in Group 3 ($462.87mm^2$), and smallest in Group 1 ($410.89mm^2$), not a significant difference (P=0.341). The mean defect size at 14 days was smallest at the Group 3 ($308.28mm^2$) and largest in the control group ($388.18mm^2$), not a significant difference (P=0.190). The denuded area was smaller in Group 1 ($84.57mm^2$) and Group 2 ($82.50mm^2$) compared with the control group ($195.93mm^2$), not statistically significant differences (P=0.066, 0.062). The difference between Group 3 and control was also not statistically significant (P=0.136). In histologic analysis, the experimental groups re-epithelialized more than control groups. No evidence was found of severe inflammation. Conclusion: The healing of burn wounds was faster with silk weave textile more than the control group. There was no atypical inflammation with silk dressing materials. In conclusion, silk dressing materials could be used to treat burn wounds.
The main goal of periodontal therapy is the regeneration of periodontal tissue which has been lost due to destructive periodontal diseases. Although conventional forms of periodontal therapy show sound clinical results, the healing results in long junctional epithelium. There have been numerous materials and surgical techniques developed for new attachment and bone regeneration. Bone grafts can be catagorized into: autografts, allografts, xenografts and bone substitutes. Synthetic bone substitute materials include hydroxyapatite, tricalcium phosphate, calcium carbonate, and Plaster of Paris. Calcium sulfate has found its use in dental practice for the last 30 years. Recent animal studies suggest that periodontal regeneration in 3 wall intrabony defect may be enhanced by the presence of calcium sulfate. And it is well known that 2 wall & 1 wall defect have less osteogenic potential, So we need to study the effect of calcium sulfate in 1 wall intrabony defect in dogs. The present study evaluates the effects of calcium sulfate on the epithelial migration, alveolar bone regeneration and cementum formation in intrabony defects of dogs. Four millimeter-deep one-wall intrabony defects were surgically created in the mesial aspect of anterior teeth and mesial & distal aspects of premolars. The test group received calcium sulfate grafts with a flap procedure. The control underwent flap procedure only. Histologic analysis following 8 weeks of healing revealed the following results: 1. The lengths of junctional epithelium were: 2.52mm in the control, and 1.89mm in the test group. There was no statistical significance between the two groups. 2. Alveolar bone formation were: 0.61mm in the control, and 1.88mm in the test group. There was a statistically significant difference between the two groups (p<0.05). 3. Cementum formations were: l.lmm in the control, and 2.46mm in the test group. There was a statistically significant difference between the two groups (p<0.05). 4. The length of CT adhesion were: O.97mm in the control, and 0.17mm in the test group. There was no statistically significant differences between the two groups These results suggest that the use of calcium sulfate in intrabony defects has little effect on junctional epithelium migration, but has significant effects on new bone and new cementum formations.
Kim, Min-Keun;Yoo, Ki-Yeon;Kwon, Kwang-Jun;Kim, Seong-Gon;Park, Young-Wook;Lee, Kwang-Gill;Jo, You-Young;Kweon, Hae-Yong
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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제36권3호
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pp.111-115
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2014
Purpose: This study evaluated powdered burn wound dressing materials from wild silkworm fibroin in an animal model. Methods: Fifteen rats were used in this experiment. Full-thickness $2{\times}2cm$ burn wounds were created on the back of rats under anesthesia. In the two experimental groups, the wounds were treated with two different dressing materials made from silkworm fibroin. In the Control Group, natural healing without any dressing material was set as control. The wound surface area was measured at five days, seven days and 14 days. Wound healing was evaluated by histologic analysis. Results: By gross observation, there were no infections or severe inflammations through 14 days post-injury. The differences among groups were statistically significant at seven days and 14 days, postoperatively (P<0.037 and 0.001, respectively). By post hoc test, the defect size was significantly smaller in experimental Group 1 compared with the Control Group and experimental Group 2 at seven days postoperatively (P=0.022 and 0.029, respectively). The difference between Group 1 and Group 2 was statistically significant at 14 days postoperatively (P<0.001). Group 1 and control also differed significantly (P=0.002). Group 1 showed a smaller residual scar than the Control Group and Group 2 at 14 days post-injury. Histologic analysis showed more re-epithelization in Groups 1 and 2 than in the Control Groups. Conclusion: Burn wound healing was accelerated with silk fibroin spun by wild silkworm Antheraea pernyi. There was no atypical inflammation with silk dressing materials. In conclusion, silk dressing materials can be used for treatment of burn wound.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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