• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제36권2호
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• pp.361-373
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• 2006

치주질환의 진행이 나이에 의해 영향을 받는다는 사실은 알려져 있으나 노화에 따른 치주조직 세포의 기능적인 변화에 관한 사실은 많이 알려져 있지 않다. 노화에 따른 세포의 노화가 치주질환의 진행에 어떠한 여향을 끼치는가를 아는 것은 중요하다. 염증 상태에서 nitric oxide (NO)는 조직 파괴에 관여하는 인자로 작용하여 치주질환의 진행에 관여하는 것으로 알려져 있다. 따라서 이 연구는 사람의 치은에서 배양된 치은섬유아세포를 이용하여 세포의 노화에 따른 NO와 이의 합성효소인 inducible nitric oxide synthase (iNOS)의 발현을 알아봄으로써 세포의 노화가 치주질환의 진행에 끼치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 10세의 환자와 55세의 환자에서 각각 채취한 치은에서 배양된 세포와 10세의 환자에서 채취한 세포를 계속적인 계대배양을 통해 얻은 실험실 상 노화된 세포를 포함하여 총 3 종류의 치은섬유세포를 실험에 이용하였다. Hot phenol-water extraction을 통해 추출된 Porphyromonas, gingivalis ATCC 33277 lipopolysaccharide (LPS)와 재조합 $IFN-{\gamma}$ 를 세포에 적용시켜 Griess assay를 통해 조건화된 배지에서 NO를 측정하였다. 20세와 55세의 환자에서 채취된 치은 조직과 총 3 종류의 배양된 세포에 NOS-II 항체를 적용시켜 iNOS 단백질 발현을 관찰하였다. Total RNA를 추출하여 RT-PCR를 통해 iNOS mRNA의 발현을 분석하였다. 치은섬유아세포에서 NO는 자발적으로 발생되었고, 이러한 발현은 젊은 세포보다 노화된 세포에서 강하였다. P, gingivalis LPS와 제조합 $IFN-{\gamma}$는 치은섬유아세포에서 NO의 발현을 증가시켰고, 이러한 발현은 젊은 세포보다 노화된 세포에서 강하였다. 면역조직화학 염색에서 iNOS 단백질은 젊은 사람과 노화된 사람의 치은 조직 모두에서 치은섬유아세포와 상피의 기저층 세포와 염증세포에서 발현되었으나 노화에 따른 발현의 차이를 구별할 수는 없었다. 세포의 면역염색에서 iNOS 단백질은 노화된 세포에서 강하게 발현되었고 이러한 발현은 LPS와 $IFN-{\gamma}$ 에 의해 강화되었다. LPS와 $INF-{\gamma}$ 의 조건이 주어지지 않은 상태에서 iNOS mRNA는 젊은 세포에서보다 노화된 세포에서 강하게 발현되었다. 이러한 결과를 통해 세포의 노화가 NO와 iNOS 발현을 증가시킴으로서 치주질환의 진행에 영향을 끼칠 수 있음을 시사하였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제35권3호
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• pp.623-634
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• 2005

Human periodontal ligament fibroblast(hPDLF) is very important to cure periodontal tissue because it can be diverged into various cells. This study examined the expression of MMP-1, TIMP-1, periodontal ligament specific PDLs22, Type I collagen, Fibronectin, TIMP-2, telomerase mRNA in a replicative senescence of hPDLF. The periodontal ligament tissue was obtained from periodontally healthy and non-carious human teeth extracted for orthodontic reasons at the Chosun University Hospital of Dentistry with the donors' informed consent. The hPDLF cells were cultured in a medium containing Dulbecco's modified Eagle medium(DMEM, Gibco BRL, USA) supplemented with 10% fetal bovine serum(FBS, Gibco BRL, USA) at 37C in humidified air with 5% $CO_2$. For the reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) analysis, the total RNA of the 2, 4, 8, 16, 18, and 21 passage cells was extracted using a Trizol Reagent(Invitrogen, USA) in replicative hPDL cells. Two passage cells, i.e. young cells, served as the control, and ${\beta}-actin$ served as the internal control for RT-PCR The results of this study about cell morphology and gene expression according to aging of hPDLF using RT-PCR method are as follows: 1. The size of hPDLF was increased with aging and it was showed that the hPDLF was dying in the final passage. 2. PDLs22 mRNA was expressed in young hPDLF of the two, four, and six passage. 3. TIMP-1 mRNA was expressed in young hPDLF of the two and four passage. 4. There was a tendency that MMP-1 mRNA was weakly expressed over eighteen. 5. Type 1 collagen mRNA was expressed in almost all passages, but it was not expressed in the final passage. 6. Fibronectin mRNA was observed in all passages and it was weakly expressed in the final passage. 7. TIMP-2 and telomerase mRNA were not expressed in this study. Based on above results, it was observed that PDLs22, Type 1 collagen, Fibronectin, MMP-1. and TIMP-1 mRNA in hPDLF were expressed differently with aging. The study using the hPDLF that is collected from healthy patients and periodontitis patients needs in further study.

• 대한한의학방제학회지
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• 제29권4호
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• pp.321-329
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• 2021

This case study reports the effects of complex Korean medicine treatment, including Nangan-jeon, on Lambert-Eaton myasthenic syndrome (LEMS) accompanied by chronic constipation and abdominal pain as the main symptoms. A 39-year-old woman diagnosed with LEMS with major symptoms, including chronic constipation and acute abdominal pain, received Western treatment. The treatment efficacy was weak and symptoms recurred, so the patient received outpatient treatment and 13 days of hospitalization for active Korean medicine treatment, including Nangan-jeon. During outpatient treatment and hospitalization, defecation frequency and the numeric rating scale (NRS) for abdominal pain and abdominal cold feeling were measured. The NRS for abdominal pain and cold decreased from 8 at admission to 3 and 0, respectively, at discharge. Defecation frequency increased significantly from once or twice a month to once every 2-3 days during hospitalization. This study results that complex Korean medicine treatment, including Nangan-jeon may be useful for treating patients who mainly complain of autonomic neurological symptoms, among patients diagnosed with LEMS. In addition, it is believed that it could be basic data applicable to more LEMS patient treatment cases.

• Nutrition Research and Practice
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• 제12권6호
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• pp.486-493
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• 2018

BACKGROUND/OBJECTIVE: The honeysuckle berry (HB) contains ascorbic acid and phenolic components, especially anthocyanins, flavonoids, and low-molecular-weight phenolic acids. In order to examine the potential of HB as a hepatoprotective medicinal food, we evaluated the in vitro anti-oxidant and anti-inflammatory activities of Korean HB (HBK) and Chinese HB (HBC). MATERIALS/METHODS: Antioxidant and anti-inflammatory effects of the extracts were examined in HepG2 and RAW 264.7 cells, respectively. The anti-oxidant capacity was determined by DPPH, SOD, CAT, and ARE luciferase activities. The production of nitric oxide (NO) as an inflammatory marker was also evaluated. The Nrf2-mediated mRNA levels of heme oxygenase-1 (HO-1), NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1 (Nqo1), and glutamate-cysteine ligase catalytic subunit (Gclc) were measured. The concentrations of HB extracts used were 3, 10, 30, 100, and $300{\mu}g/mL$. RESULTS: The radical scavenging activity of all HB extracts increased in a concentration-dependent manner (P < 0.01 or P < 0.05). SOD (P < 0.05) and CAT (P < 0.01) activities were increased by treatment with $300{\mu}g/mL$ of each HB extract, when compared to those in the control. NO production was observed in cells pretreated with 100 or $300{\mu}g/mL$ of HBC and HBK (P < 0.01). Treatment with $300{\mu}g/mL$ of HBC significantly increased Nqo1 (P < 0.01) and Gclc (P < 0.05) mRNA levels compared to those in the control. Treatment with $300{\mu}g/mL$ of HBK (P < 0.05) and HBC (P < 0.01) also significantly increased the HO-1 mRNA level compared to that in the control. CONCLUSIONS: Thus, the Korean and Chinese HBs were found to possess favorable in vitro anti-oxidant and anti-inflammatory activities. Nrf2 and its related anti-oxidant genes were associated with both anti-oxidant and anti-inflammatory activities in HB-treated cells. Further studies are needed to confirm these in vivo effects.

• 동의생리병리학회지
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• 제33권2호
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• pp.131-140
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• 2019

The objective of present study is to evaluate concentration-dependent in vitro anti-osteoarthritic (OA) effects of synergic mixed formula consisted of dried pomegranate juice concentrate powder, Eucommiae Cortex aqueous extract and Achyranthis Radix aqueous extract 5:4:1 (g/g) mixture on the primary cultured rat articular chondrocytes. First, any cytotoxic effect of mixture was observed using MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium Bromide) assay. Next, cyto-protective effect of test substances was evaluated by using the recombinant human interleukin $(rhIL)-1{\alpha}$ induced chondrocytes. In addition, anti-inflammatory effects were also observed on the lipopolysaccaride (LPS) treated chondrocytes through prostaglandin $E_2(PGE_2)$ productions and 5-lipoxygenase (LPO) activities, and inhibitory effects on matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9 activities were observed on $rhIL-1{\alpha}$ treated chondrocytes with their extracellular matrix (ECM) related mRNA expressions. No obvious cytotoxic effects of mixture were demonstrated. Inflammatory damages of chondrocytes and related ECM degradations induced by treatment of LPS or $rhIL-1{\alpha}$ were significantly and concentration-dependently inhibited by pretreatment of mixture from a concentration level of 0.001 mg/ml to 1 mg/ml. In addition, mixture showed $IC_{50}$ for $rhIL-1{\alpha}-induced$ MMP-2 and MMP-9 activities as 44.01 and $162.47{\mu}g/ml$, and also showed $EC_{50}$ for $rhIL-1{\alpha}-induced$ inhibition of collagen type II, SOX9 and aggrecan mRNA expression as 8.61, 10.79 and $4.47{\mu}g/ml$, respectively. It is observed that mixture showed concentration-dependent anti-inflammatory and cytoprotective ECM preserved effects on the primary cultured rat articular chondrocytes without cytotoxicity.

• 동의생리병리학회지
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• 제36권6호
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• pp.247-251
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• 2022

This study is to show the clinical effect of Korean medicine integrated treatment for medial collateral ligament tear with bone contusion by traffic accident. The patients were treated using Korean medicine integrated treatment including acupunture, pharmacoacupunture and herbal medication. The effect of treatment was measured by Western Ontario and McMaster Universities Arthritis Index (WOMAC), EuroQol-5 Dimension Index (EQ-5D) and Numeric Rating Scale (NRS). After treatment, case 1 improved WOMAC from 94 to 24, EQ-5D from -0.056 to 0.72, and NRS from 10 to 2. Case 2 showed an improvement in symptoms from WOMAC 91 to 14, EQ-5D from 0.077 to 0.862, NRS from 10 to 2.5. In addition, as a result of follow-up about 5 months after each onset, case 1 showed a further improvement with WOMAC 0, EQ-5D 0.95 and case 2 WOMAC 7, EQ-5D 0.913. These results suggest that Korean medicine integrated treatment might be a possible therapeutic option for the medial collateral ligament tear with bone contusion by traffic accident.

• 대한한의학방제학회지
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• 제31권1호
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• pp.53-65
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• 2023

Objectives : Present study investigated the hepatoprotective effects and the optimal mixing ratio of fermented Schizandrae Fructus Pomace (fSFP) and Hoveniae Semen Cum Fructus (HSCF) extract combination in carbon tetrachloride (CCl₄)-induced acute liver injury mice. Methods : ICR mice were orally administered with 200 mg/kg of fSFP, HSCF and mixtures of fSFP and HSCF [MSH (w:w); 1:1, 1:2, 1:4, 1:6, 2:1, 4:1, 6:1, and 8:1] for 7 consecutive days. Silymarin (100 mg/kg) was administered as a reference drug. 0.5 mL/kg of CCl₄ was injected intraperitoneally to induce acute liver injury. Body weight gain, relative liver weight, serum chemistry, histopathological analysis, and hepatic endogenous antioxidants capacities were observed. Results : All diverse combinations of MSH significantly reduced relative liver weight increase by CCl₄. In addition, MSH administrations significantly decreased the elevation of serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activities by CCl₄. Histopathological observation indicated that all MSH treatments significantly reduced the increase of degenerated hepatocytes, inflammatory cell infiltration, and histological activity index score by CCl₄. Moreover, all MSH administrations reduced the elevation of malondialdehyde contents, and ameliorated the reduction of hepatic glutathione contents, superoxide dismutase activity, and catalase activity. Among the various mixing ratio of MSH combinations, MSH 1:1 and 2:1 showed the most potent anti-oxidative stress, and hepatoprotective effect. Conclusion : Present results suggest that 1:1 and 2:1 combinations of MSH is promising herbal formulation with the hepatoprotective effect against oxidative stress.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제66권
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• pp.519-526
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• 2023

본 연구는 마우스 대식세포 유래 Raw264.7 세포주에서 황기와 산초 1:1 혼합물(AZM-1:1)의 면역 증진 효능을 탐색하였다. Raw264.7 세포에 100-400 ㎍/mL의 A ZM-1:1 처치는 세포 생존율의 변화 없이 inducible nitric oxide synthase mRNA의 발현 증가와 함께 nitric oxide의 생성을 통계적으로 유의하게 증가시켰다. 더불어 A ZM-1:1은 처치 농도 의존적으로 cyclooxygenase-2 mRNA의 유도와 함께 세포 배양액 중 prostaglandin E₂의 함량을 증가시켰다. 또한, AZM-1:1은 tumor necrosis factor-α, interleukin-1β, interleukin-6 및 monocyte chemoattractant protein-1의 전사를 촉진하였다. Immunoblot 분석을 통하여 AZM-1:1은 mitogen-activated protein kinase의 인산화를 증가시키고, inhibitory-κBα의 인산화를 매개한 분해를 촉진하며, p65의 인산화를 증가시킬 수 있음을 확인하였다. AZM-1:1의 처치는 녹색 형광으로 표지된 대장균 파편의 탐식작용을 촉진하였다. 따라서, 이상의 결과는 A ZM-1:1가 대식세포를 포함한 내재면역을 증진시키는 기능성 식의약 소재가 될 수 있음을 나타낸다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제40권11호
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• pp.1548-1555
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• 2011

본 연구에서는 흰쥐를 이용, 단감발효주의 항산화성과 알코올성 지방간 증상 완화에 미치는 영향을 조사하였다. Lieber-DeCarli 액체 표준식이만 공급받는 동물군을 대조군, 에탄올에 의한 열량 보충으로 대조군과 동일 열량의 액체식이를 공급받은 에탄올군, 에탄올군과 동일한 양의 알코올을 함유하는 단감발효주가 혼합된 액체식이를 공급받는 단감발효주군으로 하여 7마리씩 3그룹으로 나누어 6주간 사육하였다. 시작 전, 3주째, 그리고 6주째에 혈액을 채취하였고 간은 6주 혈액 채취 직후 적출되었다. 단감발효주의 총 페놀함량은 24.59 mg/100 mL이었고 SOD 유사활성은 20.9%이었으며 DPPH 라디칼 소거능은 27%로 나타났다. 6주간의 체중증가율은 대조군과의 비교에서 에탄올군에서는 유의적으로 감소되었으나 에탄올군과 단감발효주간의 비교에서는 차이가 없었다. 혈액의 중성지방 농도는 에탄올군과 단감발효주군에서 유의적으로 감소되었다. 혈액의 ALT, AST 농도는 대조군에 비해서 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나 단감발효주군에서는 유의적으로 감소하였다. 간조직의 사진촬영에서와 유사하게 간조직의 총지방량은 대조군에 비해 에탄올군에서 유의적으로 증가되었고 단감 발효주군에서는 유의적으로 감소하였다. 간조직의 주요 지방 종류별 총지방산 비교에서도 중성지방 분획의 지방산들은 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나 단감발효주군에서는 유의적으로 감소되는 경향을 보였다. 본 실험을 통해 단감발효주가 알코올 섭취로 증가된 혈중 지질 수준과 간기능 지표 수준을 개선시키는 효과를 나타냈으며 지방간 형성이 유의적으로 억제되는 것을 간조직 지방분석을 통해 확인하였다. 이는 전통기능성주인 단감발효주에 포함된 다양한 폴리페놀이 알코올에 의한 간 손상을 보호하는데 기여할 수 있음을 증명한 실험결과로 판단된다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제35권1호
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• pp.217-234
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• 2005

혈소판 농축 혈장은 구강과 안면부 재건수술에 새로이 사용되는 유용한 첨가물이다. 혈소판은 상처 치유과정에서 매우 중요하며, 혈소판은 상처부위에 빠르게 도달하여 응고를 형성한다. 그리고 다양한 성장인자를 분비한다. 이러한 성장인자는 골의 형성과 혈관의 증가, 골 이식재의 치유에 관여하는 것으로 생각된다. 본 연구의 목적은 실험 동물을 통하여 혈소판 농축 혈장에 함유된 혈소판의 정량화를 통한 성장인자 함유량을 추정하고, 방사선학적, 조직학적 평가를 통해 혈소판 농축 혈장이 초기의 골형성에 미치는 영향에 대한 평가를 하는데 있다. 15마리의 가토 두개골에 6mm trephine bur(외경 8mm)를 이용하여 경뇌막의 손상을 주지 않도록 하면서 4개의 결손부를 형성하였다. 각각의 두개골 결손부는 $Bio-Oss^{(R)}$만 이식한 군, PRP만 이식한 군, PRP와 $Bio-Oss^{(R)}$를 혼합하여 이식한군, 그리고 아무것도 이식하지 않은 군을 대조군으로 설정하였다. 각각의 재료를 이식한 후 비흡수성 차폐막($Tefgen^{(R)}$)을 위치시키고 흡수성 봉합사로 일차봉합을 시행하였다. 각 군 당 술 후 1, 2, 4주의 치유기간을 설정하였다. 동물을 희생시키고 두개골을 절제하였다. 먼저 방사선학적인 골 밀도 측정을 시행하고, 조직학적 평가를 위해 통법에 따라 조직 표본을 제작한 후 광학현미경으로 관찰하였다. 또한 가토 귀 변연정맥에서 채취한 10 ml의 혈액을 원심분리하여 혈소판 함유량을 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 혈소판 농축 혈장은 일반 혈액에 비해 약 4.02배 많은 수의 혈소판이 함유되어 있었다. 2. 방사선적인 평가에서 1, 2, 4주 사이에 대조군과 비교하여 $Bio-Oss^{(R)}$에 PRP를 이식한 군에서 골의 밀도는 큰 차이를 보이고 있다(p<0.01). 하지만, 동일한 시기에 PRP만 이식한 군과 대조군의 차이는 발견할 수 없었으며 (p>0.05), $Bio-Oss^{(R)}$만 이식한 군과 $Bio-Oss^{(R)}$에 PRP를 이식한 군의 차이 또한 발견할 수 없었다(p>0.05). 3. 조직학적 평가에서 모든 이식재는 시간이 경과할수록 골 형성이 증가함을 알 수 있었다. 대조군에 비해 PRP만 이식한 군에서 더 두꺼운 섬유성 결합을 보이고 있다. 대조군과 PRP만 이식한 군과 비교해 $Bio-Oss^{(R)}$와 $Bio-Oss^{(R)}$에 PRP를 혼합 이식한 군에서 골의 형성이 더 진행됨을 알 수 있었다. $Bio-Oss^{(R)}$에 PRP를 혼합 이식한 군이 $Bio-Oss^{(R)}$만 이식한 군에서보다 더 많은 신생골 형성을 관찰할 수 있다. 이상의 결과에서 가토의 두개골 결손부에 $Bio-Oss^{(R)}$에 PRP를 혼합 이식하였을 경우 결손부의 초기 골 형성을 촉진 할 수 있음을 시사하였다.