In superconductive digital logic circuits, D2 cells can be used to compose a decoder an important component of an Arithmetic Logic Unit (ALU). In this wor, we simulated D2 cell by using WRspice. D2 cell has one input, one switch input, and two outputs (output1 and output2). D2 cell functions in such way that output1 follows the input and output2 is the complement of the input data, when the switch input is "0, ". However, when there is a switch input "1, " the opposite output signals are generated. In this paper, we optimized a D2 cell by using WRspice, and obtained the minimum margin of 26%. Our optimized D2 cell will play a key role in the ALU fabrication.the ALU fabrication.
RSFQ (Rapid Single Flux Quantum) circuits are used in many practical applications. RSFQ DFFC (Delay Flip-Flop with complementary outputs) circuits can be used in a RAM, an ALU (Arithmetic Logic Unit), a microprocessor, and many communication devices. A DFFC circuit has one input, one switch input, and two outputs (output l and output 2). DFFC circuit functions in such way that output 1 follows the input and output 2 is the complement of the input when the switch input is "0." However, when there is a switch input "1."the opposite output signals are generated. In this work, we have designed an RSFQ DFFC circuit based on 1 ㎄/$\textrm{cm}^2$ niobium trilayer technology. As circuit design tools, we used Xic, WRspice, and Lmeter After circuit optimization, we could obtain the bias current margins of the DFFC circuit to be above 32%.
Polymorphism of the lipoprotein lipase (LPL) gene which plays an important role in regulation of lipid deposition was analysed in two red seabream (pagrus major) populations (KF4, cultured KORDI line, n=100 : JPN, imported from Japan, n=100). We amplified a DNA fragment (1,091 bp) including the exon 2 region of the LPL gene, and conducted PCR-RFLP analysis using MspI and AluI. The PCR products were also sequenced. Two alleles (A and B) were found in MspI digestion and Sve alleles (A, B, C, D and E) in AluI digestion. The sequenced data revealed four nucleotide substitutions including one transversion at the MspI recognition site (nt 2,235, $C{\rightarrow}10$) and three transitions at the AluI recognition sites (nt 1,721, $A{\rightarrow}G;$ nt 2,319, $C{\rightarrow}T;$ nt 2,319, $T{\rightarrow}C$). Among them, substitutions at the nt 2,235 and 2,319 sites which are located in the exon 2 were proved to be silent point mutations. MspI polymorphism resulted in 3 genotypes, and the allele frequency was significantly different between the two fish populations, KF4 and JPN. In the case of AluI polymorphism, the 5 alleles (A, B, C, D, E) comprised 12 genotypes of the 5 alleles. KF4 population, alleles D and I were specific to the LPL gene Polymorphisms would be useful DNA markers for red seabream population.
Vibrio unlnificus ATCC 27562의 16S rRNA 유전자를 PCR법과 제한효소절단법으로 분석 하여 얻은 결과는 다음과 같다. 1. 고안된 한쌍의 primer로 PCR을 시행하여 얻은 산물은 약 1.3Kb 였다. 2. PCR산물을 여섯가지의 제한 효소로 절단하여 얻은 단편들은 아래와 같다. BamH I: 어떤 restriction fragment도 만들지 않았다. Alu I : 약 400bp와 200bp의 두가지 fragment를 생산하였다. Sau3A I : 약 70bp에서 450bp 사이에 세가지 fragment를 생산하였다. Hind III : 약 800bp와 500bp의 약간 큰 두가지 fragment를 생산하였다. Sal I : 약 500bp와 750bp의 두가지 fragment를 생산하였다. Sma I : 약 800bp와 470bp의 두가지 fragment를 생산하였다.
The motor neuron degeneration 2 (mnd2) mice carry a point mutation of A to T nucleotide transversion at the serine 276 residue of high temperature requirement A2 (HtrA2), resulting in losses of an AluI restriction enzyme site (5'AGCT3') and the HtrA2 serine protease activity. Moreover, dysfunctions of HtrA2 are known to be intimately associated with the pathogenesis of neurodegenerative diseases, including Parkinson's disease. Thus, this mnd2 mouse is an invaluable model for understanding the physiological role of HtrA2 and its pathological role in neurodegenerative diseases. Nevertheless, many molecular and cellular biologists in this field have limited experience in working with mutant mouse models due to the necessity of acquired years of the special techniques and knowledges. Herein, using the mnd2 mouse model as an example, we describe easy-to-use standard protocols for web-based analyses of target genes, such as HtrA2, and a novel approach for simple and accurate PCR-AluI-RFLP-based genotype analysis of mnd2 mice. In addition, band resolution of AluI-RFLP fragments was improved in 12% polyacrylamide gel running in 1X Tris-Glycine SDS buffer. Our study indicates that this PCR-AluI-RFLP genotype analysis method can be easily applied by the molecular and cellular biologist to conduct biomedical science studies using the other mutant mouse models.
Lipoprotein lipase (LPL)은 지방축적과 대사에 있어 중요한 효소로서 지방조직과 근육 내로의 지방산 유입을 조절하며, 여러 조직에서 합성되고, 조직 특이적인 방법으로 동물의 생리상태, 영양상태 및 발달단계에 따라 유전자 발현이 조절되는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 어류의 체지방 축적과 대사과정을 이해하고 성장 및 경제형질 관련 DNA marker를 확보하기 위한 1차적인 연구로서, 한국산 선발계통 및 일본산 양식계통과 이들 두 계통간 잡종 참돔 집단을 이용하여 LPL 유전자 내의 다형성을 탐색하고 분석하였다. PCR-RFLP 분석을 실시하여 참돔 LPL 유전자 exon 2번을 포함하는 영역에서 3개의 (Msp I, Alu I 및 Hsp92II) 다형성을 확인하였고, 각 집단간 대립유전자의 빈도를 분석하였다. Exon 2번에서 관찰된 Msp I 다형성은 염기치환 (C$\longrightarrow$G)이 일어난 형태로서 아미노산 서열에는 변화가 없는 silent mutation 이었으며, 대립유전자의 빈도를 분석한 결과, 각 집단간 뚜렷한 차이는 없었다. Alu I 및 Hsp92II 다형성은 intron 영역에서 발견되었으며, Alu I 다형성으로 인한 4개의 대립유전자형 중 D 대립유전자는 한국산 선발 계통과 한국산 선발계통을 포함하는 교배집단에서만 검출되었다. 이 후의 연구에서는 참돔 LPL 유전자의 exon 영역에 존재하는 다형성을 탐색하고, 형질과의 연관성 및 지방축적 기능과의 관련성 등을 분석하고자 한다.
Brain cytoplasmic 200 RNA (BC200 RNA) is proposed to act as a local translational modulator by inhibiting translation after being targeted to neuronal dendrites. However, the mechanism by which BC200 RNA inhibits translation is not fully understood. Although a detailed functional analysis of RNA motifs is essential for understanding the BC200 RNA-mediated translation-inhibition mechanism, there is little relevant research on the subject. Here, we performed a systematic domain-dissection analysis of BC200 RNA to identify functional RNA motifs responsible for its translational-inhibition activity. Various RNA variants were assayed for their ability to inhibit translation of luciferase mRNA in vitro. We found that the 111-200-nucleotide region consisting of part of the Alu domain as well as the A/C-rich domain (consisting of both the A-rich and C-rich domains) is most effective for translation inhibition. Surprisingly, we also found that individual A-rich, A/C-rich, and Alu domains can enhance translation but at different levels for each domain, and that these enhancing effects manifest as cap-dependent translation.
빠른 설계 시간 및 재 설계 가능성 부여 등에 주안점을 두어 고성능의 단일 칩 16-bit data path를 설계하였다. 원칙적인 설계 방법의 체계적인 연구를 위하여 module화의 개념을 근간으로한 설계방법을 도입하였으며, 이에 따라 각 내부블럭이 bus에 연결되어 독립적으로 동작하는 subsystem이 되도록 이를 결합하여 전체 시스템의 설계를 완성하였다. 시스템은 data path이다. Data path는 16-bit의 데이터를 처리하는 부분으로 ALU(Arithmetic Logic Unit), register file, barrel shifter 및 bus 회로로 구성된다. 이 회로에서의 게이트의 폭과 길이는 spice2를 사용하여서 결정하였다. 회로 시뮬레이션의 결과는 기대하였던 회로 특성과 잘 일치하였다.
고래회충유충증은 해산어류에 기생하는 고래회충과(family Anisakidae)에 속하는 선충류 유충에 의한 질병으로 유충의 직접적인 위장관내 침입으로 인한 병변과 더불어 유충의 분비 배설물에 의한 알레르기 질환도 유발될 수 있다. 고래회충유충증은 A. simplex를 비롯하여 Contracaecum, Pseudoterranova, Hysterothylacium 등의 유충에 의해 야기될 수 있으나 이들에 대한 형태학적 감별 진단은 유충의 형태적 유사성으로 인하여 매우 어려운 경우가 많다. 이러한 형태학적 진단의 어려움을 극복하고 분자생물학적 감별진단 방법을 확립하기 위하여 A. simplex, Contracaecum type A. type C' 및 Goezia 유충을 숭어, 도다리, 고등어, 아나고, 참돔 등 5종의 어류에서 분리하였다. 각각의 유충으로부터 분리한 18S rDNA를 PCR로 증폭한 후 Taq 1, Hinf I, Hha I, Alu 1, Dde I, Hae III, Sau 96I, Sau 3AI 등 8종의 제한효소를 사용하여 PCR-RFLP를 시행하였다. PCR product의 크기는 약 2.0 Kb였으며 Hinf l, Alu 1, Hha I, Dde 1 및 Hae III로 A. simplex와 Contracaecum type C'을 구분할 수 있었다. 그러나 Contracaecum type A의 경우에는 Taq I, Hinf I, Alu I 및 Dde I의 경우에는 2가지 패턴으로 나타났으며 이들 가운데 일부는 A. simplex, Contracaecum type C', 및 Goezia와 동일한 분석 패턴을 보이기도 하였다. Goezia는 사용한 8개의 제한 효소 모두에서 A. simplex 및 Contracaecum type A 및 type C'과 각기 다른 양상을 보였다. 이러한 결과로 18S rDNA PCR-RFLP 방법은 A. simplex와 Contracaecum type C'의 감별 진단에 유용한 것으로 밝혀졌으며, Contracaecum type A의 분류에는 제한적으로 사용되어야 함은 물론 형태학적 분류 기준에 대한 재검토가 뒤따라야 할 것으로 사료되었다.
현재까지 다양한 암의 발병 원인이 밝혀졌는데, 그 중 하나로써 DNA에 돌연변이가 축적되어 유전체가 불안정 해짐에 따라 암이 발생될 수 있는 기작들이 주목받고 있다. 생물정보학과 유전체학의 발달에 따라 질병 연구에 있어서 보다 더 정확하고 신뢰성 있는 바이오마커를 찾는 것이 가능해졌다. 따라서, 생물정보학과 유전체학의 연구 기반을 바탕으로 한 암의 바이오마커는 암의 조기진단뿐만 아니라, 더 나아가 암 발생 예측과 암환자의 예후 진단에 적용될 수 있다. 최근 들어 인간 유전체에서 약 45%를 차지하는 이동성 유전인자(transposable elements, TEs)가 유전자의 발현 조절과 DNA의 돌연변이를 유도함으로써 다양한 질병에 영향을 미친다는 사실이 밝혀짐에 따라, 이러한 이동성 유전인자들이 암의 발생과 어떤 연관이 있는지에 대한 연구 또한 활발히 진행되고 있다. 따라서 우리는 이동성 유전인자가 대장암과 어떤 연관성이 있는지에 대해 조사를 하였으며, 이를 어떻게 바이오마커로 활용할 수 있는지 알아보았다. 우선, 이동성 유전인자 중 인간 유전체에 많이 존재하면서 유전체에 많은 영향을 미치는 LINE-1 (long interspersed nuclear element-1, L1)과 Alu, LTR (long terminal repeat) 위주로 확인하였다. 흥미롭게도, 대장암 세포에서 LINE-1의 저메틸화, APC 유전자 내에 LINE-1 삽입, Alu의 저메틸화와 과메틸화, LTR 삽입에 따른 isoform 발생 등이 특징적으로 나타나는 것을 알 수 있었다. 또한 원발암유전자에서의 L1 저메틸화가 대장암 전이의 바이오마커로 쓰일 수 있다는 것과 Alu에 의한 MLH1 돌연변이가 가족성 및 유전성 대장암에서 흔히 발견된다는 것을 알 수 있었다. 이 때 이동성 유전인자에 의하여 영향 받는 유전자들의 발현을 in silico 발현 분석을 통하여 분석하였으며, 조직별, 성별 특이적 발현 양상을 제시하였다. 이들을 토대로 대장암 바이오마커를 개발하여 유전성 대장암의 예측 및 대장암 진단 또는 대장암 예후 예측을 통한 개인 맞춤형 치료에 활용할 수 있을 것으로 예상된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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