A survey of virus infection in garlic plants cultivated in Korea was conducted for three years. Most virus-infected garlic plants (Allium sativum) showed typical symptoms on the leaves such as yellow mosaic, stripes, and distortion. Through immunosorbent electron micro-scopy and RT-PCR analysis, the complex mixtures of viruses including garlic viruses of the genus Allerivirus, gaylic strain of Leek yellow stripe virus of the genus Potyvirus, and Garlic latent virus of the genus Carlavirus were identified in the virus-infected garlic plants. Among these viruses, Allexivirus was the most frequently detect-ed in the regions surveyed. Using sets of differential primers for Allexivirus genomes, two members of the genus were amplified and sequenced from the purified viruses. The deduced amino acid sequences for the coat proteins and the nucleic acid binding proteins of two viruses showed high homologies to Garlic virus A (CarV-A) and Garlic virus D (GarV-D) of Allekivirus. This is the first report of GarV-A and GarV-D in Korea. This suggests that Allexivirus in gavlic plants in Korea was mixed and varied. Phylogenetic analyses showed that the genus Allexivirus was diversi(ied by the processes of accumulation and evolution of viruses in garlic plants due to the long period of repeated vegetative propagation.
Viruses in garlic plants (Allium sativum L.) have accumulated and evolved over generations, resulting in serious consequences for the garlic trade around the world. These viral epidemics are also known to be caused by aphids and eriophyid mites (Aceria tulipae) carrying Potyviruses, Carlaviruses, and Allexiviruses. However, little is known about viral epidemics in garlic plants caused by eriophyid mites. Therefore, this study investigated the infection of garlic plants with Allexiviruses by eriophyid mites. When healthy garlic plants were cocultured with eriophyid mites, the leaves of the garlic plants developed yellow mosaic strips and became distorted. In extracts from the eriophyid mites, Allexiviruses were observed using immunosorbent electron microscopy (ISEM). From an immunoblot analysis, coat proteins against an Allexivirus garlic-virus antiserum were clearly identified in purified extracts from collected viral-infected garlic plants, eriophyid mites, and garlic plants infected by eriophyid mites. A new strain of GarV-B was isolated and named GarV-B Korea isolate 1 (GarV-B1). The ORF1 and ORF2 in GarV-B1 contained a typical viral helicase, RNA-directed RNA polymerase (RdRp), and triple gene block protein (TGBp) for viral movement between cells. The newly identified GarV-B1 was phylogenetically grouped with GarV-C and GarV-X in the Allexivirus genus. All the results in this study demonstrated that eriophyid mites are a transmitter insect species for Allexiviruses.
The genomes of different allexiviruses were isolated and cloned from virus-infected garlic plants (Allium sativum), which were collected from farm fields in the southern provinces in Korea. The partial nucleotide sequences of the genomes from different allexiviruses were clearly identified in the virus-infected garlic plants. The cloned partial genomes of viruses in garlic plants showed a greater than 90% homology to previously identified allexiviruses and classified into species of GarV-A, -B, -C, -D, -E, and -X, demonstrating that species of allexivirus found in the other countries in the world are also widely distributed in the garlic plants in Korea.
In 2005, a survey was conducted to identify virus diseases on victory onion, Allium victorialis var. platyphyllum grown in Ulleung island located in the East Sea. A total of 61 samples were collected from victory onion in the neighborhood of Seonginbong. The identification of viruses from the samples were carried out by electron microscopy and RT-PCR using primers species specific to GCLV, LYSV, SLV, OYDV and genus specific to Allexivirus, respectively. From sixty-one samples, filamentous rod particles (600-900 nm) were detected from four victory onion samples in EM, three samples containing SLV and one sample containing both SLV and Allexivirus in RT-PCR analysis, respectively. Victory onions naturally infected by the viruses were asymptomatic apparently. The viruses detected by RT-PCR were further characterized by the nucleotide sequence analysis of the coat protein region. Three isolates of SLV showed approximately 99% identities in the nucleotide and amino acid sequences, suggesting that they were likely to be the same strain. On the other hand, they showed approximately 75.7~83.7% identities in the nucleotide and 89.2~97.0% in amino acid sequences compared with the previously reported SLV isolates in Allium. The CP gene of the Allexivirus showed approximately 99.2% nucleotide identities and 98.8% amino acid identities with Garlic virus A. However, there was relatively low homology ranging from 60.6% to 81.5% compared with other Allexiviruses (GarV-C, GarV-E, GarV-X, GMbMV, and Shal-X). These data suggested that two viruses, SLV and GarV-A identified from victory onion, are named SLV-Ulleungdo and GarV-A-Ulleungdo, respectively. This is the first report of viruses infecting victory onion.
PARK KWANG-SOOK;BAE YOUNG-JOO;JUNG EUN-JEONG;KANG SOON-JA
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.5
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pp.1110-1114
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2005
Six viruses of the genera Carlavirus (Garlic mosaic virus, GarMV, and Garlic latent virus, GarLV), Allexivirus (Garlic virus X, GarV-X, and Garlic mite-borne filamentous virus, GarMbFV) and Potyvirus (Leek yellow stripe virus, LYSV, and Onion yellow dwarf virus, OYDV) from Korean garlic plants with mosaic symptoms were simultaneously detected by multiplex RT-PCR and subsequently sequenced. An immunocapture RT-PCR for the detection of GarLV, LYSV, and OYDV was also performed. The coat protein phylogenetic analysis of the garlic viruses showed that the Korean isolates were most closely related to the isolates from China, Japan, Brazil, and Argentina. This study is the first report for the differentiation of six garlic viruses in Korea by simultaneous detection using multiplex RT-PCR.
Garlic generally becomes coinfected with several types of viruses belonging to the Potyvirus, Carlavirus, and Allexivirus genera. These viruses produce characteristically similar symptoms, they cannot be easily identified by electron microscopy (EM) or immunological detection methods, and they are currently widespread around the world, thereby affecting crop yields and crop quality adversely. For the early and reliable detection of garlic viruses, virus-specific sets of primers, including species-specific and genus-specific primers were designed. To effectively detect the twelve different types of garlic viruses, primer mixtures were tested and divided into two independent sets for multiplex polymerase chain reaction (PCR). The multiplex PCR assays were able to detect specific targets up to the similar dilution series with monoplex reverse transcription (RT)-PCR. Seventy-two field samples collected by the Gyeongbuk Agricultural Technology Administration were analyzed by multiplex RT-PCR. All seventy two samples were infected with at least one virus, and the coinfection rate was 78%. We conclude that the simultaneous detection system developed in this study can effectively detect and differentiate mixed viral infections in garlic.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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