본 연구는 연산 오골계의 물 추출물을 이용하여 MG-63 조골세포와 RAW 264.7 파골세포의 분화에 미치는 영향을 분석하였다. 조골세포의 분화에 미치는 영향을 관찰하기 위해 ALP 활성 분석과 alizarin red 염색을 통해 골 석회화를 측정하였다. 그리고 RAW 264.7 파골세포의 분화 억제 활성을 확인하기 위해 TRAP 활성과 염색을 분석 측정하였다. 연산 오골계 물 추출물을 농도별($250-1,000{\mu}g/ml$)로 처리한 결과 조골세포와 파골세포에서 세포독성을 나타내지 않았다. ALP 활성은 3년산 암탉 육질이 133.8%, 3년산 수탉 육질은 129.6%로 육질이 껍질보다 조골세포 분화력이 높았다. 그리고 육질에서는 3년산이 1년산보다 ALP 활성이 높으나 껍질에서는 1년산이 3년산보다 조골세포 분화능력이 높았다. 성별 간 ALP 활성은 전체적으로 암탉이 수탉보다 높은 ALP 활성을 보였다. 또한, 골 석회화 능력은 3년산 암탉 육질이 연령과 성별을 통틀어 124.3%로 가장 뛰어났으며 TRAP 활성은 3년산 수탉 육질이 31.8%로 연령과 성별을 통틀어 억제 활성이 가장 뛰어났다. 연산 오골계 물 추출물은 조골세포 분화능력이 뛰어나 골의 석회화를 촉진하는 능력이 뛰어났으며 파골세포의 분화를 억제하여 골 흡수를 억제하는 능력이 뛰어났다. 이에 연산 오골계는 골 기능 강화와 골 관련 질환에 대한 예방과 치료에 효과가 있을 것으로 보인다.
진도개와 삽사리 혈청 lactate dehydrogenase와 혈청 alkaline phosphatase의 동위효소 및 효소활성도를 분석하였다. 전기영동결과 진도개와 삽사리의 혈청에서는 5두지 종류의 LDH의 동위효소가 모두 확인되었다. LDH의 활성도는 진도개의 경우 522.53 $\pm$ 279.96(U/L)이었고 삽사리는 534.10 $\pm$ 280.35(U/L)이었다. 진도개와 삽사리의 혈청 alkaline phosphatase전기 영동상에서 는 한 종류의 동위효소만 관찰되었고 활성도는 진도개의 경우 7.61 $\pm$ 4.52(K-A unit)였고 삽사리는 10.46 $\pm$ 7. 10(K-A unit) 였다. 삽사리의 ALP 활성도는 연령에 따라 커다란 차이를 나타내었다.
Objectives : The differentiation of osteoblasts is controlled by various growth factors and matrix protein expressed in bone. The aim of this study was to investigate the effects of many herbs medicine(KHBJs) for bone healing that induces osteogenic activity in human osteoblast-like SaOS-2 cells. Methods : The osteogenic effects of KHBJs were evaluated by using cell proliferation(WST-8) assay, alkaline phosphatase(ALP) activity assay, colorimetric analysis of vascular endothelial growth factor(VEGF) expression in human osteoblast like SaOS-2 cell. Also, osteogenic activity of KHBJ fractions(KHBJB and KHBJR) by activity guided fractionation were evaluated. Results : About 7 KHBJs had effect on the proliferation of osteoblast like SaOS-2 cells, and dose-dependently increased alkaline phosphatase(ALP) activity. KHBJs markedly increased expression for VEGF. Fractionated KHBJs(KHBJB or KHBJR) not enhanced more than KHBJs on osteogenic activity in SaOS-2 cells. Conclusions: This study found that 7 KHBJs had effect on proliferation, ALP activity, and VEGF expression in osteoblast like SaOS-2 cells. These results propose that KHBJs can play an important role in osteoblastic bone formation, and may possibly lead to the development of bone-forming drugs.
Kim, Suji;Shin, Mee-Young;Son, Kun-Ho;Sohn, Ho-Yong;Lim, Jae-Hwan;Lee, Jong-Hwa;Kwun, In-Sook
Preventive Nutrition and Food Science
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제19권3호
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pp.194-203
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2014
Yam (Dioscorea batatas) is widely consumed as functional food for health promotion mainly in East Asia countries. We assessed whether yam root (tuber) or bark (peel) extracts stimulated the activity of osteoblasts for osteogenesis. MC3T3-E1 cells (mouse osteoblasts) were treated with yam root extracts (water or methanol) (study I) or bark extracts (water or hexane) (study II) within $0{\sim}10{\mu}g/mL$ during the periods of osteoblast proliferation (5~10 day), matrix maturation (11~15 day) and mineralization (16~20 day) as appropriate. In study I, both yam root water and methanol extracts increased cell proliferation as concentration-dependent manner. Cellular collagen synthesis and alkaline phosphatase (ALP) activity, both the indicators of bone matrix protein and inorganic phosphate production for calcification respectively, were also increased by yam root water and methanol extract. Osteoblast calcification as cell matrix Ca and P accumulation was also increased by the addition of yam root extracts. In study II, yam bark extracts (water and hexane) increased osteoblast proliferation and differentiation, as collagen synthesis and ALP activity and osteoblast matrix Ca and P deposition. The study results suggested that both yam root and bark extracts stimulate osteogenic function in osteoblasts by stimulating bone matrix maturation by increasing collagen synthesis, ALP activity, and matrix mineralization.
Serum levels of alkaline phosphatase (ALP) are widely used in the clinical diagnosis of hepatic diseases and the assessment of liver status. They also have epidemiological significance to be prospective risk factors for bone diseases, such as osteitis deformans, rickets, osteomalacia, hyperparathyroidism, healing fractures, and osteoblastic bone tumors. In the previous study, single nucleotide polymorphisms (SNPs) in several genes have been reported to be associated with serum levels of liver enzyme in American population. We aimed to confirm whether the genetic variation of RETNLB (resistin like beta) gene also influence the serum levels of liver enzyme in Korean population. We genotyped variants in or near RETNLB in a population-based sample including 994 Korean adults. Here, we performed association analysis to elucidate the possible relations of genetic polymorphisms in RETNLB gene with serum levels of liver enzyme. By examining genotype data of a total of 944 subjects in 5 hospital health promotion centers, we discovered the RETNLB gene polymorphisms are associated with serum levels of ALP. The common and highest significant polymorphism was rs736327 (${\beta}$=8.66, P=2.37E-05), rs7639070 (${\beta}$=8.56, P=3.24E-05) with ALP in all groups. Furthermore, the ALP was consistently associated with rs736327 (${\beta}$=10.40, P=5.23E-05), rs7639070 (${\beta}$=10.32, P=6.74E-05) in the male population. Consequently, we found statistically significant SNPs in RETNLB gene that are associated with serum levels of ALP. In addition, these results suggest that the individuals with the minor alleles of the SNP in the RETNLB gene may have elevated serum levels of ALP in the Korean population.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제35권1호
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pp.7-13
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2017
In this study, changes in gene expression after administration of silk fibroin fragments ($size{\approx}30kDa$) were evaluated in MG63 cells using a cDNA microarray assay. In addition, the level of alkaline phosphatase (ALP) activity and cellular proliferation in the group administered moderately sized silk fibroin fragments ($size{\approx}30kDa$) (MSF) were compared to those in the group administered smaller silk fibroin fragments (size < 1 kDa) (SSF). The results of the cDNA microarray assay show increased expression of genes that are related to the cell cycle and inflammation. ALP, bone morphogenetic protein-7, bone morphogenetic protein receptor type IA, and runt-related transcription factor 2 exhibited significantly lower expression compared to control cells (fold ratio < 0.5). Relative ALP activity of the $100{\mu}g/mL$ MSF group was significantly lower than that of the SSF group (P < 0.05). Thus, the MSF group showed increased expression of genes associated with cellular proliferation and inflammation but decreased expression of genes associated with osteogenesis.
Objectives: The purpose of this study was to examine the cell proliferation and expression of alkaline phosphatase (ALP) during the differentiation of murine odontoblast-like cells (MDPC-23) by Cimicifuga rhizoma extract. Cimicifuga rhizoma extract was prepared using 70% ethanol. Then, the cells were treated with 25, 50, 100, 150, and $200{\mu}g$ of Cimicifuga rhizoma extract. Methods: We determined the Cimicifuga rhizoma effects of MDPC-23 using WST-1 (water soluble tetrazolium salt-1) assay, ALP activity assay and histochemical staining. Results: $25-200{\mu}g$ of Cimicifuga rhizoma extract did not inhibit the growth of MDPC-23 cells; $100{\pm}0$, $100{\pm}3.29$, $99{\pm}4.86$, $98{\pm}3.80$, $98{\pm}1.73$, $99{\pm}5.05%$ (p<0.794). $50{\mu}g$ of Cimicifuga rhizoma extract stimulated ALP activity on MDPC-23; $5.1{\pm}0.20units/{\mu}{\ell}$ (p<0.001). Conclusions: It was proven that Cimicifuga rhizoma promoted differentiation of MDPC- 23 cells.
Purpose: The purpose of this study is to find out the effects of bisphosphonates (BPs) on the proliferation and the alkaline phosphatase (ALP) activity of human bone marrow derived mesenchymal stem cells (hMSCs), and thus state its correlation with bisphosphonate related osteonecrosis of the jaw (BRONJ). Methods: hMSCs was obtained by collecting and culturing cancellous bone fragments from a patient undergoing iliac bone graft. Alendronate (Aln) and Pamidronate (Pam), Ibandronate (Ibn) were added to the culture media in the concentration from $10^{-3}$ M to $10^{-11}$ M and cell toxicity, viability were measured. For ALP activity evaluation, Aln and Pam were added to the culture media in the concentration from $5{\times}10^{-7}$ M to $1{\times}10^{-8}$ M and were cultured for 1 week, 2 weeks and 3 weeks. ALP activity data were standardized using protein assay. Control groups were prepared for each examination. Results: Aln, Pam and Ibn all failed to increase the proliferation of hMSCs. With 1 week, 2 weeks of $5{\times}10^{-8}$M of Aln treatment, the ALP activity increased. Pam treatment increased the ALP activity with 2 weeks of $5{\times}10^{-8}$ M and$1{\times}10^{-8}$M. Also Ibn treatment increased the ALP activity with 2 weeks of $5{\times}10^{-8}$ M and $1{\times}10^{-8}$ M. Conclusion: It is considered that BPs are not capable of improving the proliferation of hMSCs. Also, after a transient increase in the ALP activity with the lower concentration of BPs, the activity decreased again. Therefore, in patients on long-term medication of BPs, the proliferation and osteoblast differentiation of hMSCs are restrained, and thus delayed wound healing and increase in BRONJ complications may occur.
Testosterone과 cyclic AMP(cAMP)가 부정소에 미치는 영향을 조사하기 위하여 흰쥐의 복강내로 testosterone 및 cAMP를 투여하여 acid phosphatase(ACP),alkaline phosphatase(ALP), lactate dehydrogenase(LDH)의 활성도를 측정하였으며 상피세포내 미세구조의 변화를 전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 거세한 실험군에서 ACP활성도는 거세 후 3일째까지 감소하기 시작하였으며 ALP활성도는 5일째,LDH활성도는 7일째부터 각각 감소하였다. 또한 거세 후 14일째 부터 testosterone을 7일간 투여한 경우 ACP와 ALP의 활성도는 5일간 계속 투여하였을 때,LDH의 활성도는 7일간 계속 투여하였을 때만 각각 유의성있게 증가하였다. cAMP 및 cAMP-theophyllin을 투여한 경우 LDH 및 ACP의 활성도가 증가하였으나 그 증가폭은 큰 의미가 없었다. ALP의 활성도는 두 가지의 경우에서 모두 증가를 나타내었다. 미세구조를 관찰한 결과는 거세한 실험군에서 골지체가 점차 변형되어 층상구조가 없어지며 미토콘드리아도 파괴되었고 상당수 존재하던 부동모 (stereocilia)도 파괴되었다. 이 경우 testosterone투여시 파괴되었던 고리지체, 미토콘드리아 및 부동모가 회복되었고 cAMP 및 cAMP-theophyllin 을 투여하였을 때는 골지체 및 여러 세포기관들이 대조군과 같은 수준으로 회복되었으나 부동모는 거세군과 같은 수준으로 관찰되었다. 이상의 결과는 부정소액에서 정자성숙시 나타나는 효소활성도 증가와 유사하게 나타났는데, 이것은 정자↔부정소액↔부정소 상피세포 와 같은 상호작용을 통하여 정자성숙이 이루어지며 이는 상피세포에서 합성된 물질이 부정소내 강으로 방출된다는 것을 의미하며 cAMP를 처리하였을 경우 효소활성도 증가 및 여러 세포소기관의 회복 등 testosterone과 유사한 작용을 나타내는 것은 cAMP가 웅성호르몬 작용시 화확적으로 전달자로 작용할 수 있다는 가능성을 나타내는 것으로 생각된다.
옻나무(Rhus verniciflua Stokes)로부터 제초제인 paraquat(PQ)의 독성 경감기전을 추구할 목적으로 ethylacetate 분획에서 분리한 fustin 및 sulfuretin을 실험동물에 투여하고서 혈액학적 변화 및 간장 중 활성산소에 미치는 영향 검토한 결과 혈액 생화학적 인자 분석을 종합해 보면 옻나무의 메탄을 엑스(250 mg/kg), 에틸아세테이트 엑스(250 mg/kg), fustin(10 mg/kg) 및 sulfuretin(10 mg/kg)을 2주간 각각 경구투여 하고서 PQ를 투여하므로서 PQ의 독성이 유의성 있게 억제되었다. in vivo에서 옻나무의 분획 및 성분의 투여는 혈액생화학적 검사에서 PQ에 의해 유도된 간독성 지표인 s-GPT, s-GOT치, 신장독성지표인 BUN, creatinine치 및 조직손상의 지표인 ALP, MDA치를 억제하였다 폐조직중의 MDA함량, ALP활성 및 collagen함량도 억제하였다. 이로써 옻나무에는 PQ의 폐독성 및 각 장기의 독성을 효과적으로 경감시켜 줄 수 있는 물질이 함유되어 있는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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