알긴산을 분해하기 위하여 갈조류로부터 분해활성이 있는 해양미생물을 분리하였다. 분리된 균주의 16S ribosomal DNA를 분석한 결과 이전에 보고했던 ALG-5 균주와 비슷한 Streptomyces sp.에 속하는 것으로 나타났다. 상동성이 있는 염기서열로 고안한 특이적인 primer로 PCR을 행함로서 Streptomyces sp. M3의 새로운 alginate lyase 유전자를 클로닝하였다. M3 alginate lyase의 예상 아미노산 서열에는 N-terminal 영역에 YXRSELREM 서열과 C-terimnal 영역에 YFKAGXYXQ 서열이 보존되어 있었다. M3 alginate lyase 단백질의 homology model은 Corynebacterium sp. ALY-1으로부터 얻은 단백질인 alyPG와 같이 $\beta$-jelly roll fold를 main domain으로 가지고 있음이 나타났다. M3 alginate lyase 유전자를 가지는 재조합 E. coli의 세포균질액은 polymannuronate block보다는 polyguluronate block에 대하여 높은 분해력을 가지고 있었다. 아미노산 서열 다중정열 및 homology modeling으로부터 얻은 결과는 M3 alginate lyase가 Family PL-7으로 분류될 수 있음을 말해 준다.
The adsorption of uranium (VI) by calcium alginate beads was examined by batch experiments. The effects of environmental conditions on U (VI) adsorption were studied, including contact time, pH, initial concentration of U (VI), and temperature. The alginate beads were characterized by using scanning electron microscopy, transmission electron microscopy, X-ray photoelectron spectroscopy, and Fourier transform infrared spectroscopy. Fourier transform infrared spectra indicated that hydroxyl and alkoxy groups are present at the surface of the beads. The experimental results showed that the adsorption of U (VI) by alginate beads was strongly dependent on pH, the adsorption increased at pH 3~7, then decreased at pH 7~9. The adsorption reached equilibrium within 2 minutes. The adsorption kinetics of U (VI) onto alginate beads can be described by a pseudo first-order kinetic model. The adsorption isotherm can be described by the Redlich-Peterson model, and the maximum adsorption capacity was 237.15 mg/g. The sorption process is spontaneous and has an exothermic reaction.
Lan, Dong;Bing, Deng;Lanlan, Ding;Qiong, Cheng;Yong, Yang;Yang, Du
폴리머
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제38권5호
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pp.557-565
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2014
Sodium alginate and chitosan are added to a $CaCl_2$ solution to prepare calcium-alginate-chitosan and calciumalginate gels. After dehydration through stoving, two types of adsorbent particles are obtained. The adsorption process of the particles obtained for low concentrations of $Sr^{2+}$ satisfies a second-order kinetic equation and the Freundlich adsorption model. The thermodynamic behaviors of the particles indicate that adsorption occurs via a spontaneous physical process. XPS pattern analysis is used to demonstrate the adsorption of $Sr^{2+}$ by calcium alginate and chitosan. By building an interaction model of the molecules of chitosan and alginate with $Ca^{2+}$ and $Sr^{2+}$ to calculate energy parameters, Fukui index, Mulliken charge, and Mulliken population, adsorption of $Sr^{2+}$ on the molecular chains of chitosan as well as the boundary of calcium-alginate-chitosan is observed to show weak stability; by contrast, adsorption between molecular chains is high.
저압 침지식 멤브레인을 이용한 해수 담수화 전처리에 있어서 유기 파울링은 막간 압력 증가로 인한 화학 세정 횟수의 증가 및 에너지 소비 증가 등 멤브레인 운전시 문제점들을 야기한다. 조류대응 해수전처리에서 조류가 배출하는 extracellular polymeric substances의 대표물질인 sodium alginate를 이용하여 침지식 여과에서 파울링 현상을 관찰하였다. 공기 폭기가 적용되지 않은 경우 순수한 aglinate 파울링은 농도가 증가하면서 증가하였다. 그러나 공기 폭기를 적용해 준 경우 alginate 파울링 감소는 매우 효과적이었다. 공기 폭기가 없는 경우 칼슘 농도의 증가에 따라 alginate 파울링은 감소하였다. 동일 조건에서 공기 폭기 시 높은 alginate 파울링 감소효과를 나타내었으나 NaCl 농도를 증가시킨 경우 칼슘 농도의 증가에 따라 파울링 제어를 위한 공기 폭기 효과는 감소하였다. 해수와 유사한 높은 NaCl과 칼슘 농도에서 고농도 sodium alginate의 경우 공기 폭기량 증가를 통해 초기 파울링을 감소시킬 수 있었으나 시간의 경과에 따라 상대적으로 낮은 폭기량에서의 파울링 감소 효과와 큰 차이는 없었다.
The purpose of this paper is to explore the possible applicability of alginate beads as an oral controlled release system of polymeric drugs. Cellulase was used as a model polymeric drug. The release of cellulase from alginate beads was moderately affected by the ratio of cellulase to sodium alginate and strongly affected by $CaCl_2$ concentration. However, the release was not particularly affected by the other factors such as sodium alginate concentration and curing time. The drug was not released from alginate beads at pH 1.2, but was released continuously up to 8 hr at pH 6.8. At pH 6.8, the beads were swollen highly up to 3 hr, thereafter, were eroded into the bulk solution up to 6 hr, completely. Drug release from the beads can be caused due to diffusion and erosion of the matrix. Activity of cellulase was reduced when alginate beads containing cellulase were stored in simulated gastric juice. Further investigation would be necessary to improve the acid resistance of the beads. Since the release of cellulase as a model polymeric drug could be controlled by the regulation of the preparation conditions of alginate beads, the alginate beads may be used for a potential oral controlled release system of such polymeric drugs as polypeptide drugs.
Alginate microspheres, containing fluorescein isothiocyanate-bovine serum albumin (FITC-BSA) or green fluorescent protein (GFP) were prepared and used as a model drug to develop the oral vaccine delivery system. The alginate microspheres were coated with poly-L-lysine or chitosan. Two methods, w/o-emulsion and spray, were used to prepare alginate microspheres. To optimize preparation conditions, effects of several factors on the particle size and particle morphology of microsphere, and loading efficiency of model antigen were investigated. In both preparation methods, the particle size and the loading efficiency were enhanced when the concentration of sodium alginate increased. In the w/o-emulsion preparation method, as the concentration of Span 80 was increased from 0.5% to 2%, the particle size was decreased, but the loading efficiency was increased. The higher the emulsification speed was, the smaller the particle size and loading efficiency were. The concentration of calcium chloride did not show any effect on the particle size and loading efficiency. In the spray preparation method, the particle size was increased as the nozzle pressure $(from\;1\;kgf/m^2\;to\;3\;kgf/m^2)$ and spray rate was raised. Increasing calcium chloride concentration (<7%) decreased the particle size, in contrast to no effect of calcium chloride concentration on the w/o-emulsion preparation method. Alginate microspheres prepared by two methods were different in the particle size and loading efficiency, the particle size of microspheres prepared by the spray method was about $2-6\;{\mu}m$, larger than that prepared by the w/o emulsion method $(about\;2{\mu}m)$, and the loading efficiency was also higher with spray method. Furthermore, drying process for the microspheres prepared by the spray was simpler and easier, compared with the w/o emulsion preparation. Therefore, the spray method was chosen to prepare alginate microspheres for further experiments. Release pattern of FITC-BSA in alginate microspheres was evaluated in simulated intestinal fluid and PBS (phosphate buffered saline). Dissolution rate of FITC-BSA from alginate/chitosan microsphere was lower than that from alginate microsphere and alginate/poly-L-lysine microsphere. By confocal laser scanning microscope, it was revealed that alginate/FITC-poly-L-lysine microspheres were present in close apposition epithelium of the Peyer's patches of rabbits following inoculation into lumen of intestine, which proved that microspheres could be taken up by Peyer's patch. In conclusion, it is suggested that alginate microsphere prepared by spray method, showing a particle size of & $10\;{\mu}m$ and a high loading efficiency, can be used as a model drug for the development of oral vaccine delivery system.
Two types of alginate gel beads capable of floating in the gastric cavity were prepared. The first, alginate gell bead containing olive oil(Al-Oil), is a hydrogel bead and its buoyancy is attributable to olive oil held in the alginate gel matrix. The model drug, metronidazole(MZ), contained in Al-Oil was released gradually into artificial gastric fluid. The profiles of MZ release from Al-Oil shown initial burst and after 90 min they were about 100%. The second, alginate gel bead containing curdlan microsphere(Al-C), is a gel bead with curdlan-MZ microsphere in the matrix. To sustained release rate of drug, alginate bead were prepared curdlan microsphere containing MZ. Results demonstrated that sustained delivery of MZ over 2h can be easily achieved while the bead remained float. The release properties of prepared alginate beads are applicable not only for sustained release of drugs but also for targeting the gastric mucosa.
This study investigated the adsorption characteristics of nickel, zinc and cadmium ions from the aqueous solution onto the alginate bead. Adsorption equilibrium capacities of the heavy metal ions increased with increasing initial pH of the solution. The adsorption equilibrium isotherm of the heavy metal ions was well represented by Langmuir equation. The magnitude of adsorption capacity of the heavy metal ions onto alginate bead was the order of cadmium > zinc > nickel. Kinetic parameters were measured in a batch adsorber to analyze the adsorption rates of the heavy metal ions. The internal diffusion coefficient of the heavy metal ions in the intraparticle were determined by comparing the experimental concentration curves with those predicted from the surface diffusion model (SDM) and pore diffusion model (PDM). The internal diffusion of the heavy metal ions in the intraparticles was explained by PDM.
The sustained release dosage form which delivers melatonin (MT) in a circadian fashion over 8 h is of clinical value for those who have disordered circadian rhythms because of its short halflife. The purpose of this study was to evaluate the gelling properties and release characteristics of alginate beads varying multivalent cationic species $(Al^{+++}, \; Ba^{++}, \; Ca^{++}, \; Mg^{++}, \; Fe^{+++}, \; Zn^{++})$. The surface morphologies of Ca- and Ba-alginate beads were also studied using scanning electron microscope (SEM). MT, an indole amide pineal hormone was used as a model drug. The $Ca^{++}, \; Ba^{++}, \; Zn^{++}, \; Al^{++}\; and\; Fe^{+++}\; ions\; except\; Mg^{++}$ induced gelling of sodium alginate. The strength of multivalent cationic alginate beads was as follows: $Al^{+++}\llFe^{+++} the induced hydrogel beads were very fragile and less spherical. Fe-alginate beads were also fragile but stronger compared to Al-alginate beads. Ba-alginate beads had a similar gelling strength but was less spherical when compared to Ca-alginate beads. Zn-alginate beads were weaker than Ca- and Ba-alginate beads. Very crude and rough crystals of Ba- and Ca-alginate beads at higher magnifications were observed. However, the type and shape of rough crystals of Ba- and Ca-alginate beads were quite different. No significant differences in release profiles from MT-loaded multivalent cationic alginate beads were observed in the gastric fluid. Most drugs were continuously released upto 80% for 5 h, mainly governed by the passive diffusion without swelling and disintegrating the alginate beads. In the intestinal fluid, there was a significant difference iq the release profiles of MT-loaded multivalent cationic alginate beads. The release rate of Ca-alginate beads was faster when compared to other multivalent cationic alginate beads and was completed for 3 h. Ba-alginate beads had a very long lag time (7 h) and then rapidly released thereafter. MT was continuously released from Feand Zn-alginate beads with initial burstout release. It is assumed that the different release rofiles of multivalent cationic alginate beads resulted from forces of swelling and disintegration of alginate beads in addition to passive diffusion, depending on types of multivalent ions, gelling strength and drug solubility. It was estimated that 0.2M $CaCl_2$ concentration was optimal in terms of trapping efficiency of MT and gelling strength of Ca-alginate beads. In the gastric fluid, Ca-alginate beads gelled at 0.2 M $CaCl_2$ concentration had higher bead strength, resulting in the most retarded release when compared to other concentrations. In the intestinal fluid, the decreased release of Ca-alginate beads prepared at 0.2 M $CaCl_2$ concentration was also observed. However, release profiles of Ca-alginate beads were quite similar regardless of $CaCl_2$ concentration. Either too low or high $CaCl_2$ concentrations may not be useful for gelling and curing of alginate beads. Optimal $CaCl_2$ concentrations must be decided in terms of trapping efficiency and release and profiles of drug followed by curing time and gelling strength of alginate beads.
이전 연구에서 Streptomyces sp. M3 균주로부터 polyguluronate에 기질특이성을 가지는 알긴산분해효소를 cloning하고 활성을 연구하였다. 이번 연구에서는 pColdI vector에 들어있는 M3 알긴산분해효소 유전자를 돌연변이시켜 알긴산분해효소의 활성을 증진시키고자 하였으며, 점-돌연변이 또는 무작위-돌연변이 방법을 사용하여 돌연변이를 실시하였다. Ser25Arg, Phe99Leu, Asp142Asn, Val163Ala, Lys191Glu 및 Gly194Cys 등 6 종류의 돌연변이 단백질을 얻을 수 있었다. Phe99Leu 및 Lys191Glu 돌연변이 단백질은 알긴산을 분해하는 능력을 완전히 잃었으나 Gly194Cys 돌연변이 단백질의 활성은 원래 단백질에 비하여 10배 증가하였다. 또한 돌연변이된 M3 알긴산분해효소 단백질의 3차 구조는 Swiss-Model 자동모델러를 이용하여 생성하였으며 다른 알긴산분해효소의 결정구조와 비교하였다. 194 번째 아미노산인 글리신은 알긴산의 C-말단 보존서열인 YFKAGXYXQ의 Gly193과 Tyr195 사이에 위치한다. 이 연구에서 돌연변이된 글리신과 페닐알라닌 잔기들은 활성자리로부터 많이 떨어져있음에도 불구하고 돌연변이에 의하여 알긴산 분해활성이 강하게 영향을 받는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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