Saccharomyces cerevisiae를 이용하여 합성배지중 질소원을 변화시키면서 생성된 향기성분을 조사한 결과 아미노산에 따라서 향기의 변화가 크게 나타났으며 특히 aspartic acid 배지는 전통적인 탁주향기, leucine배지는 휴젤유취 그리고 phenylalanine배지는 꽃향기등 흥미있는 향기를 발산하였다. 이들 배양액의 휘발성 화합물을 GC를 사용하여 분석한 결과 ethanol, iso-amyl alcohol, n-propanol이 주된 성분으로 밝혀졌으며 이외에 aspartic acid 배지에서는 phenethyl alcohol이 그리고 phenylalanine배지에서는 상당량의 phenethyl alcohol과 phenethyl acetate가 검출되었다.
Possibility of utilization of fig as a source of vinegar was tested. Alcohol fermentation was conducted by inoculation of Saccharomyces bayanus into fig juice. After 5 days of fermentation at 27oC, fig wine with alcohol content of 13.6%. Then fig vinegar was produced by cultivation of Acetobacter sp. E which was isolated from fig vinegar. Optimum concentration of alcohol, starter content and fermentation temperature for the acid production were 8~9%, 5% and 27~30oC, respectively. More acetic acid was produced by adding 0.5% of yeast extract and 0.01% of Ca pantothenate. Adjustment pH of culture broth with acetic acid and shaking cultivation method were not effective in higher yield of acid production. Addition of sulfite up to 50 ppm did not inhibit for acetic acid fermentation. Addition of 1% bentonite or 1% kakishibu was more effective for the clarification of fig vinegar than any other clarifying agents tested. During aging and racking, acidity, absorbance and tannin content of fig vinegar decreased, while redness and yellowness increased. Aged and racked fig vinegar showed higher sensory score than non aged one in the aspects of color and overall acceptability.
This study was conducted to investigate the effects of Korean ginseng extracts and their fractions on the growth of Saccharomyces cerevsiae and Saccharomyces uvamm, their glucose consumption and alcohol production. The growth of both yeasts were stimulated by ginseng extracts and their water soluble fractions, but were supressed by ether extracts and an n-butanol extracts. Their growth were enhanced considerably by low molecular weight fractions (< 1,000) in water solubles. Similar results were also obtained with glucose consumption by yeasts. Substances increasing the growth and glucose consumption by yeasts proved to be a low molecular weight fractions (<1,000) in water solubles not saponins. The production of n-propyl alcohol by yeast was enhanced by adding ginseng extracts into the media, but that of ism-butyl alcohol was suppressed at same condition.
Biodiesel is produced through the transesterification process in the presence of alcohol and a catalyst that catalyzes the conversion of triglycerides to esters and glycerol compounds. A more optimal product conversion can be achieved using enzymes, such as lipase. Lipase is reported to be produced in osmophilic yeasts due to the low water content in their natural habitats. Wild forest honey is one of the osmophilic natural habitats in Indonesia. However, lipase-producing yeast has not been reported in the Indonesian honey. In this study, we screened the lipase-producing yeasts isolated from wild forest honey collected from Central Sulawesi. The production profile and activity of lipase were determined at different pH values and temperatures. One promising yeast was isolated from the honey, which was identified as Zygosaccharomyces mellis SG 1.2 based on ITS sequence. The maximum lipase production (24.56 ± 1.30 U/mg biomass) was achieved by culturing the strain in a medium containing 2% olive oil as a carbon source at pH 7 and 30℃ for 40 h. The optimum pH and temperature for lipase activity were 6 and 55℃, respectively. The enzyme maintained 80% of its activity upon incubation at 25℃ for 4 h. However, the enzyme activity decreased by more than 50% upon incubation at 35 and 40℃ for 2 h. This is the first study to report the lipase producing capability of Z. mellis. Further studies are needed to optimize the enzyme production.
Exopolysaccharide produced by the yeast Papiliotrema flavescens, isolated from wine grape berries of Champagne vineyard, was investigated for both chemical and functional characterization. SECMALLS and colorimetric assay analyses showed that the EPS is a high MW heteropolymer (2.37 × 106 g/mol) majorily consisting of mannose, glucose, xylose and glucuronic acid as monosaccharide constituents, with two substituents (sulphate and phosphate groups), and a minor protein moiety. Structural enchainment of these carbohydrates based on methylation, GC-MS and NMR analyses revealed a linear main backbone built up of α-(1 → 3)-D-mannopyranosyl residues on which are branched side chains consisting of a single β-D-glucopyranosyluronic acid residue and β-(1 → 2)-xylopyranoses (2-5 residues). Suggestion of some xylopyranose side chains containing a mannose residue at the nonreducing terminal end was also proposed. This is first report on EPSs from the grape P. flavescens yeast with such structural characteristics. Furthermore, investigations for valuating the application performance of these EPS in relation with their structural features were carried out in 8% alcohol experiment solutions. Very exceptional viscosifying and foaming properties were reported by comparison with commercial biopolymers such as Arabic, gellan and xanthan gums. The intrinsic properties of the natural biopolymer from this wild grape-associated P. flavescens yeast make it a potential candidate for use in various biotechnology applications.
조국, 분국, 맥국 누룩으로 각각 탁주, 약주, 증류주를 제조하여 이들의 품질특성 평가를 위하여 발효 시 pH, 당도, 효모 생균수, 알코올 농도 등을 분석하였고, GC를 이용하여 향기성분, LC를 이용하여 유기산을 분석하였으며 관능검사를 실시하였다. 발효가 진행되는 동안 pH는 낮아졌으나, 당도는 높아졌고 누룩의 종류에 따라 값에 차이가 있었다. 알코올 농도는 발효 12일째까지 증가 하였으나, 이후에는 유의적 차이가 없었다(p<0.05). 효모 생균수는 발효 5일째까지 급격하게 증가하였으나, 이후에는 감소하기 시작하여 발효 13일째에 주류 간에 차이가 없었다. 향기성분 중 acetone과 n-amyl alcohol은 모든 주류에서 검출되지 않았으나, fusel oil은 맥국에서 494.65 mg/L, 분국에서 525.4 mg/L가 검출되었다. 유기산 중에는 lactic acid가 가장 많이 검출되었다. 관능검사에서 탁주는 조국과 분국에서, 약주는 맥국에서 높은 점수를 얻었다. 증류주는 조국, 분국, 맥국 모두에서 유사한 점수를 얻었다.
본 연구의 목적은 yeast중 glucoamylase를 분비하는 S. diastaticus와 발효성 효모인 S. cerevisiae 간의 세포융합을 하여 당화와 발효의 두 공정을 단일화하는데 있다. 각각의 Parental protoplast를 1:1로 섞은 후 PEG(M W. 4,000) 30%와 10mM CaCl$_2$용액으로 fusion시킨 결과 $10^{-4}$~$10^{-5}$ 빈도였으며, 총 fusant중 HSDD의 경우 24%, HSDM은 36.8%가 2 회의 subculture로 친주 유리의 auxotrophic cell로 segregation하였고, glucoamylase 생성 균주 중 HSDD는 9.7%, HSDM은 12.7%만이 S. diastaticus 야생주 수준의 효소 생성을 보였다. 이들 fusant의 특징을 조사해 본 바 원 Parent보다 세포의 크기가 클 순 아니라 DNA함량도 많았으며 S. cerevisiae가 spore을 전혀 형성하지 못한데 반해 융합체들은 spore을 잘 형성하였다. 이들의 fusant중 유전안정성 이 높고 glucoamylase 생성능도 강한 HSDD-170과 HSDM-119를 최종적으로 선별하였다.
저알콜 딸기발효주 제조에 필요한 최적발효조건 설정을 위하여 발효에 적합한 효모를 선발하고, 딸기착즙액의 살균방법을 비교하였으며, 발효 중 이화학적 특성의 변화를 조사하였다. 딸기는 매향과 육보 품종을 사용하였으며, 이들은 각각 pH 3.77 및 3.69, 가용성 고형분 함량 9.8 및 9.3%, 총산 함량 0.74 및 0.69%의 이화학적 특성을 가졌다. 6종의 효모를 대상으로 발효시험을 한 결과 Wg-15 와 Sc-51 효모의 알콜생성능력이 우수하였다. 딸기에 있는 잡균을 제거하기 위하여 $K_2S_2O_5$(200 ppm) 및 열처리($85^{\circ}C$, 10 min) 시험을 비교한 결과 알콜생성량(7.1-7.2%)과 가용성 고형분 함량(5.6-5.8%)이 비슷하였으며, Wg-15와 Sc-51 효모 사이에 유의적 차이는 관찰되지 않았고, 발효주의 향에서 열처리구가 약간 좋은 것으로 나타났다. 초기 가용성 고형분 함량을 12, 14 및 16%로 조정하여 $26^{\circ}C$ 에서 8일간 발효한 결과 발효 2일째 까지 대부분의 알콜이 생성되었으며, 알콜함량은 각각 5.1 6.0-6.2, 7.5-7.7%, 가용성 고형분 함량은 각각 3.9-4.3, 4.1-4.3, 5.0-5.3%를 나타냈고, Wg-15 와 Sc-51 효모 사이에 차이는 관찰되지 않았다. 알콜함량 7% 정도의 딸기발효주를 제조하기 위해서는 매향 또는 육보 품종을 사용하여 설탕으로 가용성 고형분 함량을 16%로 보당하고, 착즙액에 대해 $85^{\circ}C$에서 10min 열처리한 후 Wg-15 또는 Sc-51 효모를 사용하여 $26^{\circ}C$에서 8일간 발효하는 것이 바람직하였다.
누룩으로부터 유당 분해능과 $CO_2$ 생성능이 있는 균주를 분리하였다. 분리한 균주의 세포파쇄액을 ${\beta}-galactosidase$ 조효소액으로 하여 효소생산을 위한 최적 배양조건에 대해 조사한 결과 $28^{\circ}C$에서 배양하는 경우 균체량과 효소생산량은 pH4.5-5.0, 28시간에서 최대치를 나타내었다. 탄소원으로서는 galactose와 Sucrose를, 질소원으로서는 urea를 사용했을 때 효소 생산량이 증가하였다. 분리한 균주의 유당 발효능을 조사하기 위해서 유청에 접종하여 알코올 생산량을 검토한 결과 유청에 있는 유당만을 이용한 경우에 최대 알코올 생산함량이 2% 정도인데, 유청에 20%(w/v)의 당 첨가에 의해서 알코올 생산함량이 12%로 증가하였다. 누룩으로부터 분리한 균주와 본 실험에서 비교군으로 사용한 S. fragilis ATCC 8583의 유당 분해능과 알코올 생성능은 매우 유사하나 유당발효에의 최적 pH가 누룩 yeast는 4.5인데 비해서 S. fragilis는 3.5이었다.
We investigated the possibility of industrial application and economit process of high temperature fermentation by thermotolerant alcohol producing yeasts as previously reported. From the 20% glucose media, the RA-74-2 produced 11.8% (v/v) ethanol at $32^{\circ}C$ (0.5% inoculum) and 10.6% (v/v) ethanol at $40^{\circ}C$ (3% inoculum), respectively. Also, 11.3% (v/v) ethanol was produced for 96 hours in the temperature-gradient fermentation. These results suggest that the RA-74-2 could isuccessfully be applied to save the cooling water and energy in industrial scale without re-investment or modification of established fermentation systems. When potato starch was used as the substrate for the RA-74-2, high temperature fermentation above $40^{\circ}C$ was more appropriate for industrial utilization because organic nitrogen was not necessary to economical fermentation. As the naked barley media just prior to industrial inoculation, taken from the Poongkuk alcohol industry Co., were used, 9.6% (v/v) ethanol was produced at $40^{\circ}C$ for 48 hours in jar-fermentor scale (actually, 9.5-9.8% (v/v) ethanol was produced at 30~$32^{\circ}C$ for 100 hours in industrial scale). The ethanol productivity was increased by the high glucoamylase activity as well as the high metabolic ratio at $40^{\circ}C$ Therefore, if the thermotolerant yeast RA-74-2 would be used in industrial scale, we could obtain a high productivity and saving of the cooling water and energy. Meanwhile, the RA-912 produced 6%(v/v) ethanol in 10% glucose media at $45^{\circ}C$ and showed the less ethanol-tolerance compared with industrial strains. As the produced alcohol was recovered by the vacuum evaporator at $45^{\circ}C$ in 15% glucose media, the final fermentation ratio was enhanced (76% of theoretical yields). This suggest that a hyperproductive process could be achieved by a continuous input of the substrate and continuous recovery of the product under vacuum in high cell-density culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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