Chemopreventive activities of polysaccharides from soybeans fermented with either Phellinus igniarius or Agrocybe cylindracea were investigated by measuring the induction of quinone reductase (QR), glutathione S-transferase (GST) activities, and glutathione (GSH) levels in the cell culture along with inhibition of polyamine biosynthesis. The polysaccharides from soybeans fermented with P. igniarius strongly (p<0.005) induced QR activity at all concentrations tested. The extract not only induced GST activity in a dose-dependent manner in the concentration range of 0.1-1.0 mg, but significantly induced GSH revels in cultured Hepa 1c1c7 cells with a maximal 1.4-fold increase at 0.1 mg. The polysaccharides from soybeans fermented with A. cylindracea were effective in inhibiting polyamine metabolism. These results suggest that polysaccharides from soybeans fermented with P. igniarius or A. cylindracea have cancer chemopreventive activities in in vitro models and, therefore, could be considered as potential agents for cancer chemoprevention.
In order to shorten cultivation periods of Agrocybe cylindracea, liquid spawn was used in place of sawdust spawn. Optimum culture condition of liquid spawn was PSB (potato extract sugar broth) medium, $25^{\circ}C$ temperature and pH 7.0. And, optimum inoculum volume was $10{\sim}15ml$. Two grams per liter of dry weight of the fungal mycelia were obtained with 10l of culture bottle with liquid spawn after 10 days. In 850 ml-bottle of sawdust media, cultivation period using liquid spawn (30 days) was five days shorter compared with the cultivation period in sawdust spawn (35 days). Also, complete growth of sawdust media was increased to 92% (liquid spawn) from 75% (sawdust spawn) and yield of fruiting bodies was increased to about 10%.
This study evaluated the optimal vegetative growth conditions and molecular phylogenetic relationships of eleven strains of Agrocybe cylindracea collected from different ecological regions of Korea, China and Taiwan. The optimal temperature and pH for mycelial growth were observed at $25^{\circ}C$ and 6. Potato dextrose agar and Hennerberg were the favorable media for vegetative growth, whereas glucose tryptone was unfavorable. Dextrin, maltose, and fructose were the most effective carbon sources. The most suitable nitrogen sources were arginine and glycine, whereas methionine, alanine, histidine, and urea were least effective for the mycelial propagation of A. cylindracea. The internal transcribed spacer (ITS) regions of rDNA were amplified using PCR. The sequence of ITS2 was more variable than that of ITS1, while the 5.8S sequences were identical. The reciprocal homologies of the ITS sequences ranged from 98 to 100%. The strains were also analyzed by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) using 20 arbitrary primers. Fifteen primers efficiently amplified the genomic DNA. The average number of polymorphic bands observed per primer was 3.8. The numbers of amplified bands varied based on the primers and strains, with polymorphic fragments ranging from 0.1 to 2.9 kb. The results of RAPD analysis were similar to the ITS region sequences. The results revealed that RAPD and ITS techniques were well suited for detecting the genetic diversity of all A. cylindracea strains tested.
Agrocybe cylindracea was cultured in a bag, in which sawdust culture medium (1 kg) is put in a plastic bag (PE), with poplar sawdust, rice bran, wheat bran, and dried bean curd refuse in the ratio of 70:10:10:10 (v/v). 2% of the culture medium was inoculated with the liquid starter of Agrocybe cylindracea, and this was incubated at $25^{\circ}C$. After incubation, the A. cylindracea was further cultured by cutting the top vinyl portion of the bag down to the level of the culture medium surface of the first inoculation part. The cut culture medium was placed in a growth room at $25^{\circ}C$, and pin-heading was induced under light irradiation at 99% humidity and 1,000 ppm $CO_$ level for 3days. When the grow the environment was controlled at 95% humidity and $21^{\circ}C$, the bending of the stem was less as compared to that when the cap of the bag had been removed. The number of effective fruiting bodies per bag increased by 140% (28.8), the quantity per bag increased by 29.5%, and 148.5 g A. cylindracea could be potentially harvested.
Thirty strains of genus Agrocybe which had been kept in National Institute of Horticultural and Herbal Science, were tested for the formation of fruiting body. Nineteen strains of collected genus Agrocybe were formed fruiting body at bottle culture of sawdust medium. Five strains (including ASI 19003) and thirteen strains (including ASI 19007) could be grouped as A. cylindracea and A. chaxingu. Although ASI 19008 showed the formation of fruiting body, morphological characteristics were significantly different from the two groups. Cultural period of ASI 19003 strain at sawdust substrates was 29 days and ASI 19007 train was 30 days in liquid spawn inoculation. The yield and quality of ASI 19003 strain was excellent in the spring, fall, and winter, whereas ASI 19007 strain was excellent in the summer. Accordingly, these cultivar might be contribute to farmers' income by stable year-round production if using the season-oriented strain.
The activities of phase II and antioxidant enzymes in the liver, lung, kidney, stomach, and colon of mice were examined following intragastric application of polysaccharides extracted from soybeans fermented with either Agrocybe Cylindracea (AC) or Phellinus ignarius (PI). The intragastric application of the extracts to mice for 14 days significantly increased the activities of quinone reductase (QP) and glutathione S-transferase (GST) in the liver and kidney, glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) in the liver, kidney, lung, and stomach, and glutathione peroxidase (GSH-Px) in the liver, lung, and kidney. In general, the elevation of the phase II and antioxidant enzymes activities was more pronounced in the liver and kidney as compared to the lung, stomach, and colon. Accordingly, these finding suggest that polysaccharides extracted from soybeans fermented with A. cylindracea or P. igniarius have a cancer chemopreventive potential in various target organs.
To find pharmacologically active components of Agrocybe cylin(Iracea, its basidiocarps were extracted with water. The extracts were separated by DEAE cellulose column chromatography, Sepharose CL-4B gel filtration, and Concanavalin A-Sepharose 4B affinity chromatography. Among the obtained fractions from A, cylinclracea, fraction IN which was the neutral proteinbound-polysaccharide fraction exhibited a marked antitumor activity and it was tentatively named "Cylindan". It showed about 70% of tumor inhibition against the solid form of sarcoma 180 when a dose of 30 mg/kg/day was intraperitoneally injected into ICR mice. When each fraction was examined by chemical analysis, Cylindan consisted of 85% polysaccharide, 3% protein and 1% hexosamine. Its polysaccharide moiety contained glucose, mannose, fucose and galactose and its protein moiety contained the comparatively large amounts of aspartic acid and glycine, and other 11 amino acids.
To find compounds of immunomodulating and anti-allergic function, effects of protein-bound polysaccharides extracted from Phellinus igniarius (PI), Fomitella fraxinea (FF) and Agrocybe cylindracea (AC) on hemagglutinin titer (HA), hemolysin titer (HY), plaque forming cell (PFC), rosette forming cell (RFC) and phagocytosis were investigated in BALB/C mice. The oral administration of the protein-bound polysaccharides of PI, FF and AC for 10 days resulted in the enhanced phagocytic activity of peritoneal exudate cells (PEC), spleen cells (SC) and blood lymphocyte cells (BLC). Moreover, PI showed the activating effect on the phagocytosis of PEC and AC in SC. In the experiment of PFC and RFC, the results of the experimental group which was given each samples as compared to the control group, showed the enhanced level of activity such as PI 130%, FF 90% and AC 70%. Generally, HY and HA showed from ten to hundred times of level in each sample groups, as compared to the control group.
Kim, Byong-Kak;Hyun, Jin-won;Yoon, Jong-Myung;Choi, Eung-Chil
Archives of Pharmacal Research
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v.20
no.2
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pp.128-137
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1997
The effects of cylindan, a polysaccharide isolated from the basidiocarps of Agrocybe cylindracea, on murine sarcoma 180 tumor and murine immune cells were examined after intraperitoneal administration. Cylindan exhibited a marked life extension effect in mice against ascite forms of sarcoma 180 and Lewis lung carcinoma at a dose of 50 mg/kg/day, although it did not show any direct cytotoxicity against sarcoma 180, X5563, and MM46 murine tumor cells. Cylindan increased numbers of bone marrow stem cells as well as peritoneal exudate cells in flow cytometry using monoclonal antibodies. The tumor bearing mice group apparently showed the increase of macrophages and cytotoxic T lymphocytes in mouse spleen cells during the early stage of tumor growth. But during the later stage, the control group decreased immune cells and cylindan restored the decreased immune cells in the tumor bearing mice to the normal level. In non-specific immune response, cylindan stimulated the bacterial phagocytosis and acid phosphatase production in macrophages. It also activated components of the alternative complement pathway and natural killer activity against YAC-1 lymphoma. In number of plasma cells as token of stimulation of the differentiation of B lymphocytes. In cellular immunity, cylindan restored the depressed response of delayed type hypersensitivity in the tumor bearing mice to 60% of the normal level and increased the interleukin-2 (IL-2) responsiveness in the IL-2 dependent CTLL-2 cells. These results suggest that cylindan did not show direct cytotoxic effects on tumor cells but restored the decreased immune response of the tumor bearing mice.
The present study examined the effects of different calcium (Ca) sources and concentrations on the growth and Ca absorption of Agrocybe cylindracea mycelia grown in submerged cultures. The dry weights of the mycelia were not significantly different (significance level of 5%) according to the type of Ca added, and increased with increasing Ca concentration until 500 mg/L, and then decreased at concentrations of 1000 mg/L or greater. The Ca contents of groups were significantly different according to the various concentrations of the Ca source, in which the Ca content of the control group cultured without added Ca was 198.3 mg/kg, and in the treatment groups, Ca content increased to a minimum of 273.7 mg/kg (1.4 times) and a maximum of 67246.0 mg/kg (339.1 times) the Ca contents of the groups generally increased with increasing Ca concentration. According to the number of culture days, growth rates were highest during days 8 through 12, and remained relatively high until day 16. In addition, Ca contents per unit dry weight were higher in young mycelia with a shorter culture period than in mature mycelia with a longer culture period. According to pH, the most active growth and highest Ca content occurred in MCM liquid medium at pH 7.0. In conclusion, in order to produce Agrocybe cylindracea mycelia with high Ca content, it is considered most efficient to culture them in MCM liquid medium without a pH adjustment and containing 1,000 mg/L of Ca-lactate, which is commonly used as a Ca additive in food, as well as to use mycelia between 12-16 days of culturing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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