A bacterial strain, CK214, exhibiting high motility on an LB agar (1.5%, w/v) surface was isolated from the environment. The formation of unusual agar shrinking around colonies on agar plates was observed. The strain grew on minimal media containing pure agar as a sole carbon source. The cell-free culture supernatant of CK214 generated a reduced form of sugar in the in vitro reaction with the use of pure agar as a substrate, suggesting the secretion of an agar-degrading enzyme. The CK214 strain showed swarming motility on the solid media containing a wide range of concentrations of agar (0.5, 1.0, 1.5, 2.0% w/v). Various tests, including Gram staining, API analysis, and phylogenetic analysis based on 16S rDNA sequences identified that the CK214 strain was a G(+) rod-shaped bacterium grouped in genus Paenibacillus. Electron microscopic analysis demonstrated that the P. CK214 strain is peritrichously flagellated. Through transposon random mutagenesis, several agar-degrading activity defective mutants (ADMs) were generated. These mutants will be used in the future experimentation for the study of the correlation between agar-degrading activity and motility.
Mycelial growth of Colletotrichun dematium and C. gloeosporioides isolated from anthracnose of Lycium chinense was favorable on V-8 Juice Agar media and Oatmeal Agar media of the four different media tested. Sporulation of C. dematium was favorable on PDA media and V-8 Juice Agar media and that of C. gloeosporioides was favorable on all media tested. The optimum temperature for mycelial growth of C. gloeosporioides and C. dematium was $25^{\circ}C$ and $28^{\circ}C$, respectively and sporulation of the fungi was stimulated under alternating NUV light and darkness. Of the seven nitrogen sources tested, gelatin was the most favorable for mycelial growth of C. gloeosporioides and glycin and gelatin were favorable for that of C. dematium. Of the eleven carbon sources tested, dextrin and sorbitol were favorable for mycelial growth of C. gloeosporioides and dextrin was the most favorable for that of C. dematium. Among the eleven fugicides tested, Benomyl, Folpet, Dithianon, Carbendazim and S-3308L were found superior for the inhibition of mycelial growth and spore germination of the fungi. They were, also, found superior for the control of anthracnose disease of L. chinense when they were applied to the plants in the field.
The distributions and characteristics of bacteria on the deodorizing biofilters were studied as a part of biofiltration research for odor gas removal. The odor gas originated from a currently operating nightsoil treatment plant were mainly nitrogenous compounds of ammonia and amines. The filter media were consisted various ratio of pine bark, nightsoil cast and compost, and were sampled before and after operation of 153 days. Before operation, the level of bacteria on nitrification agar medium, nutrient agar medium and thiosulfate agar medium were around $10^7{\sim}10^8cfu/g$ media. After operation, the level decreased but still high as $10^5{\sim}10^7cfu/g$ media. The bacteria from reactors before and after operations were either rod or coccus after growth on nitrification agar media. The 45 isolated heterotrophic bacteria were further characterized and Pseudomonas, Bacillus, Flavobacterium, Alcaligenes were dominant genera. Genus Alcaligenes was particularly dominant when the isolates were incubated on nitrification agar media first and then transfered to nutrient media. The portion of Alcaligenes in the biofilter increased after operation, and was higher in the media contained nightsoil cast, which showed better treatment than the media with pine bark only.
We determined the optimal culture conditions for obtaining the maximum number of intestinal bacteria from the olive flounder Paralichthys olivaceus, and studied bacterial diversity using both culture-dependent and culture-independent methods. Using six culture conditions, mean bacterial numbers were greater than $10^6$ per gram of gut mucus, regardless of the medium. However, the bacterial diversity, based on colony morphology, appeared much higher on Marine agar (MA) and Zobell 2216 agar than on other media. We found eight and 17 cultured bacterial phylotypes with 99% minimum similarity in gut mucus grown on MA and tryptic soy agar, respectively. Furthermore, we used genomic DNA extracted from gut mucus to generate 78 random clones, which were grouped into 25 phylotypes. Of these, six were affiliated with Firmicutes, Actinobacteria, and Verrucomicrobia, and were not found using our culture-dependent methods. Consequently, we believe that Marine agar and Zobell 2216 agar are optimal media for culturing diverse intestinal microbes; we also discovered several novel sequences not previously recognized as part of the gut microbiota of olive flounder.
Seven genera and 15 species of fungi were isolated from 50 samples of then different steps of dried onion (5 samples of each step) collected from an onion factory in Sohag Governorate, Egypt, and grown on glucose-Czapek's agar (7 genera and 15 species) and 10% NaCl glucose-Czapek's (2 genera and 6 species). The average total counts of fungi were gradually decreased throughout the different steps of drying from 2090 to zero and 152 to zero colonies/g on glucose-Czapek's agar and 10% NaCl glucose-Czapek's agar media, respectively. Aspergillus was the most common genus on the two types of media used. The dominant species were Aspergillus niger, A. flavus, A. terreus, Penicillium chrysogenum and Fusarium of oxysporum on glucose-Czapek's agar and A. terreus and A. niger on 10% NaCl glucose-Czapek's agar. The chloroform extracts of different samples were tested for the presence of mycotoxins using thin layer chromatographic analysis. The results indicated that aflatoxin was present at concentrations decreased throughout the different steps of the drying from step No. 1, onion bulbs, $120\;{\mu}g/kg$; to step No. 8, standard A, $20\;{\mu}g/kg$ while step Nos. 9 & 10 (completely dry powdered onion) were free from aflatoxin. Citrinin was also present in the first three steps at concentrations gradually decreased from 30 to 10 mg/kg.
For the more effective isolation of soil actinomycetes, we have developed HHV (Hair hydrolysate-vitamin) agar medium, containing hair as the sole source of carbon and nitrogen. The HHV agar medium was superior to other media such as colloidal chintin agar, glycerol-arginine agar and starch-casein-nitrate agar, and HV (humic acid-vitamin) agar. The maximum effect of this medium has been shown in hair dry weight 0.4 g/l medium. Of each soil sample, the greatestest number of actinomycetes was isolated from the potato annual planted soil among the tested samp- les. The genus of actinomycetes isolated from the potato annual planted soil sample was identified such 5 group as Stretomyces, Micromonospora, Microbispora, Nocardia and Saccharopolyspora.
It is proposed the polyacrylamide gel, instead of agar, could be used for the solid cultures of microorganisms including Streptomyces strains. Polymerization and gellation of 5% acrylamide solution were done by autoclaving for 5 min at 121.deg.C and no hindered by the addition of nutrient-rich media. In particular, pH buffer solution suitable for corresponding microorganisms must be used in the preparation of culture media. Comparing with agar, it was discussed that polycrylamide gel had many advantages such as gellation within the wide range of strong acid Carbon and Nitrogen sources, requirement tests of growth factors and minerals, sterization at high temperature, diffusion assays of products depending on the pore size of gel, and stability and standarization of microbial cultures.
Various methods for the isolation of salmonellae were compared by examining mesenteric lymph nodes and faeces of 395 pigs at slaughter. The conclusions were as follows. (i) Tetrathionate broth was significantly superior to selenite broth for the examination of mesenteric lymph nodes. (ii) There was no significant difference between tetrathionate broth and selenite broth for the examination of faeces. The use of both tetrathionate broth and selenite broth as enrichment media for faeces produced far better results than the use of any single enrichment medium. (iii) Brilliant green agar was significantly superior to SS agar for the examination of mesenteric lymph nodes. (iv) There was no significant difference between brilliant green agar and SS agar when faeces were examined. The use of both media produced far better results than the use of either singly. (v) Brilliant green MacConkey broth was much inferior to tetrathionate broth as an enrichment broth. Direct culture of faeces on brilliant green MacConkey agar yielded less isolates than prior enrichment in tetrathionate or selenite broth. (vi) The optimum incubation period of enrichment was 24 hours for faeces and 48 hours for mesenteric lymph nodes when either tetrathionate broth or selenite broth was used as enrichment media.
SHIN, AYOUNG;KIM, DONGSUNG;KANG, TEAWOOK;OH, JE HYEOK;LEE, JIMIN;HONG, JAE-SANG
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.23
no.3
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pp.109-124
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2018
In order to find the optimum culture condition for marine free-living nematoda in the laboratory, various agar media were developed and experiments were carried on nematodes. Nematodes have collected from the bottom of the sandy sediments' surface layer (about 5cm sediment) of Taean Mallipo beach's intertidal zone. Especially, with regard to agar medium, Killian medium was transformed slightly, density of agar had made a difference and this agar medium(height 2.0 mm on diameter 60 mm Petri dish) was divided. It was mixed with 5 different species of microorganism as nematodes' live food and added each culture medium. Five individuals of Enoplolaimus sp. on each culture medium were grown in a culture medium which was set on $20^{\circ}C$ and light blocked. Moreover, as a result of the optimum culture condition, 1.0% density of agar showed the highest survival rates (the average time of survival is 246.8 hours). On the other hand, the 0.4% density of agar adding Killian medium, bacto peptone and beef extract showed the lowest survival rates, which indicates the average time of survival is 27.6 hours. About Bathylaimus sp., on Killian medium's 1.0% density of agar(no feeding amount) showed the highest survival rates, which connects that the hatching rate 94.7% after 99.5 hours and it laid 7 eggs averagely on the spawning amount and the hatching rate experiment.
A modification of decarboxylating agar medium as described by niven was performed to improve the detection method of biogenic amine-producing bacteria and to eliminate the false-positive. A total of 120 bacterial strains isolated from kimchi were used to evaluate different dicarboxylating agar media and for screening biogenic amines. Potential false-positives ranged from approximately 66 to 79% of the strains tested in the already well-known media. In our improved medium, none of the 120 strains showed the potential false-positives. There was a good agreement (81.7%-87.5%) between the results obtained by the improved medium and by HPLC analysis. Consequently, this medium was greatly improved in screening biogenic amine-producing bacteria and discarding false-positives. Of the 120 kimchi isolates, 14.2, 18.3, 37.5, and 0.8% were found by HPLC to be the producers of histamine, tyramine, putrescine (as a form of spermine), and cadaverine, respectively. The proportion of biogenic amine producer during kimchi fermentation increased to a maximum at an immature period and decreased thereafter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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