1986년 8월부터 12월까지 낙동간 하구의 3정점에서 Aeromonas의 분포 및 이에 영향을 미치는 환경요인을 조사하였다. 조사기간 중 Aeroamonas spp. 개체수 변화는 $4.3\times10^{2}-4.6\times 10^{4}$ MPN/100ml로 기록되었다.분산분석의 결과 Aeromonas spp. 의 분포는 정점간에 유의한 차이가 이쓴 것으로 나타났으며 정점 2에서 가장 높은 개체수를, 정점 3-B에서 가장 작은 개체수를 보였다. Aeromonas spp.의 분포에 영향을 미치는 환경요인을 알아보기 위하여 중회귀 분석 및 주요인 분석(principal component analysis)을 한 결과 Aeromonas spp. 의 분포는 담수의 유출과 무기영양염류의 유입에 의해 크게 영향을 받는 것으로 나타났으며 종속영양세균, 이용가능한 질소원, 분변성대장균 및 수온고 밀접한 상관관계를 나타내었다.
현재 양식장에서는 Aeromonad를 비롯한 다양한 병원균에 의한 전염병으로 인해 많은 경제적 손실을 겪고 있다. 연어과 어류뿐만 아니라 담수 및 해수어류에도 치명적인 감염을 야기하는 Aeromonas 종은 적어도 26종 이상이 보고되어왔으며, 전염병을 유발하는 유비쿼터스 세균이다. Aeromonas 종을 확인하기 위해 16S rDNA 및 하우스 키핑 유전자의 핵산 서열을 기반으로 한 분자생물학적 기술이 사용될 수 있다. 본 연구에서 Aeromonas 종은 강원도 16개 양식장의 연어과 어류로부터 분리되었으며 Aeromonad의 16S rDNA와 하우스 키핑 유전자의 서열, 즉 RNA polymerase sigma factor ${\sigma}^{70}$ (rpoD) 또는 DNA gyrase subunit B (gyrB)를 기반으로 계통 발생 학적으로 동정했다. 그 결과 대서양 연어 (Salmo salar), 은연어 (Oncorhynchus keta), 산천어 (Oncorhynchus masou masou), 무지개송어 (Oncorhynchus mykiss)에서 96 개의 균주가 수집되었으며, 36개의 균주가 16S rDNA 분석에 의해 Aeromonas 속으로 확인되었다. 확인된 Aeromonas 속 균주는 rpoD 또는 gyrB 유전자 서열을 기반으로 추가 분석되어 Aeromonas salmonicida (24 균주), A. sobria (10 균주), A. media (1 균주) 및 A. popoffii (1 균주)로 검출되었으며, 이 것은 Aeromonas salmonicida가 강원도의 연어과 어류에서 주요 감염균임을 나타낸다. 또 하우스 키핑 유전자의 서열에 기초한 Aeromonas 종의 계통발생학적 동정은 16S rDNA 서열보다 더 정확하다는 것이 또한 증명되었다.
Genetic identification of 17 fish-derived Aeromonas strains was attempted using 5 housekeeping genes. 16S rRNA, gyrB, rpoD, dnaJ and recA genes from the 17 strains were amplified, and total of 85 amplicons were sequenced. DNA sequences of the strains and type strains of the 17 Aeromonas homology groups were used for genetic identification and phylogenetic analyses. None of the strains was identified as a single species using the 16S rRNA gene, showing the same identities (average = 99.7%) with several Aeromonas species. According to gyrB, rpoD, dnaJ, and recA, 9 strains and RFAS-1 used in this study were identified as A. hydrophila and A. salmonicida, respectively. However, the other strains were closely related to 2 or more Aeromonas species (i.e., A. salmonicida, A. veronii, A. jandaei, A. media and A. troda) depending on the genetic marker used. In this study, gyrB, rpoD, dnaJ and recA gene sequences proved to be advantageous over 16S rRNA for the identification of field Aeromonas isolates obtained from fish. However, there are discrepancies between analyses of different phylogenetic markers, indicating there are still difficulties in genetic identification of the genus Aeromonas using the housekeeping genes used in this study. Advantages and disadvantages of each housekeeping gene should be taken into account when the gene is used for identification of Aeromonas species.
The detection of virulence factors of Aeromonas is a key component in determining potential pathogenicity because these factors act multifunctionally and multifactorially. In this study water samples were collected from a trout farm on a seasonal basis, and diseased fish and Aeromonas species were isolated and identified. For rapid detection of six virulence factors of isolated Aeromonas, a hexaplex-polymerase chain reaction (hexaplex-PCR) assay was used. The detected virulence factors include aerolysin (aer), GCAT (gcat), serine protease (ser), nuclease (nuc) lipase (lip) and lateral flagella (laf). The dominant strain found in our isolates was Aeromonas sobria, and the dominant virulence factors were aer and nuc for all seasons. We confirmed that A. sobria and two of the virulence genes (aer and nuc) are related. We proposed a method by which one can identify the major strains of Aeromonas: A. hydrophila, A. sobria, A. caviae, and A. veronii, using hexaplex-PCR.
폐수처리 중 생물학적 처리에 활용할 수 있는 질소분해 능력을 가진 미생물을 분리하여 동정하고자 경기도내 하천 6지점에서 채취한 시료로부터 60개 균주를 선별하였다. 형태학적, 생화학적 및 배양학적 실험결과 Bergey\`s mannual of systematic bacteriology의 색인을 통하여 Aeromonas hydrophila로 동정하였다. Aeromonas hydrophila(AH-1), (AH-3), (AH-4), (AH-6) 균이 질산화 능력이 우수하였다. 4개 균주모두 amoxillin, ampicillin. cephalothin 과 ticarcillin에 내성을 나타내었다. 본 실험에서 분리한 Aeromonas hydrophila의 질산화의 최적조건은 균 농도 1.0$\times$$10^{6}$cells/ml, 배양온도 37$^{\circ}C$로 나타났다.
Aeromonas hydrophilia infection was diagnosed in captive Jackass penguins (Spheniscus demersus). Seven Jackass penguins showed clinical signs including depression and anorexia with greenish vomiting, but four penguins were died although extensive treatment was carried out. At necropsy, the penguins appeared to have hemorrhage and catarrhal inflammation of the small and large intestines and severe enlargement of the right hepatic lobe, elongation of the gall bladder and pyloric ulceration of the stomach. The ovaries observed atrophy and congestion. Microscopically, there were congestion, fat droplet within the cytoplasm of the hepatic cell, infiltration of lymphocytes in the stomach, vilous detachment and destroyed glandular epithelium in the small and large intestines. Aeromonas hydrophilia was isolated from the liver and small intestines. This case is the first report of an occurrence of Aeromonas hydrophilia infection at Jackass penguins in Korea.
충청남도 목천과 충청북도 오창 근교의 토양으로부터 망간을 산화하는 64 집락을 분리하고 이 중 망간 산화능이 가장 우수한 한 균주를 최종 선별하여 생리, 생화학적 특성을 조사하고, 16S rRNA 염기 서열분석 등을 통하여 동정한 결과 최종 선별된 균주는 Aeromonas sp. MN44로 확인되었다. 최종 선별된 Aeromenas sp. MN44는 lactose를 제외한 여러 당들은 이용하지 못하였으며, 중금속내성은 lithium과 manganese에 대해서는 mg/ml 단위의 높은 농도까지 중금속 내성을 가지고 있었지만 cadmium에는 전혀 내성을 나타내지 않았다. 또 kanamycin, chloramphenicol, ampicillin, tetracycline, spectinomycin등 조사한 모든 항생제에 대해 전혀 내성을 갖지 않았다. Aeromonas sp. MN44가 생성하는 망간산화물질의 최적 pH는 pH 7.4로 확인되었으며, 이 균이 생성하는 망간 산화 factor는 proteinase K와 가열처리에 의해 저해되는 단백질이고, ammonium sulfate 침전과 ion exchange chromatography 그리고 gel filtration의 단계를 통해 부분 정제한 망간 산화 factor의 분자량은 약 113 kDa로 확인되었다.
The environment has been identified as an origin, reservoir, and transmission route of antibiotic resistance genes (ARGs). Among diverse environments, freshwater environments have been recognized as pivotal in the transmission of ARGs between opportunistic pathogens and autochthonous bacteria such as Aeromonas spp. In this study, five environmental strains of Aeromonas spp. exhibiting multidrug resistance (MDR) were selected for whole-genome sequencing to ascertain their taxonomic assignment at the species-level and to delineate their ARG repertoires. Analyses of their genomes revealed the presence of one protein almost identical to AhQnr (A. hydrophila Qnr protein) and four novel proteins similar to AhQnr. To scrutinize the classification and taxonomic distribution of these proteins, all Aeromonas genomes deposited in the NCBI RefSeq genome database (1,222 genomes) were investigated. This revealed that these Aeromonas Qnr (AQnr) proteins are conserved intrinsic resistance determinants of the genus, exhibiting species-specific diversity. Additionally, structure prediction and analysis of contribution to quinolone resistance by AQnr proteins of the isolates, confirmed their functionality as quinolone resistance determinants. Given the origin of mobile qnr genes from aquatic bacteria and the crucial role of Aeromonas spp. in ARG dissemination in aquatic environments, a thorough understanding and strict surveillance of AQnr families prior to the clinical emergence are imperative. In this study, using comparative genome analyses and functional characterization of AQnr proteins in the genus Aeromonas, novel Aeromonas ARGs requiring surveillance has suggested.
자연계로부터 locust bean gum이 들어 있는 선택배지에서 투명환을 형성하는 mannan 분해능을 갖는 미생물을 스크링 하였고 이를 Aeromonas sp. 로 동정하였다. Aero monas sp. 로부터 염색체 DNA를 분리하여 EcoRI으로 절단하여 대장균에 형질전환한 후 대장균 콜로니 주위에서 locust bean gum을 분해하여 투명환을 형성하는 대장균을 찾아냈다. 형질전환된 대장균으로부터 플라스미드를 분리하여 동일한 제한효소를 처리하여 확인한 결과 10 kd의 Aeromonas sp. 염섹체 DNA에 $\beta$-mannanase 유전자 존재하였다. 대장균에서 발현된 $\beta$-mannanase 의최적 반응 pH와 최적 반응온도는 각각 6.0과 $50^{\circ}C$로서 모균인 Aeromonas sp. 와 동일하였다.
본 논문은 양식장에서 자연감염된 궤양성 가물치로부터 우점종으로 분리된 Aeromonas veronii 를 건강한 가물치에 접종한 후, 어체 각 기관의 병변 진행사항을 조직학적 측면에서 연구한 것이다. 양식장내에서 자연 간염된 어체에서의 병변과정은 관찰할 수 없었지만, Aeromonas veronii 로 인공감염시킨 어체의 병변은 자연상태에서 감염된 병변과 매우 유사하였다. 인공감염시킨 어체는 감염후 2일째부터 피부를 비롯하여 아가미, 소화관 조직에 뚜렷한 조직괴사가 식별되었고, 5일 후에는 신장, 사망 직전인 9일 후에는 간과 비장까지 조직의 괴사내지는 세포응축을 나타냈다. 병이 진행됨에 따라 가물치는 피부손상을 비롯하여 호흡, 소화흡수, 배설 등 영양대사의 저해를 수반하면서 감염후 9일이내에 사망하는 것으로 나타났다. 자연감염 어체에서 우점종으로 분리된 균주, Aeromonas veronii 는 가물치의 출혈성 궤양증을 유발하는 주된 균증의 하나로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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