Iris koreana (Iridaceae) is an endangered plant native to Korea. In order to develop an in vitro propagation method, we investigated the effect of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and a-naphthalene acetic acid (NAA) on callus induction in different I. koreana tissues. In addition, we also investigated the effect of 2,4-D and Benzyl aminopurine (BA) treatments on adventitious shoot induction in viable calli and the effect of indole-3-butyric acid (IBA) on root formation in viable shoots. We found that callus production was highest with 1.0 mg/L NAA (94.4% cultured rhizome explants), and adding low concentrations of 2,4-D to BA containing media significantly increased the frequency of shoot primordial formation. The best rooting results were obtained with 1.0 mg/L IBA, on which 98% of regenerated shoots developed roots and produced an average of 7.4 roots within 45 days. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation, as well as for mass propagation.
Habeeb Tajudeen;JunYoung Mun;SangHun Ha;Abdolreza Hosseindoust;SuHyup Lee;JinSoo Kim
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.2
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pp.351-364
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2023
The experiment was carried out to study the effect of Korean wild ginseng adventitious root supplementation on the laying performance, egg quality, cytokine expression, ginsenoside concentration, and microflora quantity of Institut de selection Animale (ISA) brown laying hens at 24 weeks old. A total of 90 laying hens were subjected to a completely randomized design at three treatments, five repetitions and six laying hens per replicate. The experiments were divided by diets into the basic feed (CON), basic feed + 0.1% wild ginseng (WG1), and basic feed + 0.5% wild ginseng (WG2). The feeding trial was carried out over a duration of 12 weeks after an initial acclimation period of 2 weeks. Feeds and water were administered ad libitum in mash form, and light was available for 16 hours per day. At the end of study, henday egg production (HDEP), average egg weight (AEW), and egg mass (EM) were increased (p <0.05) in WG2 at week 12. Feed conversion ratio (FCR) was decreased (p < 0.05) in WG2 at week 12. The ginsenoside content in egg yolk was increased (p <0.05) in laying hens in the WG2 treatment at week 12. Relative expression of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) was reduced (p < 0.05) in the WG supplemented diets at week 12. The fecal microflora quantity of Lactobacillus was increased (p < 0.05) in WG2 at week 8 to week 12, and Escherichia coli (E. coli) was significantly decreased (p < 0.05) in the WG2 at week 12. We concluded that the result observed in the HDEP, AEW, EM and FCR was due to an increase in ginsenoside content, leading to an improvement in the TNF-α, and fecal microflora quantity such as Lactobacillus and E. coli in the WG2 supplemented diets. We therefore recommend the use of WG at application level 0.5% per basal diet for optimum laying performance in layer hens.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.39
no.6
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pp.831-838
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2022
An auxin-producing bacteria, KSD16, KSD33, and KSD36 were isolated from agricultural soil. The strain KSD16, KSD33, and KSD36 was classified as a strain of Arthrobacter sp. based on phylogenetic analysis of 16S rRNA gene. The isolated KDS16, KDS33, and KSD36 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA), which is one of the auxin hormones. When the concentration of IAA was assessed the maximum concentration of IAA, 206.62 mg L-1, was detected from the culture broth incubated in R2A medium containing 0.1% L-tryptophan for 48 h at 28 ℃. To study the effect of IAA producing bacteria on germination rate, seeds of Mung bean were prepared for each treatment. KSD16, KSD33, and KSD36 showed significant increase in root length and number of adventitious roots than the controls. To investigate the growth-promoting effects on the crops, Arthrobacter species were placed in water cultures and seed pots of mung beans. In consequence, the seed germination of mung beans was 73.4% higher than the control.
Eun, Jong-Seon;Kim, Young-Seon;Park, Jong-Suk;JIN, Song Nan;CAO, Hounan
Journal of Plant Biotechnology
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v.29
no.3
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pp.179-183
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2002
This study was carried out to investigate the influence of medium composition for in vitro mass propagation of Lycoris squamigera Max. After the disks of short stems, segments of leaf within bulb and scale were cultured on MS basal medium supplemented with various plant growth regulators, they were examined for the extent of callus formation, shoot and root regeneration. In the culture of stem disks, adventitious shoots were regenerated from the basal tissue of bulb scales, and combined medium of 1.0 mg/L 2,4-D or NAA+2.0 mg/L BA or kinetin showed the the best response and 4∼6 shoots per explant formed. In the culture of leaf segments within bulbs, both MS medium supplemented with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ and with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA were produced callus profusely on the base of leaf tissue and 3∼6 shoots were regenerated per explant. In the scale segments culture, calli were produced on the basal tissue on medium with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. The best result were shown on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ, and 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. Maximum number of regenerated shoots was up to 10∼12. Adventitious root formation from explants were formed profusely on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L kinetin. The most desirable method for mass propagation of plantlets was the shoot regeneration from scale segments then subsequently subcultured on medium for rooting.
The morphology and cellular characteristics of adventitious roots, viz aerial roots, in the epiphytic American Ivy were examined to reveal structural changes of the aerial root upon surface attachment. Immature aerial roots were composed of parenchyma cells with dense cytoplasm containing plastids, however, the upper and lower epidermis were not distinguished. At early development, electron-dense substances (EDS) were constituents of much of the aerial root tissue, but the distribution of EDS varied within the tissue. The deposits appeared most concentrated in the superficial cell layers, with lesser amounts in cell layers closer to the cortex. Electron micrographs revealed that EDS deposits were always found in the vacuole, and were mainly associated with the tonoplast. While most of them occurred in the vacuole as small spherical deposits adjacent to the tonoplast, some deposits were oddly shaped or larger in size. Many of the vacuoles eventually filled with EDS, but the EDS content in those vacuoles decreased substantially after initial attachment to the surface. When the vacuoles became almost empty, cells near the epidermis already exhibited irregularity in outline. Subsequent breakdown of cellular components took place in the cells while they were still attached to the surface. This study suggests the potential role of EDS as substances involved in the surface attachment of the plant, however, further studies must be conducted to reveal the nature of EDS and the effects of EDS storage within these vacuoles.
An auxin-producing bacteria (2SJ8-02) was isolated from waste mushroom bed of Agaricus bisporus in Buyeo-Gun, Chungnam. The strain 2SJ8-02 was classified as a novel strain of Pantoea rwandensis based on a chemotaxanomic and phylogeneticanalyses. The isolate was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA), one of auxin hormones, by TLC and HPLC analyses. The maximum concentration of IAA, $122mg\;L^{-1}$ was detected from the culture in R2A broth containing 0.1% tryptophan for 24 h at $35^{\circ}C$. The molecular weight of the main peak obtained by LC-mass analysis was 175 corresponding to that of IAA. To investigate the growth-promoting effects to the crops, the culture broth of Pantoea rwandensis 2SJ8-02 was infected to water cultures and seed pots of mung bean. In consequence, the adventitious root induction and root growth of mung bean were two times higher than those of the control.
Large-scale cultures of plant cell, tissue, and organ have been achieved by using BTBB. When different sized BTBBs (5 L, 20 L, 100 L, 300 L, and 500 L) were tested for the culture of yew cells (Taxus cuspidata Sieb. et Zucc.), cell growth increment reached to 94.5% in SCV after 24 days of culture with 30% of inoculation cell density. However, there were some variations in the production of taxol and its derivatives among the BTBBs of different size. Approximate 4 ㎎/l of taxol and 84 ㎎/l of total taxanes were obtained by using a 500L BTBB after 6 weeks of culture. With a 20L BTBB, about 20,000 cuttings of virus-free potatoes (cv. Dejima) could be obtained by inoculating 128 explants and maintaining 8 weeks under 16 hr light illumination. The frequency of ex vitro rooting of the cuttings revealed as more than 99% under 30% shade. By incorporating two-stage culture process consisting of multiple bulblet formation in solid medium and bulblet development in liquid medium, mass propagation of lily through bioreactor seemed to be possible. In the case of 'Marcopolo', the growth of mini-bulblets in BTBB was nearly 10 folds faster than that of the solid medium. Time course study revealed that maximum MAR yield of ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) in a 5 L and 20 L BTBB after 8 weeks of culture was 500 g and 2.2 ㎏, respectively. By cutting the MAR once and/or twice during the culture, the yield of root biomass could be increased more than 50% in fresh weight at the time of harvest. With initial inoculum of 500 g of sliced MAR in a 500 L BTBB, 74.8 ㎏ of adventitious root mass was obtained after 8 weeks of culture. The average content of total ginseng saponin obtained from small-scale and/or pilotscale BTBBs was approximately 1% per gram dry weight. Based on our results, we suggest that large-scale cultures of plant cell, tissue, and organ using BTBB system should be quite a feasible approach when compared with conventional method of tissue culture.
We examined the in vitro rooting and survival of tissue cultured plantlets of Quercus acutissima Carr. and Pinus densiflora Sieb. et Zucc. after addition of Pisolithus tinctorius(Pt) ectomycorrhizal fungus inoculum to the medium and effects of three levels of sucrose and phosphorus in culture media. Shoots of Quercus acutissima were obtained from winter buds of a 30-year old tree and cuttings of Pinus densiflora from germinated seed, and they were inoculated with Pt in vitro. In both species, Pt enhanced shoot length, survival, number of adventitious roots, root length, and rooting percentage. Survival in Quercus acutissima was increased from 75% in control to 100% in Pt inoculation. Pt inoculation increased the percentage of rooting from 20% to 70% in Quercus acutissima cuttings and from 63% to 100% in Pinus densiflora cuttings. It is concluded that mycorrhizal inoculation to tissue cultured Quercus acutissima Carr. and to in vitro cutting of Pinus densiflora Sieb. et Zucc. has practical application to improvement of poor root development and initial period of reduced shoot growth in vitro.
Mountain ginseng is a perennial crop rarely found in the deep mountains of Korea. The medicinal effect of the mountain ginseng is well known as a panacea in traditional Chinese medicine for a long time. But scientific studies to elucidate the medicinal effect of the mountain ginseng have never been made on account of lack of sample. Recently an improved method of adventitious root culture system through the use of bioreactor has been developed in Panax ginseng that seems to be a reliable way of commercialization of root derived secondary metabolites. This experiment was conducted to evaluated chemotherapeutic effect against human cervical cancer cells by cisplatin (CDDP) and extract of tissue cultured mountain ginseng (ETCMG). CDDP and ETCMG-induced apoptotic cell death in human cervical cancer cell line, HeLa was confirmed by the analysis of cell growth, morphological changes, DNA fragmentation, flow cytometry showed that ETCMG is an inducer of apoptosis and synergizes with CDDP. These results suggest that ETCMG present evidence of anticancer effect and could have a possibly natural therapeutic potential in cervical cancer patients.
In order to develop a disease-resistant root stock for the growth of watermelon, an efficient regeneration system of the gourd(Lagenaria leucantha Duch.) inbred line GO701-2 via organogenesis was established in this experiment. Using proximal parts of cotyledon explant excised from germinated seedling in vitro, maximum adventitious shoot formation (39%) was achieved on MS medium where cytokinin (BA) and auxin (IAA) were added at a concentration of 3mg/L and 0.1mg/L, respectively. Roots of the elongated shoots were successfully formed on MS medium without adding any plant growth regulators. The cucumber CsGolS1 gene known as a resistance gene against biotic and abiotic stresses, was constructed into the binary vector pBI121 under the control of CaMV 35S promoter. When the gene was introduced into the genome of gourd by Agrobacterium-mediated transformation, putative transgenic plants were obtained with the transformation efficiency of approximately 20 percent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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