• 제목/요약/키워드: Acid-fast staining

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Multicenter Evaluation of Seegene Anyplex TB PCR for the Detection of Mycobacterium tuberculosis in Respiratory Specimens

  • Lim, Jinsook;Kim, Jimyung;Kim, Jong Wan;Ihm, Chunhwa;Sohn, Yong-Hak;Cho, Hyun-Jung;Kim, Jayoung;Koo, Sun Hoe
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제24권7호
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    • pp.1004-1007
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    • 2014
  • Culture is the gold standard for diagnosis of tuberculosis, but it takes 6 to 8 weeks to confirm the result. This issue is complemented by the detection method using polymerase chain reaction, which is now widely used in a routine microbiology laboratory. In this study, we evaluated the performance of the Seegene Anyplex TB PCR to assess its diagnostic sensitivity and specificity, and compared its results with the Roche Cobas TaqMan MTB PCR, one of the most widely used assays in the world. Five university hospitals located in the Chungcheong area in South Korea participated in the study. A total of 1,167 respiratory specimens ordered for acid-fast bacilli staining and culture were collected for four months, analyzed via the Seegene Anyplex TB PCR, and its results were compared with the Roche Cobas TaqMan MTB PCR. For detection of Mycobacterium tuberculosis, the diagnostic sensitivity and specificity of the Anyplex TB PCR were 87.5% and 98.2% respectively, whereas those of the Cobas TaqMan were 92.0% and 98.0% respectively (p value > 0.05). For smear-positive specimens, the sensitivity of the Anyplex TB PCR was 95.2%, which was exactly the same as that of the Cobas TaqMan. For smear-negative specimens, the sensitivity of the Anyplex TB PCR was 69.2%, whereas that of the Cobas TaqMan TB PCR was 84.6%. For detection of MTB, the Seegene Anyplex TB PCR showed excellent diagnostic performance, and high sensitivity and specificity, which were comparable to the Roche Cobas TaqMan MTB PCR. In conclusion, the Anyplex TB PCR can be a useful diagnostic tool for the early detection of tuberculosis in clinical laboratories.

대추나무 미친병에 관한 연구(II) -엽 유관속구조에 미치는 해부학적 영향에 대해서-

  • 홍순우
    • Journal of Plant Biology
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    • 제3권2호
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    • pp.29-34
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    • 1960
  • From the view point of phytopathological anatomy, the author has tried to study the effect of the shoot cluster disease virus on the internal structure of vascular tissues of chinese date tree (Ziziphus jujuba var. inermis Rehd.) comparing healthy checks and diseased plants. The materials were collected at the several sites, Kumgock-Ri, Masuc-Ri, Kyungi-Do, and near the campus of Korea University and around the area of Chongam-Dong, Seoul City, from August 15th to September 5th 1959. The leaf materials of healthy and diseased plants are fixed and aspirated in two kinds of killing solutions, formalin-acetic acid alcohol solution and Craf III solution. Sections were cut at 5-10$\mu$ thickness and stained with the double staining reagents of safranin and fast green. In this experiment the author has observed that there are marked structural changes in the infected plants in contrast of healthy checks. As figures 3-7 show that the following characteric changes have taken place on infected plants: 1) the arrangement of irregularly developed sieve elements in phloem, 2) the degeneration of phloem elements, 3) the irregular arrangement of epidermis in mid-vein, 4) more necrosis is observed among the parenchymatous cells, 5) abundant accumulatin of starch grains in parenchymatous cells, . In contrast to the above irregularities caused by the virus disease, the healthy checks appear normal structures as shown in figures 1 and 2. In adding to the all features noted above, the author could also observe an interesting feature that the xylem elements in mid-vein vascular bundle tissues are considerably disorganized to show the unspecialized vessel elements, the irregularly arranged xylem elements. However, this kind of irregularities which occur in xylem under the virus infection has not been reported previously. The features noted on the internal structure of vascular bundle under the condition of infection by the shoot cluster disease on chinese date trees appear to be more or less closely similar to the symptoms of the bunchy-top of banana and the yellow dwarf disease of barley in respect to the fact that whether phloem necrosis takes place as a primary symptom or a secondary symptom. In all these disease, primary histological changes of hypoplasia and hypertrophy are preceeded by the necrosis of phloem.

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경부 임파절에서 Polymerase Chain Reaction(PCR)을 이용한 결핵균의 진단에 관한 연구 (Diagnosis of Tuberculous Cervical Lymphadenitis Using Polymerase Chain Reaction)

  • 김호중;현인규;이명구;정기석;안혜경
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제42권1호
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    • pp.35-41
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    • 1995
  • 연구배경: 결핵성 경부임파선염의 진단은 임상소견, 흉부 X-선검사, 튜베르큘린검사의 비관혈적 방법으로 내리기 어려워, 경부 임파절 생검을 필요로 하는 경우가 많다. 저자들은 종합효소연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR) 기법을 이용하여 결핵성 경부임파선염을 진단할 수 있는지 알아보고, 가능하다면 그 유용성을 평가해 보고자 본 연구를 시행하였다. 방법: 경부 종물로 내원한 환자의 생검 조직과 세침흡인 검체 29예에서 DNA를 추출하여, 결핵균 DNA인 IS6110의 일부를 복제하기 위한 IS-1,-2를 primer로 사용하여 PCR을 시행하였다. 결과는 임상적 진단 및 병리, 세균학적 진단과 비교하였다. 결과: 평균 107.5mg의 생검조직과 2회 세침흡인 검체에서 추출한 DNA의 양은 각각 평균 $32.46{\pm}17.22mg$$220{\pm}140ng$이었고 $OD_{260}/OD_{280}$은 각각 $2.11{\pm}0.23,\;2.76{\pm}0.39$이었으며, 상존유전자인 $\beta$-actin 유전자를 목표로 하는 PCR은 전예에서 양성이었다. 병리학적으로 결핵으로 진단한 8예중 8예 전예에서, 병리소견상 확진되지 않았으나 임상적으로 결핵성 경부임파선염으로 진단한 8예중 5예에서, 병리학적으로 악성 임파절전이나 갑상선낭종으로 진단되어 결핵성 경부임파선염이 배제된 6예중 0예에서, 그리고 임상적으로 결핵성 경부임파선염이 배제된 7예중 2예에서, 결핵균 DNA를 목표로 한 PCR 결과가 양성이었다. 결론: 경부 임파절 조직과 세침흡인 검체의 결핵균 PCR 기법은 결핵성 경부임파선염의 진단에 유용한 방법이라고 생각한다.

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경부 결핵성 임파선염 환자에서 PCR-RELP를 이용한 결핵균의 검출 및 확인 (Detection and Identification of Mycobacterium Tuberculosis in Patients with Tuberculous Cervical Lymphadenitis by PCR-RFLP)

  • 이상숙;조영록;전지민;최용석;손은주;박남조;박준식
    • 대한두경부종양학회지
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    • 제12권2호
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    • pp.169-176
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    • 1996
  • 결핵의 진단은 특징적 병리조직양상, 항산균 염색에 의한 균 증명과 M. tuberculosis균 배양으로 이루어지나 형태적으로는 결핵이 의심되더라도 항산균이 조직표본이나 도말에서 검출되지 않거나 M. tuberculosis가 배양되지 않아 정확한 원인적 진단이 불가능할 경우가 많다. 이에 저자들은 경부 결핵성 임파선염으로 적출되어 보내어진 경부 임파선 조직의 신선한 조직이나 통상적으로 처리되어 제작된 파라핀 블록을 이용하여 M. tuberculosis에 특수한 반복성 DNA sequence인 IS986를 표적으로 한 primers을 사용하여 nested PCR방법을 이용하여 예민도가 높은 M. tuberculosis 검출로 빠른 시간 내에 결핵을 진단하고자 본 연구를 실시하였다. 최근 유전자 기술의 진보로 M. tuberculosis의 여러 항원들의 유전자가 클론화되고 그 염기 배열이 밝혀졌으며 이에 저자들은 결핵의 확진을 위하여 파라핀 포매조직을 대상으로 nested PCR에 의한 188bp의 DNA를 증폭한후 증폭한 DNA분절의 염기 배열을 결정한 후 Bst UI와 Hha I 효소를 이용한 소화과정을 거친 후 restriction fragment length polymorphism(RFLP)을 은염색에 의해 그 패턴에 의해 M. tuberculosis를 확인하고 또한 다른 종의 Mycobacteria를 배제시킬 수 있었다. 본 방법은 1$\sim$2일에 끝나며, 방사선물질을 사용하지 않으면서도 감도 및 특이성이 우수하여 일반 병리실힘실에서도 M. tuberculosis를 포함한 각종 항산균의 신속한 검출법으로 손쉽게 사용할 수 있다고 생각되어 이에 보고하였다.

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임상 검체에서 결핵균 검출을 위한 항산성염색, PCR, LCR, PCR-Hybridization 검사법 간의 비교 (Comparison of Acid-Fast Staining, PCR, LCR, PCR-Hybridization for Detection of Mycobacterum Tuberculosis in Clinical Specimens)

  • 최종락;임종백;김현중
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제49권3호
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    • pp.281-289
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    • 2000
  • 배경 : 결핵의 진단에 있어 결핵균 배양검사는 결핵의 확진 검사이지만 배양에 최소한 6-8주가 소요되어 진단 및 치료가 지연되는 단점이 있다. PCR 법은 신속하고 예민하게 결핵균을 검출할 수 있지만 위양성율과 위음성율이 높아 문제시 되고 있다. 최근에 개발된 LCR법과 PCR-Hybridization은 PCR 법 보다도 민감하게 결핵균을 검출할 수 있는 것으로 알려져 있다. 이에 저자들은 하상균 배양을 기준으로 in house PCR, LCR 및 PCR- Hybridization 각각의 임상적 유용성을 알아보고자 한다. 방법 : 1998년 8월에 결핵진단을 위해 세브란스 병원 임상 병리과에 의뢰된 75검체를 대상으로 AFB 도말 염색 검사, 결핵균 배양 검사(3% Ogawa 배지, 8주간), in house PCR, LCR(Abbott LCx kit) 및 PCR Hybridization을 시행하여 각각의 민간도와 특이도를 평가해보았다. 결과 : 항산균 배양법을 기준으로 판단할 때 in house PCR, LCR(Abbott LCx kit) 및 PCR-Hybridization의 민감도는 각각 40%, 80%, 100%였고 특이도는 98.6%, 94.3%, 94.3%였다. 결론 : LCR법과 PCR-Hybridization은 결핵균 검출에 있어 우수한 민감도와 특이도를 보여 결핵의 조기진단에 유용할 것으로 사료된다.

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결핵과 호지킨 림프종이 액와부 림프절에 공존하였던 1예 (Coexistence of Hodgkin's Lymphoma and Tuberculosis in the Same Axillary Lymph Nodes)

  • 반우호;강현희;백명기;김재경;김현진;백인운;김은오;고선혜;이상학;문화식;민기옥
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제70권4호
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    • pp.342-346
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    • 2011
  • Herein we report the case of a 71-year-old woman who complained of fatigue and enlarged right axillary lymph nodes for 18 months. At her first visit, her chest X-ray showed diffuse nodular opacities in both lung fields. Initial excisional biopsy of the axillary lymph nodes showed granulomatous lesions and acid fast bacilli were seen on Ziehl-Neelsen staining. However, even after 15 months of anti-tuberculosis (TB) medication, her right axillary lymph nodes were enlarged. We re-performed an excisional biopsy of the nodes, which showed Hodgkin's lymphoma (HL). A retrograde review of the biopsy before anti-tuberculous medication, revealed HL coexisting with TB. HL and TB cause difficulties in differential diagnosis due to similarities in clinical course, imaging procedures and histopathological analysis of the involved tissue. Therefore, it is important to consider the possibility of concurrent HL and TB when patients who undergo treatment for TB or chemotherapy for lymphoma complain of persistent systemic symptoms or enlarged lymph nodes.

폐결핵 진단을 위한 실시간중합효소연쇄반응과 AFB 염색진단검사의 정량적 연관성 비교 (Comparison of Quantitative Relationship between Real-Time PCR and Acid Fast Bacilli Staining for Diagnosis of Pulmonary Tuberculosis)

  • 정태원;김상하;김성현;최재선;김영권
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제52권4호
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    • pp.335-341
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    • 2020
  • 본 연구는 Cobas TaqMan MTB 검사(CTM test, Roche Diagnostics, Basel, Switzerland)와 항산균 도말염색검사의 연관성을 확인하고 그에 따른 반정량적 판정기준을 확립하고자 하였다. 2015년 1월부터 2015년 12월까지 삼성서울병원 진단검사의학과에 의뢰된 8,389개의 검체에 대해 결핵균 도말 검사, 배양 검사 및 CTM 검사를 동시에 실시하였으며, 그 결과를 분석하여 AFB 염색과주기의 연관성을 후향적으로 분석하였다. CTM 검사의 임계 값(Ct)값으로, 결핵균 검출방법의 반정량적 판정기준을 설정 하였다. CTM 검사의 135개의 양성 표본에 대한 Ct값은 항산균 도말염색과 반비례적 상관관계가 있었다(rs=-0.545, P<0.01). CTM 검사와 항산균 염색 등급의 음의 상관관계가 입증되었으며, 임상 기준에 이러한 기준을 적용하여 임상적 의의를 검증하였다. 이 연구의 반정량적 기준은 병원에서 활동성 결핵 및 감염을 일으킬 수 있는 환자의 빠른 진단의 판단에 도움이 될 것으로 사료된다.

급성 호흡기 감염으로 입원한 소아에서 호흡기 감염의 원인: 중복검출의 임상적 의미 (Clinical significance of codetection of the causative agents for acute respiratory tract infection in hospitalized children)

  • 노의정;장영표;김재경;임인수;박귀성;정은희
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제52권6호
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    • pp.661-666
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    • 2009
  • 목 적 : 최근 호흡기 감염의 원인에 대한 검사 방법의 발달로 중복검출에 대한 높은 비율이 보고되고 있다. 이에 소아에서의 급성 호흡기 감염의 원인으로 중복검출에 대한 임상 양상과 그 특징에 대해 알아보고자 하였다. 방 법 : 2003년 9월부터 2005년 6월까지 단국대학교병원 소아과에 급성 호흡기 증상으로 입원한 환아들을 대상으로 의무기록지를 후향적으로 조사하였다. 비인두 흡인물의 호흡기 바이러스(AdV, RSV, PIV 1, 2, 3, IFA, IFB)의 항원과 배양 검사, 혈청의 MP 항체 측정(1:640 이상 혹은 4배 이상의 항체 상승시 양성으로 함), 비인두 흡인물의 MP PCR, CT 항원의 PCR 검사, enterovirus PCR 및 배양검사, 객담의 항산균 도말 염색 및 배양 검사를 받은 환아들 중 2가지 이상에서 양성으로 나온 환아들의 임상 양상에 대해서 조사하였다. 결 과 : 1) 호흡기 감염의 원인에 대한 검사에서 2가지 이상의 양성을 보인 환아는 총 28명이었으며 남아가 17명이었고, 평균 나이는 2년 3개월(19일-13세), 6개월 미만이 11명이었다. 2) 중복검출의 원인 중 RSV가 14례, PIV 3 10례, AdV 10례, MP 8례, PIV 2가 7례, CT, PIV 3가 각각 3례였다. 중복검출되는 원인으로 RSV+PIV 2 6례, AdV+MP 4례, AdV+PIV 3, RSV+MP, PIV 1+PIV 3가 각각 3례였다. 3) 임상 진단으로 폐렴 19례, 세기관지염 16례, 후두염이 3례였으며, 4) MP, 호흡기 바이러스의 각각의 유행 시기에 이들에 의한 중복검출이 있었다. 결 론 : 소아의 급성 호흡기 감염의 원인에 대한 중복검출은 영아에서 흔하며, 원인으로 RSV, PIV, AdV, MP가 많았다. MP, 호흡기 바이러스의 각각의 유행 시기에 이들에 의한 중복 검출률의 빈도가 증가함을 볼 수 있었다. 호흡기 감염의 원인에 대한 검사 방법의 발달로 중복 검출률이 높아지고 있어 이의 임상적 의미에 대한 연구가 더 필요하다고 사료된다.

굴 패각 구연산칼슘이 Papain으로 유도된 골관절염 C57BL/6J Mice에 미치는 영향 (Effects of Calcium Citrate Isolated from Oyster Shell on Papain-induced Osteoarthritis in C57BL/6J Mice)

  • 최은영;김학주;한지숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제43권10호
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    • pp.1510-1518
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    • 2014
  • 본 연구에서는 구연산칼슘 투여가 papain으로 유도된 골관절염 동물모델에 미치는 영향을 살펴보았다. 8주령의 C57 BL/6J 마우스의 우측 슬관절강에 papain $6{\mu}L$를 투여하여 골관절염을 유발하였다. 실험군은 각 군당 8마리씩 체중이 고르게 배정하여 총 5군으로 나누었다. 정상군은 우측 슬관절강에 생리식염수 $6{\mu}L$를 주사하였고, 대조군, 약물투여군, 구연산칼슘 투여군은 papain $6{\mu}L$로 골관절염을 유발하였다. 정상군과 대조군은 0.2 mL의 생리식염수를, 약물투여군은 diclofenac sodium 2 mg/kg/bw를, 구연산칼슘 투여군은 150, 300 mg/kg/bw를 28일간 1일 매일 정해진 시간에 1회 경구 투여하였다. 실험기간 동안 체중을 측정하였으며, 실험 종료일에는 부검하여 슬관절의 병리조직학적 관찰을 하였고 관절연골 내 proteoglycan 함유율, 골관절염 지수의 변화, 혈액 내 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6 함량을 측정하였다. 체중은 실험기간 동안 모든 개체 간의 유의적인 차이는 없었다. 혈액 내 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6 함량은 papain 투여 대조군이 정상군에 비해 유의적으로 증가하였으며 약물 및 구연산칼슘 투여군은 대조군보다 유의성 있게 낮았다. 관절연골 내 proteoglycan의 함유율은 약물 및 구연산칼슘 투여군이 papain 투여 대조군보다 유의성 있게 높았다. Hematoxylin과 eosin 염색 관찰 결과, 골관절염이 유발된 마우스에 구연산칼슘을 경구 투여하였더니 관절연골의 파괴와 골 침식 등 연골의 변성이 약물 투여군과 유사하게 나타났다. 이와 같은 결과는 구연산칼슘이 papain으로 유도된 골관절염에서 연골의 변성을 줄이고 염증을 억제함으로써 골관절염 치료에 효과가 있은 것으로 사료되며, 추후 더 자세한 연구가 필요하다.

결핵성 경부 림프절염의 병리소견과 항산균 검출 및 임상소견에 관한연구 (Cervical Tuberculous Lymphadenitis : Clinicopathological Features and AFB Positivity)

  • 황영준;고미혜;윤세영;김용호;김도형;이계영;김건열;명나혜;박재석
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제48권5호
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    • pp.720-729
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    • 2000
  • 연구배경 : 결핵의 병리소견은 하나의 스펙트럼을 이루는데, 결핵균에 대한 면역기능이 정상이면 육아종의 형성이 좋고 결핵균이 거의 발견되지 않지만, 결핵균에 대한 면역 기능이 저하되어 있으면 육아종의 형성이 나쁘며 많은 결해균이 발견된다. 이에 저자들은 결핵성 경부 림프절염 환자의 림프절 조직에서 결핵균에 대한 면역기능의 정도를 알아보기 위해 병리소견과 항산균의 유무를 분석하고 임상적인 특징과 관련이 있는지 알아보고자 하였다. 방법 : 조직검사로 결핵성 경부 림프절염으로 진단받은 33명의 환자들의 병리소견을 분석하고 조직표본들을 탈파라핀화한 후 auramine-rhodamine 염색을 시행하여 조직에서의 항산균 유무를 검사한 후, 조직에서의 결핵균 검출 유무가 병리적인 특성(육아종의 형성정도, 건락성 과시의 유무, 중성구의 침윤) 또는 임상적인 특성(림프절의 크기, 림프절의 발견시점에서 조직검사까지의 기간, 림프절 부위의 통증이나 압통의 유무, 흉부방사선 소견상 결핵 소견의 유무)과 연관성이 있는지 알아보았다. 결과 : 1) 대상환자의 평균연령은 42.4세였고, 남녀비는 1:4.5였다. 2) 조직검사 소견 상 모든 예에서 육아종의 형성이 좋았고, 다양한 정도의 건락성 괴사가 관찰되었으며, 39%에서 육아종성 염증 주위로 다형백혈구의 침윤이 관찰되었다. 3) 52%의 예에서 조직표본에서 항산균이 검출되었고, 항산균은 세포 외에 존재하였고, 건락성괴사 부위의 가장자리에서 주로 발견되었다. 4) 조직에서의 항산균 검출 유무와 병리학적 특성 또는 임상적 특성과는 연관성이 없었다. 결론 : 결핵성 경부 림프절염의 경우 육아종의 형성이 좋았고, 조직에서의 항산균 검출 유무와 병리적 또는 임상적 특성과는 연관성이 없었다.

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