황백 껍질은 황벽나무(Phellodendron amurense)의 건조된 수피로부터 얻어진다. 이 수피는 한국의 전통 한약제로서, 설사, 황달, 무릎과 발의 통증, 요도관 및 피부 감염증에 폭넓게 사용되어 왔다. 본 연구는 황벽나무의 메탄올 추출액으로부터 항균성 화합물 분리를 위해 CPC 방법으로 효과적으로 수행하였다. 두 용매의 CPC 최적조성은 n-butanol:acetic acid:water(4:1:5 v/v/v)이었다. 이동상의 유속은 1,000 rpm 회전력에서 상승법으로 분당 3 $m{\ell}$ 속도로 전개시켰다. CPC에서 분리된 분획분은 prep-HPLC로 정제하였다. 분리된 palmatine은 $^1H$, $^{13}C$-NMR, ESI-MS 데이터 분석으로 확인하였다.
Cactus (Opuntia ficus-indica var saboten Makino) is a tropical or subtropical plant, which is widely used as folk medicine for burned wound, edema and indigestion. We previously found that the ethanol extract of cactus stem showed anti-inflanunatory action. This investigation was designed to isolate the active fraction of anti-inflanimatory action from cactus stem by solvent extraction and colunm chromatography. Carrageenan-induced paw edema in rats and acetic acid-induced writhing test in mice were used as animal models to search anti-inflammatory and analgesic activities. respectively. The ethanol extract of cactus stem was consecutively extracted with hexane, ethyl acetate, and n-butanol. The hexane fraction was the most effective in carrageenan-induced paw edema, and then was separated in colunm chromatography of silica gel by the elution with hexane/ethyl acetate mixture. The most effective fraction 1 was separated in a second colunm chromatography by eluting with hexane/diethyl ether mixture. The most effective fraction 1-5 was obtained, and separated in a third column chromatography by eluting with hexane/chloroform mixture. It produced the most effective fraction 1-5-1. Moreover, fraction 1-5-1 showed an inhibitory effect on acetic acid-induced writhing in the doses of 30mg/kg and 60mg/kg,p.o.,indicating that it also contained analgesic activity.
세 종류의 누룩으로 분국(밀가루), 상황버섯국, 생강국을 제조하였고, 이들 누룩으로 탁주, 약주, 증류주 등을 빚어 품질 특성을 비교하였다. 누룩의 당화력, 발효액의 pH, 당도, 산도, 알코올 함량, 효모수 등을 분석하였고, GC를 이용하여 탁주, 약주, 증류주의 향기성분, HPLC를 이용하여 유기산을 분석하였으며, 관능검사를 실시하였다. 누룩의 발효 후 당화력은 상황버섯국이 가장 좋았고, 건조 후에는 상황버섯국과 생강국이 좋았다. 발효 시간에 따른 술덧의 pH와 당도는 발효가 진행됨에 따라 낮아졌고, 산도는 증가하였다. 효모수는 발효 1일에 상황버섯국으로 빚은 술덧에서 가장 많았고, 발효가 진행됨에 따라 증가하다 감소하였다. 술덧의 알코올 함량은 발효 초기에 비하여 발효가 진행됨에 따라 증가하였고, 발효 8~10일에 세 시료 간 유의적 차이가 없었다(p<0.05). 술의 향기성분 분석에서 탁주, 약주, 증류주 모두 acetone과 n-amyl alcohol은 검출되지 않았고, 알코올 성분 중 탁주와 약주에서 n-butanol이 가장 많이 검출되었고, 다음이 i-amyl alcohol 이었다. 그러나 증류주에서는 i-amyl alcohol이 가장 많이 검출되었다. Fusel oil은 분국으로 빚은 증류주에서 가장 많이 검출되었다. 술의 유기산은 탁주와 약주에서 lactic acid가 가장 많이 검출되었고, 다음이 acetic acid이었다. 증류주에서는 acetic acid 소량 검출되었고, 다른 유기산들은 검출되지 않았다. 관능검사에서 상황버섯으로 빚은 탁주, 약주, 증류주에서 가장 높은 점수를 얻었다. 본 연구에서 상황버섯국으로 빚은 탁주, 약주, 증류주가 가장 바람직한 것으로 나타났다.
고려인삼학회 1998년도 Advances in Ginseng Research - Proceedings of the 7th International Symposium on Ginseng -
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pp.160-167
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1998
Chemical studies of nitrogen compounds of Panax ginseng seem relatively rare, Probably due to the isolation difficulties, subsequently the investigations of biological activities are little. The experimental conditions were established for highly complete extraction of peptides (basic, acidic and neutral) from Panax ginseng. This task was achieved by applying the follow isolation procedure: 1 , the sequential extraction with water, 0.1% TFA in 20% acetonitril and buffer pH 6.5 (water-pyridine-acetic acid 100:3:900) : 2, fractionation by ultrafiltration : 3, n-butanol extraction 4, cation- and anion-exchange chromatography : 5, chromato-electrophoresis. The comparison of red ginseng (xylem Sl pith part) and red ginseng inside white (xylem Sc pith part) was also provided. To analyze the peptide mixture the chromato-electrophoresis method of separation was applied. Optimal conditions for peptides mapping of sample were explored. Our experiments revealed the quantitative difference of peptide between xylem & pith and phloem & cortex part. We have also found the qualitative difference in the composition of polypeptides between normal red ginseng (xylem Sc pith part) and red ginseng inside-white (xylem St pith part)
삼지구엽초의 각 부분(잎, 줄기, 뿌리)을 MeOH로 추출한 후 농축하고 핵산, 클로로포름, 부탄올, 에틸아세테이트 및 수용성으로 분획하여 동결건조하였다. 각 추출물은 메탄을 수용액 및 에탄올-핵산 혼합액을 사용하여 Sephadex LH-20 칼럼크로마토그래피로 화합물을 분리 한 후 TBA 및 6% 초산에 전개하는 셀룰로오스 박층 크로마토그래피로 단리물질을 확인하였다. 단리물질의 화학적 구조는 $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 및 질량 분석으로 결정하였으며 단일화합물로 정제된 물질은 caffeic acid를 비롯하여 flavonoid와 그 배당체 화합물인 icariin, caffeic acid, hyperoside, Ikarisoside A, (+)-catechin이었다. 또한, 각 부분의 클로로포름 분획을 GC/MS (Libraries search)를 이용하여 정성분석을 실시하였다.
황백(Cortex Phellodendri: CP)은 황벽나무(Phellodendron amurense)의 건조된 수피로부터 얻어진다. 이 수피는 한국의 전통 한약제로서 설사, 황달, 무릎과 발의 통증, 요도관 및 피부 감염증에 폭넓게 사용되어 왔다. 이들 기능성 성분의 분리 및 정제는 박층 크로마토크래피, 컬럼 액체 크로마토크래피 및 HPLC와 같은 여러 분석법들이 동양의 약초연구에 이용되어 왔다. 본 연구는 CP로부터 berberine을 분리하기 위해 향류분배 크로마토크래피법(CPC)으로 효과적으로 수행하였다. 두 용매의 CPC 최적조성은 n-butanol: acetic acid: water(4:1:5 v/v/v)이었다. 이동상의 유속은 1,000 rpm 회전력에서 상승법으로 분당 3 mL 속도로 전개시켰다. CPC에서 분리된 분획분은 prep-HPLC로 정제하였다. $^1H$-NMR 스펙트럼은 4.10과 4.20 ppm에서 $3H(-OCH_3)$, 6.10 ppm에서 2H의 ($-OCH_2O-$) proton signal의 공명이 관찰되었다. 2개의 방향족 proton은 이중결합 패턴을 보였다. H-11과 H-12 doublet은 각각 7.98과 8.11에서 나타났다. $^{13}C$-NMR 스펙트럼에서는 C2와 C3의 methylenedioxy group($-OCH_2O-$), C9과 C10에 methoxy group($-OCH_3$)이 4개의 치환된 형태로 보였다. 분리 정제된 berberine의 화학구조는 $^1H$, $^{13}C$-NMR, ESI-MS 데이터 분석으로 확인하였다.
건조 미역 10.4 kg을 acetone으로 추출, 여과한 다음 액-액 분배, 각종 크로마토그라피를 통하여 충치원인균, Streptococcus mutans에 대한 항균물질의 한 성분을 분리, 정제하고(160 mg, 수율 $1.5\times10^{-3}$%) 물질을 동정한 결과는 다음과 같다. 건조 미역 30 g 상당량의 추출액을 기준으로 용매 획분별 항균활성을 조사하였을 때, $CHCl_3$층이 73.2%로 가장 강하였고, hexane층이 62.0%이었으며, BuOH층이나 물층은 거의 없었다. 알루미나 칼럼에서는 산성 획분인 1% $NH_4OH:MeOH(1:1)$용매 획분이 81.0%의 항균활성을 나타내었으며, 실리카 칼럼에서는 $CHCl_3:MeOH(95:5)$용매에서 가장 높은 95.5%의 항균성을 나타내었고, ODS칼럼에서는 85% MeOH에서 96.4%의 항균성을 나타내었다. 최종적으로 ODS칼럼에서 95% MeOH를 이동상으로 하여 3개의 물질 S1(10 mg), S2(90 mg), S3(60 mg)을 분리 정제하였다. TLC에서 각 성분은 동일한 Rf값 0.42를 나타내어 동일한 물질로 추정되었으며, 이들을 메칠 유도체화한 성분들은 Rf값이 0.95로 바뀌어 이들 물질이 carboxyl기를 가지는 지방산으로 추정되었다. GC분석에서 표품 지방산과 비교한 결과, 이들은 $C_{18:4,n-3}$ 지방산과 retention time이 일치하였다. 또한, 메칠 유도체의 mass spectrum 분석 결과, m/z 290에 분자 이온 peak가 관측되어 $C_{18:4,n-3}$ 지방산의 methyl 유도체의 분자량과 일치하여, 이 물질을 3,6,9,12-octadecatetraenoic acid(stearidonic acid, $C_{18:4,n-3}$) 지방산으로 동정하였다.
This study was performed for the investigation of vasodilatory effects of Crataegus pinnatifida Bunge and for isolation and structure determination of the constituent from the active fraction. The fruits of this herbal drug were extracted with 80% methanol, then fractioned successively with methylene chloride, ethylacetate and n-butanol. Among the fractions, ethyl acetate fraction exhibited the most effective vascular relaxation against phenylephrine-induced arterial contraction. In order to isolate the active constituent by activity-guided fractionation, this fraction was chromatographed on silica gel to yield seven subfractions. Among the subfractions, the active one showing the most potent vascular relaxation activity was further separated by prep. HPLC with reversed phase Microsorb C-18 column using 1 % acetic acid and methanol gradient solvent system to afford one pure compound, which revealed a potent vasodilatory effect. Instrumental analyses (NMR and mass spectrometry) of the isolated constituent indicated this compound to be (-)-epicatechin. The vasodilatory action mechanism of this compound should be further investigated.
This studies were performed to develop a Korean traditional folk liquor namely Gangha-ju has been prepared at Bosung district in Korea, and manufacturing conditions and anti-oxidation activity and anti-microbial activity of Gangha-ju were investigated. Ethyl-alcohol 20% and 30% Gangha-ju were brewed with glutinous rice wine, distilled liquor and 6 herbs of ginger, cinnamon, etc. Chemical and physical properties of 30% Gangha-ju were acidity 0.22, pH 4.31, amino acidity 3.26, transmittance 59 and conductivity $911\;{\mu}s/m$, and 20% Gangha-ju were 0.43, 4.20, 6.26, 62 and $924\;{\mu}s/m$. Volatile flavor compounds of ethyl alcohol, acetic acid, butanol, n-amyl alcohol, iso-pentyl alcohol, ethyl acetate, butyl acetate, acetaldehyde and furfural were detected, and main aroma compounds of Gangha-ju were isopentyl alcohol and ethyl acetate. Anti-oxidation activity by DPPH method was evaluated 31.32%, and nitrite scavenging effect was 31.79%. Anti-microbial activity against several microorganisms was pronounced strong activity over a wide range of test organisms, and Leuconostoc mesenteroids and Salmonella Ttyphimurium, Staphylococcus epidermidis were found to be more sensitive to Gangha-ju than Escherichia coli and Aspergillus flavus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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