Freezing-resistant plants can survive subzero temperatures by withstanding extracellular ice formation. During cold acclimation, their leaves accumulate antifreeze proteins (AFPs) that are secreted into the apoplast and have the ability to modify the normal growth of ice crystals. Three barley, two wheat and two rye cultivars were grown under two different temperature regimes (20/16$^{\circ}C$ and 5/2$^{\circ}C$, day/night). Apoplastic proteins from winter cereals were separated by SDS-PAGE and detected with antisera to AFPs from winter rye. Apoplastic proteins accumulated to much higher levels in cold-acclimated (CA) leaves compared with nonacclimated (NA) ones in winter cereals. After cold acclimation, the protein concentration of apoplastic extracts increased significantly from 0.088 $mgmL^{-1}$ to 0.448 $mgmL^{-1}$, with about 5-fold increment. Also, the apoplastic protein content per gram leaf fresh weight in CA leaves ranged from 31 $\mu\textrm{g}$$(gFW)^{-1}$ to 120 $\mu\textrm{g}$$(gFW)^{-1}$ with an averaged value of 77 $\mu\textrm{g}$$(gFW)^{-1}$, and coefficients of variation of 54.9%. The CA leaves in Musketeer (a Canadian winter rye cultivar) showed the greatest AFPs and antifreeze activity followed by 'Geurumil' (a Korean winter wheat cultivar), and 'Dongbori l' (Korean facultative barley cultivar). The proteins secreted into the wheat leaf apoplast at CA condition were more numerous than those observed in winter rye, where two $\beta$-1,3-glucanase-like proteins (GLPs), two chitinase-like proteins (CLPs) and two thaumatin-like proteins (TLPs) accumulated during cold acclimation. The proteins in barley leaf apoplast at CA conditions were a little different from those in wheat leaves. The AFPs were various among and within species. More freezing-resistant cultivars had more clear and numerous bands than less freezing-resistant ones. The high determination coefficient ($R^2$ =91 %) between freezing resistance and AFPs per gram leaf fresh weight indicated that the amount of AFPs was highly related to freezing resistance in winter cereal crops.
This study was carried out to identify an effective method to acclimate low-salinity (4 psu) bred Litopenaeus vannamei (mean body weight 16±3.3 g) to sea water. The fast acclimation group (FA) was directly exposed to filtered sea water (32 psu) while the slow acclimation group (SA) was exposed to a slow increase in salinity. Shrimps were sampled at 0, 1, 3, 6, 12, 24 and 48 h for plasma analyses. The plasma components between experimental groups did not show significant differences. The hemolymph osmolality (HO) in FA increased significantly after 1 h (P<0.05), while in SA it started to increase slowly only at 24 h and reached a similar level to that of FA at 48 h. The levels of Na+ and Mg2+ ions were significantly different between the two treatments (P<0.05), but there was no significant difference in Ca2+ ion levels. We found that the different methods of acclimation of L. vannamei to sea water do not affect the plasma components significantly, but lead to changes in the HO and ion levels, it is considerable to acclimate gradually for at least two days.
The effect of salinity on the nitrification efficiency of the nitrifier consortium was evaluated for the nitrification of saline wastewater. The nitrifier consortium, which was the activated sludge acclimated with ammonium as the only energy source, was used as the nitrifier for the salt acclimation. Airlift reactors for the nitrification of ammonia with increasing concentration in saline synthetic wastewater (35 g/I NaCD, and synthetic wastewater without salt as a control, were continuously operated with the nitrifier consortium for 43 days. The ammonia removal rate was about 23g ammonia-N/$m^3$/day in both the absence and presence of the salt. An accumulation of nitrite was observed in the saline nitrification reactor at an early period. However, the nitrite decreased to less than 1 mg/l after 39 days of operation. The salinity increased the acclimation time of the nitrifier consortium to obtain a stable marine nitrification system. However, the salt acclimated system showed the efficient removal of ammonia which was same as that without salt.
In order to treat effectively various type of wastewater discharged from the manufacture factory of organic phosphorous agricultural pesticides by the activated sludge process. The acclimation test of sludge was carried out by the dilution of completely mixed raw wastewater. The results of experiment were obstained as follows. 1. The moderate dilution rate of mixed raw wastewater was founded to about 30 times. 2. The available range of BOD-SS loading was 0.1~0.15 $kg\cdot BOD/kg\cdot SS\cdot day$ and it was similar to the case of extended aeration activated sludge process. 3. After the acclimation of activated sludge, the concentration of MLSS was 2000 mg/L, removal efficiency of BOD more than 90%, and SVI 100, respectively. 4. The oxygen respiratory rate of acclimated sludge was $47 mg\cdot O_2/g\cdot hr$ and this was increased about 5 times than $10 mg\cdot O_2/g\cdot hr$ of ordinary sludge.
In relation to cold acclimation, this experiment was carried out to understand the changes of the cortical cells in the living barks of the mulberry during wintering period. The living barks of three mulberry varieties(Kaeryangppong, Shinilppong and Yongcheonppong) were sampled from December, 1995 to March, 1996. The result of this experiment was summarized as follows. The cortical cells in the living barks of the mulberry in December were filled with small vacuoles. Plastids and mitochondrias were located near the nucleus. At this time, almost all starch granules disappeared from the plastids. In January and February, mitochondria, palstids and microbodys of the cortical cell were observed. As increasing temperature from March, dictysomes and polysomes were sparse. Again, starch granules disappeared were observed in the plastids. From the above result. starch granules in plastide of the cortical cell of the mulberry disappeared during cold acclimation stage. After late January, Proplastid was observed in the cortical cell and the ultrastructures of cortical cell were actively changed.
Change of proteins was confirmed during low temperature acclimation of overwintering larva, and some biochemical characteristics of the induced antifreeze protein-1 (AFP-1) were investigated in Protaetia brevitarsis. As the freezing point depression by the action of induced AFPs, a considerable thermal hysteresis was observed in the haemolymph and in partially purified proteins. AFP-1 was purified from the cold acclimation larvae by ammonium sulfate precipitation ion exchange chromatography, gel permeation chromatography, and electroelution. The purified AFP-1 was determined to be a glycoprotein (approximately 320 kDa, pl 5.8) composed of a single type of subunit (80 kDa). The high contents of hydrophilic amino acids (Asp, Glu, Lys, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr) were also confirmed, showing similarity with antifreeze proteins from other insects.
담수산 틸라피아를 하루 $5%_{\circ}$씩 해수농도를 높여 1주일에 걸쳐 $32%_{\circ}$ 해수에 순화시켜, 이때를 기준(0주)으로하여 1주일 간격으로 염세포의 발달, 근육의 물성 및 미량원소의 변화와 더불어 근원심유의 ATPase 활성 및 열안정성에 대한 변화를 알아보았다. 아가미의 염세포는 해수순화와 더불어 점진적으로 갯수가 늘어나고 크기가 커져 순화 3주째에 발달이 완료되었다. 근육의 절단 및 압착강도도 해수순화에 따라 현저히 증가하여 근육의 물성변화를 보였으며, 일부 미량원소 (Mg, Na, K)도 뚜렷한 측적을 나타내었다. 근원섬유 ATPase 활성은 해수순화와 더불어 담수산의 것에 비해 유의차를 보이며 증가하였다. 근육중의 미량원소의 증가와도 관련이 있을 것으로 보이는 근원섬유 ATPase 활성증가는 결국 근육중의 ATP 분해를 촉진하여 근수축을 신속히 유도, 근육의 탄력을 증대시킴으로써 식감이 개선되는 것으로 추측되었다. 한편, 근원섬유의 열안정성은 해수순화에 의해 현저히 저하되었다.
저온은 배추 묘에서 1주일동안 RNA함량과 단백질 함량을 증가시켰고, 당 함량에 있어서도 많은 변화를 유발했을 뿐만 아니라 저온순화시 치사온도에서 생존율 또한 증가하였다. 이런 결과에서 보듯이 이러한 변화는 내동성의 발달과 관련되어 있는 것으로 생각할 수 있다. 5$^{\circ}C$에서 처음 24시간처리 했을 때 12시간 이후부터 내동성이 증가했으며 5일째 가장 크게 증가하였다. 치사온도에서의 생존율도 저온처리한지 12시간 후부터 증가해서 5일 후 가장 높은 생존율을 보였다. 수용성당 함량은 저온순화 한지 1일 후부터 크게 증가했다. 몇몇 주요한 당 함량에서 볼 수 있듯이 포도당(Glucose)은 저온처리된 배추묘에서 함량이 가장 많은 당 성분으로 저온처리된 배추묘와 처리되지 않은 배추묘 사이에서 1일 후부터 계속 큰 차이를 나타냈으며 과당(Fructose)도 포도당과 비슷한 경향을 보였다. 저온처리를 시작할 때 자당(Sucrose)이 가장 많이 증가하는 경향을 보였고 처리 9시간 이후부터 큰 차이를 나타내기 시작했다. 당의 정량분석결과 배추묘에서 주요한 당 성분은 포도당이었으나, 저온처리시 크게 증가한 당 성분은 자당이었다. 최대내동성에 도달하기까지 5일이 걸렸으나 탈순화시 9시간후부터 생존율이 서서히 감소해 24시간만에 저온순화로 획득된 내동성이 모두 상실되었다. 전체 RNA와 수용성 단백질 함량 역시 24시간 경과 후 현저히 감소하였다.
To investigate whether phospholipase D (PLD, EC 3.1.4.4) plays a role in adaptive response of post-harvest fruit to environment, a PLD gene was firstly cloned from grape berry (Vitis Vinifera L. cv. Chardonnay) using RT-PCR and 3'- and 5'-RACE. The deduced amino acid sequence (809 residues) showed 84.7% identity with that of PLD from Ricinus communis. The secondary structures of this protein showed the characteristic C2 domain and two active sites of a phospholipid-metabolizing enzyme. The PLD activity and its expression in response to heat acclimation were then assayed. The results indicated PLD was significantly activated at enzyme activity, as well as accumulation of PLD mRNA and synthesis of new PLD protein during the early of heat acclimation, primary suggesting that the grape berry PLD may be involved in the heat response in post-harvest grape berry. This work offers an important basis for further investigating the mechanism of post-harvest fruit adaptation to environmental stresses.
120 mice of both sexes weighing from 18 to 22 g. were used. These mice were divided nito 12 groups : control (non-restraint and restraint) , acclinmation (non-restraint and restraint , acclimation for 5 and 10 days) , adrenalectomized (non-restraint and restraint0 and acclimation-adrenalectomized (non-restraint and restraint, acclimation for 5 and 10 days) groups. The rectal temperature of each group were measured at 10, 30 and 50 min under environment of $0^{\circ}C$.Measurements were done with a microphrometer of B.T.-32 thermocorpules. The results obtained may be summarized as follows : 1) The rectal temperature in normal mice without restraint was higher than that of normal mice with restraint under environment of $0^{\circ}C$. 2) The rectal temperature in normal mice was higher than that of adrenalectomized mice at 20$^{\circ}$ C. But the rectal temperature in adrenalectomized mice without restraint was higher than that of adrenalectomized mice with restraint under cold-stress. This difference was in the order of 1.65$^{\circ}$ under environment of 20$^{\circ}$ and 10 $^{\circ}$ at 50 min under environment of 0$^{\circ}$. 3) The rectal temperature of normal mice with restraint was less than that of adrenalectomized mice (non-restraint) under cold-stress. 4) The rectal temperature of normal and adrenalectomized mice that acclimated under cold stress ($0^{\circ}C$) for 5 and 10 days was usually higher than that of normal and adrenalectomized mice of non-acclimation under environment of $0^{\circ}C$. 5) The tolerance in mice under cold-stress was increased on the acclimtion of cold.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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