Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.22
no.6
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pp.1021-1026
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2000
The removal of cadmium, copper and chromium ions was carried in a phase transfer reactor using W/O(water in oil) microemulsion containing sodium di[2-ethylhexyl] sulfosuccinate(AOT) and isooctane system. Removal efficiencies and mass transfer rate of $Cd^{2+}$, $Cu^{2+}$ and $Cr^{3+}$ were increasing with increasing pH of aqueous solution. However, $Cr^{6+}$ was not extracted by W/O microemulsion with AOT/isooctane system. It was found that removal of heavy metal ions were required an attractive electrostatic interaction between the metal ions and W/O microemulsion. The relationship between mass transfer rate. Jo of $Cd^{2+}$, $Cu^{2+}$ and $Cr^{3+}$ and pH of aqueous solution by W/O microemulsion suggested.
An investigation was carried out to study the characteristics of lipoxygenase in dioctyl sulfosuccinate (aerosol-OT, AOT)/isooctane revered micelles of microaqueous system containing infinitesimal water. ${\alpha}-Linoleic$ acid as a substrate could be analyzed by the colorimetric methodology using 5%(w/v) cupric acetate-pyridine solution and the activity of lipoxygenase was able to be assayed by the degree of ${\alpha}-linoleic$ acid consumption per minute. Optimal pH, temperature, and R-value ([water]/[AOT]) were determined as the value of 5.0, $25^{\circ}C$, and 10.0, respectively. Kinetic analysis of the enzyme reaction under the optimal conditions showed that the values of $K_m$ and $V_{max}$ were 0.31 mM of ${\alpha}-linoleic$ acid and $384.16{\mu}mol$ of ${\alpha}-linoleic$ acid decomposed/min, respectively. The results indicate the reaction to be lipoxygenase-catalyzed oxidation of ${\alpha}-linoleic$ acid in AOT/isooctane reversed micellar system. The inhibitory effect of natural antioxidants on lipoxygenase showed little inhibitory effect of L-ascrobic acid while ${\alpha}-tocopherol$ showed 72% of inhibitory effect.
It is difficult to accurately evaluate the effect of lipophilic compounds in aqueous reaction system of enzymes because they are immiscible with water. To screen lipophilic inhibitors of tyrosinase which catalyzes the synthesis of melanin in vivo, an optically clear organic system composed of organic solvent, surfactant, and water, often called reverse micelles(RM), was introduced. Optimal RM to let tyrosinase act normally was composed of isooctane as an organic solvent and dioctyl sulfosuccinate(AOT) of 100 mM as a surfactant. When a molar ratio of water to surfactant was 15, tyrosinase(105.3 units) in RM showed a similar reactivity toward 3,4-dihydroxyphenylalanine(0.18 mM) as in the aqueous assay system. In the presence of cinnamic acid, the product formation of tyrosinase reaction was proportional to the reaction time. This indicates that the inhibitory effect of lipophilic compounds could be analyzed in RM.
The extraction behavior of an alkaline protease using reversed micelles was investgated. The reversed micellar solution consisted of AOT in isooctane. It was found that distribution of arkaline protease into the organic phase increased at lower pH, lower ionic strength, and higher AOT concentration. When the real fermentation broth was extracted of alkaline protease, an activity yield of 20% and a purification factor of 2.0 were obtained.
For the selective separation of proteins, the solubilization and desolubilization of proteins in sodium-di-2-ethylhexyl sulfosuccinate (AOT)-isooctane reverse micellar system were investigated. Protein solubilization increased with increasing the concentration of AOT to 200 mM and then decreased above that concentration. Protein was solubilized into reverse micelles in the pH range below the isoelectric Point of each protein, pH 4-10 for lysozyme and pH 5-6 for trypsin and ${\alpha}-chymotrypsin$, Lysozyme, trypsin and ${\alpha}-chymotrypsin$ were efficiently extracted in the precence of KCl and NaCl while larger molecular weight proteins such as pepsin and BSA had high solubilization with $CaCl_2$. At higher ionic strength all proteins exhibited murk less tendency to solubilize and the increase of ionic strength resulted in the decrease of micelle size. Lysozyme was successfully back transfered at pH 12.2 and 1.0M KCl; trypsin at pH 12.6 and 0.5M KCl; and ${\alpha}-chymotrypsin$ at pH 6.7 and 0.5M KCl. In a test group separation experiments, complete separation of lysozyme from BSA could be obtained.
Solubilization phenomena of a protein in a reversed micellar solution were investigated and a hollow fiber membrane extractor was tested for reversed micellar protein extraction equipment. Alkaline protease was used as a model protein compound and the reversed micellar solution was consisted of AOT and isooctane. It was found that protein solubilization was strongly influenced by ionic strength and pH. The distribution coefficient of the protease between the aqueous solution and the AOT/isooctane solution was also observed to be as high as 4.0 within the scope of this experiment. A hollow fiber membrane extractor was constructed and tested for the protein extraction. The overall mass transfer coefficient at a typical experimental condition of this study was observed to be $6.7{\times}10^{-5}cm/s$. It was also found that the mass transfer resistance on reversed micellar solution was the dominant resistance for the protein transfer.
Proceedings of the Membrane Society of Korea Conference
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2004.05a
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pp.179-182
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2004
This study reports the extraction behavior of $\alpha$-lactalbumin using bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate sodium (AOT) reverse micelles. Forward extraction of $\alpha$-lactalbumin in the reverse micellar organic phase from aqueous feed solutions was strongly dependent on the AOT concentration and the complete forward extraction of 0.03 mM $\alpha$-lactalbumin was successfully achieved at an AOT concentration of ca. 100 mM. A similar dependency of the forward extraction on the AOT concentration was obtained in isooctane, n-hexane, and n-octane systems. In the backward extraction from the micellar organic phase, the recovery of the protein as high as ca. 90% was obtained with pH control and/or salt addition.
The basic and optimum conditions for the extraction of peroxidase from Chinese cabbage root applying the reverse micelle system were investigated. In order to purify Peroxidase (POX) from crude extract of Chinese cabbage roots, isooctane containing 110 mM Aerosol OT (AOT) was well mixed with the same volume of crude extracts containing 50 mM NaCl and 30 mM Tris-HCI buffer of pH 8.0. After centrifugation, AOT reverse micelle containing the isooctane phase were mixed with 80 mM Tris-HCI buffer at pH 7.0 containing 1 M KCl. From these operations, POX was purified 20-fold with a 60% yield. For further purification, DEAE-Toyopearl column chromatography was applied, and it showed a single protein band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The resulting POX showed 93-fold purification with a 40% yield.
Titanium hydroxide (TiO({{{{ {OH }_{2 } }})) fine particles were produced by the reverse micelle technique. For the formation of titanium hydroxide (TiO({{{{ {OH }_{2 } }})) particles with the technique reversed micellar solution was prepared by solubilizing water into organic solvent (isooctane) with a surfactant and titanium alkoxide (tetraisopropyl orthotitanate) diluted with isopropyl alcohol was added to the reversed micellar solution. The hdrolyzed species (TiO({{{{ {OH }_{2 } }})) was formed by the hydrolysis of titanium alkoxide and titanium dioxide is then formed by the condensation of the hydrolyzed species. There are several process variables such as surfactants concentration of surface cosurfactant hydrolysis temperature and pH. In this work the ef-fects of process variables on paticle shapes particle size distribution and paticle agglomeration were bi-nodal for an anionic surfactant(AOT) in the whole range of temperature pH and surfactant concentration of this experiment. The addition of ethanol as a cosurfactant resulted in narrow particle size distribution of the experiment. The additiono of ethanol as a cosurfactant resulted in narrow particle size distribution and 0.12${\mu}{\textrm}{m}$ of smaller average particle diameter. FT-IR spectrum of particles shows the absorption peak of Ti-OH bonding and Ti-O bonding. An exothermic peak around 41$0^{\circ}C$ in TGA-DTA curve shows that crys- tallized anatase phase appears and completely transits to anatase around 45$0^{\circ}C$.
Effect of additives such as NP series nonionic surfactant and cosurfactant on AgCl nanoparticles was investigated where nanoparticles were prepared using two different types of water-in-oil (W/O) microemulsions containing silver nitrate and sodium chloride, respectively. Phase behavior experiments showed that the region of one phase W/O microemulsion was found to be broadened with an increase in the ethylene oxide length of a nonionic surfactant mainly due to an increase in hydrophilic nature of a surfactant. Photomicrographs obtained by transmission electron microscopy indicated that an increase in ethylene oxide length of a nonionic surfactant results in both increases in particle size and size distribution. Phase behavior experiments for the systems containing AOT surfactant, isooctane and aqueous solution of an inorganic salt showed that addition of a cosurfactant caused a shrinkage in phase region of one phase W/O microemulsion, especially water contents contained in W/O microemulsion with an increase in the chain length or the concentration of a cosurfactant used. Photomicrographs obtained by transmission electron microscopy indicated that characteristics of AgCl nanoparticles produced were dependent both on the radius of spontaneous curvature and film rigidity of a microemulsion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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