Aim: To establish a pancreatic cancer stem cell model using human pancreatic cancer cells in nude mice to provide a platform for pancreatic cancer stem cell research. Materials and Methods: To establish pancreatic cancer xenografts using human pancreatic cancer cell line SW1990, nude mice were randomly divided into control and gemcitabine groups. When the tumor grew to a volume of $125mm^3$, they treated with gemcitabine at a dose of 50mg/kg by intraperitoneal injection of 0.2ml in the gemcitabine group, while the mice in control group were treated with the same volume of normal saline. Gemcitabine was given 2 times a week for 3 times. When the model was established, the proliferation of pancreatic cancer stem cells was observed by clone formation assay, and the protein and/or mRNA expression of pancreatic stem cell surface markers including CD24, CD44, CD133, ALDH, transcription factors containing Oct-4, Sox-2, Nanog and Gli, the key nuclear transcription factor in Sonic Hedgehog signaling pathway was detected by Western blot and/or RT-PCR to verify the reliability of this model. Results: This model is feasible and safe. During the establishment, no mice died and the weight of nude mice maintained above 16.5g. The clone forming ability in gemcitabine group was stronger than that of the control group (p<0.01). In gemcitabine group, the protein expression of pancreatic cancer stem cell surface markers including CD44, and ALDH was up-regulated, the protein and mRNA expression of nuclear transcription factor including Oct-4, Sox-2 and Nanog was also significantly increased (P<0.01). In addition, the protein expression of key nuclear transcription factor in Sonic Hedgehog signaling pathway, Gli-1, was significantly enhanced (p<0.01). Conclusions: The pancreatic cancer stem cell model was successfully established using human pancreatic cancer cell line SW1990 in nude mice. Gemcitabine could enrich pancreatic cancer stem cells, simultaneously accompanied by the activation of Sonic Hedgehog signaling pathway.
본 연구는 대구 무형문화재 제11호인 하향주의 품질 우수성을 규명하고자 향기성분 분석 후 랫드에 대한 알코올 대사 특성을 조사하였다. GC/MS 분석시, 하향주는 iso-butyl alcohol과 iso-amyl alcohol 등을 포함하여 17가지의 향기성분이 분석되었고 여과에 의해 acetaldehyde와 ethylacetate의 농도는 낮아짐을 확인하였다. 하향주와 동일한 농도인 17% 알코올을 SD계 랫드에 단회 경구 투여시 혈중 알코올 농도와 acetaldehyde 농도가 하향주 투여군이 낮았으며, 5시간 뒤 간조직에서 alcohol dehyogenase와 acetaldehyde dehyogenase의 농도는 하향주 투여군이 17% 알코올 투여군보다 높았다. 따라서 하향주는 동일농도의 17% 알코올 투여군보다 알코올 대사를 촉진시켜 숙취를 감소시킴을 확인하였다.
Hyo Lim Lee;Jong Min Kim;Min Ji Go;Seung Gyum Joo;Tae Yoon Kim;Han Su Lee;Ju Hui Kim;Jin-Sung Son;Ho Jin Heo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제34권3호
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pp.606-621
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2024
This study evaluated the hepatoprotective effect of fermented Protaetia brevitarsis larvae (FPB) in ethanol-induced liver injury mice. As a result of amino acids in FPB, 18 types of amino acids including essential amino acids were identified. In the results of in vitro tests, FPB increased alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) activities. In addition, FPB treatment increased cell viability on ethanol- and H2O2-induced HepG2 cells. FPB ameliorated serum biomarkers related to hepatoxicity including glutamic oxaloacetic transaminase, glutamine pyruvic transaminase, total bilirubin, and lactate dehydrogenase and lipid metabolism including triglyceride, total cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol, and low-density lipoprotein cholesterol. Also, FPB controlled ethanol metabolism enzymes by regulating the protein expression levels of ADH, ALDH, and cytochrome P450 2E1 in liver tissue. FPB protected hepatic oxidative stress by improving malondialdehyde content, reduced glutathione, and superoxide dismutase levels. In addition, FPB reversed mitochondrial dysfunction by regulating reactive oxygen species production, mitochondrial membrane potential, and ATP levels. FPB protected ethanol-induced apoptosis, fatty liver, and hepatic inflammation through p-AMP-activated protein kinase and TLR-4/NF-κB signaling pathways. Furthermore, FPB prevented hepatic fibrosis by decreasing TGF-β1/Smad pathway. In summary, these results suggest that FPB might be a potential prophylactic agent for the treatment of alcoholic liver disease via preventing liver injury such as fatty liver, hepatic inflammation due to chronic ethanol-induced oxidative stress.
Jo, Jae-Hoon;Kim, Seung-Jun;Yeon, Jong-Pil;Oh, Moon-Ju;Seo, Hye-Myung;Hwang, Seung-Yong;Kim, Sang-Kyum;Kim, Bong-Hee
Molecular & Cellular Toxicology
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제3권4호
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pp.282-291
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2007
Although the etiology of schizophrenia is known to be linked with the disturbance of glutamatergic and dopaminergic neurotransmission, little is known about the relationship between gene expression and the disease process. To identify genes related to abnormalities in glutamatergic and dopaminergic function, we investigated the effects of olanzapine in the changes of mRNA levels in the animal model of schizophrenia, using a high-density DNA microarray. Olanzapine (3.0 mg/kg, i.p.) significantly reduced hyperlocomotive activities, which was induced by MK-801 (1.0 mg/kg, i.p.). We identified that the expression of 719 genes were significantly altered more than two folds in the prefrontal cortex of the rats treated with MK-801. We selected 15 genes out of them by the changes of the expression pattern in the treatment of Olanzapine and/or MK801 for the further confirmation in RT-PCR. The administration of MK-801 increased the expression of 7 genes (NOS3, Hspb1, Hspa1a, CRH, Serpine1, Igfbp6, Snf1lk) and decreased the expression of 1 gene (Aldh1a2), which was attenuated by olanzapine. One gene (Prss12) was up-regulated after olanzapine treatment although it did not show the significant changes after MK-801 treatment. These results showed that antipsychotic drug, such as olanzapine, may alter the gene expression patterns, which were accompanied by MK-801-induced psychosis. Our results also provide us high-density DNA microarray technology could be potential approaches to find the candidate molecules for the therapeutics and also for the early diagnosis of psychiatric diseases.
Objective : Dopamine transporter is member of family of Na/Cl dependent neurotransmitter transporter, 12 transmembrane domain, that has high substrate specificity, affinity. It is related with dopamine reuptake in presynaptic vesicle. DAT has a VNTR in its 3'-untranslated region(UTR). 3'-UTR VNTR polymorphism is related with modification of dopamine transmission. The association between with VNTR polymorphism and neuropsychiatric disorders such as alcohol dependence, and low activity ALDH has been studied, but their relationship is unclear. We study about association of 3'-UTR VNTR of DAT gene and G2319A and alcohol dependence. Method : Group of Korean subjects were studied with alcohol dependence(n=49 male) compared to mentally healthy controls(n=53 male). The peripheral blood sample was acquired, and Polymerase Chain Reaction(PCR) amplification, MspI procedure was done. Result : There was a significant difference between alcohol dependence group and normal control(genotype frequency p<0.05, allele frequency p<0.05) Allele A frequency and genotype(GG, GA) frequency was a significant difference between alcohol dependence group and normal control(p<0.05). Conclusion : Our study showed that genetic polymorphism of DAT1 G2319A had relation with alcohol dependence.
허브의 일종인 B. sarmienti를 이용하여 숙취 해소 음료를 개발하고 그에 따른 알콜 대사 및 항산화 효소에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 알코올을 섭취한 쥐에 B. sarmienti 음료군(BSP)을 투여 한 경우 타사 제품군인 PC 그리고 B. sarmienti만을 제외한 음료군인 NBS보다 더 뛰어난 알코올 분해능 및 ADH, ALDH에서도 뛰어난 활성을 보였다. 또한 생화학적 검사를 통해 안전성을 확인하였으며, ALP, ALT 그리고 AST에서도 PC군에 비해 유의적인 감소 효과를 보였다. 항산화 활성 및 효소계에 있어서도 BSP군에서는 GSH에서는 CO군에 비해 효소의 함량은 높으나, 다른 군에 비해 유의적인 차이는 보이지 않았으며, TBARS에는 다른 군에 비해 함량이 감소됨을 알 수 있었으나 뚜렷한 차이는 보이지 않았다. 그러나 GST, CAT 그리고 SOD 효소에 있어서는 CO군에 비해 유의적인 효소 활성이 감소되었음을 알 수 있었다. 이상과 같은 결과를 토대로 B. sarmienti 추출물이 첨가된 음료는 뛰어난 숙취 해소 및 간세포의 손상을 보호하는 음료로서 이용 가능하리라 기대 된다.
Excessive alcohol consumption can cause hangover symptoms, such as headache, drowsiness, dizziness, gastrointestinal distress, and anxiety. The aim of this study was to investigate alcohol metabolizing enzyme activities and antioxidant activities of fruit-vegetable juices containing Angelica keiskei prepared using a low speed masticating juicer in vitro. The acceleration rate of alcohol dehydrogenase (ADH) by A. keiskei-cherry tomato juice (ACJ) and A. keiskei-green grape juice (AGJ) were $163.8{\pm}4.3%$ and $148.2{\pm}6.9%$, respectively. The acceleration rate of aldehyde dehydrogenase (ALDH) by ACJ and AGJ were $185.6{\pm}9.5%$ and $161.1{\pm}4.8%$, respectively. Total polyphenol of ACJ and AGJ were $111.1{\pm}1.6mg/dL$ and $100.8{\pm}2.9mg/dL$, respectively. DPPH radical scavenging activities of ACJ and AGJ were $62.0{\pm}0.5%$ and $61.3{\pm}0.4%$, respectively. Thus, these results indicate that alcohol degrading enzyme activities can be enhanced by fruitvegetable juices containing A. keiskei.
The application of direct seeding cultivation reduces time, labor, and cost. However, this application often has poor seedling establishment and leads to lower yield as compared to transplanting system. The tolerance to anaerobic and low temperature germination is important to improve seedling establishment and the wide-spread application of direct seeding method. This study was carried out to evaluate the responses of three japonica cultivars to different temperatures (15℃, 18℃, 21℃, 24℃, and 27℃) and different flooding levels (1 cm, 4 cm, 7 cm, 10 cm) during germination and seedling development. The mean survival percentage significantly increased (P<0.05) when the flooding level decreased and when temperature increased. There were significant effects of the interaction between temperature and water depth on survival percentage and seedling height. When temperature decreased from 27℃ to 15℃, the germination duration significantly increased from 6.4 days to 16.3 days while the germination speed, survival percentage, and seedling height decreased from 5.3 seeds day-1, 61.9% and 190.6 cm to 2.2 seeds day-1, 33.2%, and 47 cm, respectively. The increase in temperature under submergence condition was associated with the increased expression of Amy3D and ALDH2a but the decreased expression of ADH1 and PDC1. The results of this research would be used for further studies and breeding programs to improve rice seedling establishment and the application of direct seeding cultivation.
Colorectal cancer (CRC) is the third most common cancer in the world. Although 5-fluorouracil (5-FU) is the representative chemotherapy drug for colorectal cancer, it has therapeutic limits due to its chemoresistant characteristics. Colorectal cancer cells can develop into cancer stem cells (CSCs) with self-renewal potential, thereby causing malignant tumors. The human gastrointestinal tract contains a complex gut microbiota that is essential for the host's homeostasis. Recently, many studies have reported correlations between gut flora and the onset, progression, and treatment of CRC. The present study confirms that the most representative symbiotic bacteria in humans, Lactobacillus plantarum (LP) supernatant (SN), selectively inhibit the characteristics of 5-FU-resistant colorectal cancer cells (HT-29 and HCT-116). LP SN inhibited the expression of the specific markers CD44, 133, 166, and ALDH1 of CSCs. The combination therapy of LP SN and 5-FU inhibited the survival of CRCs and led to cell death by inducing caspase-3 activity. The combination therapy of LP SN and 5-FU induced an anticancer mechanism by inactivating the Wnt/β-catenin signaling of chemoresistant CRC cells, and reducing the formation and size of colonospheres. In conclusion, our results show that LP SN can enhance the therapeutic effect of 5-FU for colon cancer, and reduce colorectal cancer stem-like cells by reversing the development of resistance to anticancer drugs. This implies that probiotic substances may be useful therapeutic alternatives as biotherapeutics for chemoresistant CRC.
Objectives : The purpose of our study was to investigate the effects of Injinchunggan-tang (Yinchenchinggan-tang) on DMN liver damage caused by applying proteomics. Materials and Methods: Sprague-Dawley rats were used in this experiment; the rats were divided into the normal group (normal saline), the control group (DMN) and the samplegroup (DMN+IJCGT). The DMN was induced 3 days a week for 3 weeks in the control group. The normal saline without DMN was induced by the same method in the normal group. Injinchunggan-tang extract was orally administered twice a day for 3 weeks after DMN was induced in the sample group. The livers of each group were processed and we investigated histology, OxyBlot, 2-dimensional electrophoresis, and western blot of liver of each group. Results : In the histological findings of the liver, the control group showed portal fibrosis with a few septa or without septa. The sample group showed no fibrosis or portal fibrosis without septa. In the OxyBlot finding, Injinchunggan-tang prevented liver damage by oxidation. In the 2-dimensional electrophoresis finding, formiminotransferase cyclodeaminase (FTCD), FYVE-finger containing protein, aldehyde dehydrogenase (ALDH), and ratio of predicted : hypothetical protein LOC68668 isoform 1 were changed. Conclusions : Injinchunggan-tang exerts an inhibitory effect against the fibrosis and oxidation induced by the DMN in the rat liver cell, and some proteins induced by the DMN were changed by Injinchunggan-tang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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