Tanizawa, K.;Ashida, K.;Hosoi, E.;Matsui, T.;Yano, H.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제7권4호
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pp.467-470
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1994
Effects of animo acids infusion into the abomasum on plasma growth hormone (GH) concentration were investigated using three wethers of 54 kg of average body weight. Wethers were infused with either 3.25 mmol/kg BW/day of sodium chloride solution (control), 3 mmol/kg BW/day of alanine (Ala), or 3 mmol/kg BW/day of aspartic acid (Asp) continuously for five days through an abomasum cathether in a $3{\times}3$ Latin square desing. On the day of starting infusion (day 0) and day 4 blood samples were collected from a jugular vein every fifteen minutes for six hours after feeding, and their GH concentrations were measured. Blood samples were also collected immediately before starting infusion (day 0), and before feeding of day 1, day 2 and day 4, and their plasma free amino acid concentrations were measured. In the animals infused with Ala, plasma free Ala concentration was increased by Ala infusion and it continued for four days. Plasma GH concentration of these animals increased on day 0, but this phenomenon disappeared on day 4. In the animals infused with Asp, the increase in plasma Asp concentration was observed only on day 1. Plasma GH concentration of these animals was not affected by Asp infusion. These results suggest that continuous Ala infusion stimulates GH secretion for a short period, but the effect would not last long, and that continuous Asp infusion does not affect plasma GH concentration.
Rhodobacter sphaeroides 균주가 생산하는 ${\delta}-aminolevulinic\;acid(ALA)$의 생산성에 관하여 in vivo, in vitro 상에서 기질 및 관련 화합물을 이용하여 검토하였다. $C_5\;ALA$ 생합성계에 의한 ALA yield 대비의 $C_4$ 생합성계에 의한 비율은 in vive 상에서 0.78인 반면, in vitro 상에서의 비율은 1.37이었다.$C_4\;C_5$ 각 계의 기질 첨가 배양에 의한 cell-free system의 $C_4,\;C_5$ 계의 발현도는 미첨가 배양에 의한 system과 비교하여 각각 1.35, 1.52로 증가하였으나, 증가한 계에 대한 상대계의 발현도가 억제되어, $C_4$ 와 $C_5$ 계가 각각 0.91, 0.83으로 나타났다. ${\gamma}-Glutamyl\;derivatives$의 세포내 uptake rates는 L-glutamic acid를 기준으로 비교해서 D-glutamic acid, 0.55: D-glutamine, 0.5: L-glutamine, 0.4: ${\gamma}-L-glutamyl\;ethylester$, 0.3: GSH 및 Glu-pNA, 0의 순서를 보였다. Uptake rate와 관계없이 in vivo 상에서 L-과 D-glutamine이 L-, D-glutamic acid보다 균체 외 ALA의 생산에 있어서 각각 높은 yield의 효과를 보였다.
Objective: The aim of this study was to investigate the effects of simultaneous supplementation of laying hens with alpha-linolenic acid (ALA) resources (flax, perilla, and Eucommia ulmoides [E. ulmoides] seeds) and eicosapentaenoic acid/docosahexaenoic acid (EPA/DHA) resources (Schizochytrium sp.) on egg quality and n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) profile. Methods: Dietary treatments were as follows: i) diet C (control diet); ii) diet F (diet C+10% flaxseeds); iii) diet P, (diet C+10% perilla seeds); iv) diet E (diet C+10% E. ulmoides seeds); v) diet A (diet C+1.5% microalage); vi) diet AF (diet C+10% flaxseeds+1.5% microalage); vii) diet AP (diet C+10% perilla seeds+1.5% microalgae); viii) diet AE (diet C+10% E. ulmoides seeds+ 1.5% microalage). Results: Egg weight, yolk weight and production ratio were not significantly affected by either algae or in combination with seeds (p>0.05). No significant difference was observed in ALA and DHA concentration in eggs between flaxseed, perila, and E. ulmodies seeds supplementation alone (p>0.05). N-3 PUFA in eggs was slightly improved by microalgae supplementation. The best supplementation, a combination of microalgae and perilla seeds, elevated (p<0.05) ALA from 19.7 to 202.5 mg/egg and EPA+DHA from 27.5 to 159.7 mg/egg. Highest n-3 PUFA enrichment (379.6 mg/yolk) was observed with supplementation of a combination of perilla seed and microalgae (362.2 mg/yolk), followed by a combination of flaxseed and microalgae (348.4 mg/yolk). The ALA, EPA, and DHA content obtained with a combination of microalgae and seeds surpassed the total sum of that obtained with microalgae or ALA-seeds alone. Conclusion: It is feasible to enrich eggs with n-3 PUFAs by perilla or E. ulmodies seeds instead of flaxseeds. Simultaneous supplementation of microalgae and seeds helped improve the transfer from EPA and docosapentaenoic acid into DHA.
광합성 자색비유황세균으로 동정된 균주들을 논 퇴적토와 분뇨처리장 슬러지로부터 분리하였고 그들의 식물생장촉진능을 조사하였다. 이 균주들의 배양액에서 대표적인 식물호르몬인 indole-3-acetic acid (IAA)와 indole-3-butyric acid (IBA) 및 5'-aminolevulinic acid (ALA)의 생성을 측정하였다. 분리 균주 중 Rhodopseudomonas faecalis D15가 modified Biebl and Pfennig 배지에서 IAA는 769.8 ${\mu}g$/mg protein, IBA는 1323 ${\mu}g$/mg protein 그리고 ALA는 7.4 mM/mg protein의 가장 높은 생성률을 나타내었으며, R. faecalis C9는 20.8 ${\mu}g$/mg protein의 가장 높은 gibberellin 생성률을 나타내었다. 이 균주들을 토양에 파종한 토마토 종자에 접종하고 15일 후에 자라 난 유묘의 뿌리 길이와 건조중량은 비접종 대조군보다 더 컸으며 특히 C9 균주 처리 시료는 건조중량이 대조군에 비해 119.4% 증가하였다. 이 자색비유황세균 분리균주는 식물생장 촉진을 위한 친환경적 생물비료로 사용할 수 있을 것이다.
Certain amino acids are essential precursors of a variety of important biomolecules in addition to their major function as protein building blocks. ${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA) is synthesized from the condensed form of succinyl-CoA with glycine after decarboxylation catalyzed by ALA synthase. The objective of the study was to determine the effects of ALA supplementation on growth performance, behavioral characteristics and hematological/immune status in nursery pigs. A total of 144 pigs weaned at 21 d of age were allotted to three dietary treatments representing (-) control (w/o antibiotics; NC), (+) control (w/carbadox at 50 mg/kg; PC), and the treatment group with ALA supplementation (0.05%; TA). Each treatment had 6 pens (replicates) with 8 pigs per pen. Pigs were fed phase 1 (21.9% CP, 1.40% Lys) and 2 (20.6% CP, 1.15% Lys) experimental diets for 3 and 2 wks, respectively. Feed intake and weight gain were measured weekly during phase 1 and at the end of phase 2. At the end of phase 2, blood samples were taken and analyzed using an automated hematology analyzer. Skin color and activity of pigs (48 h) from all pens in each treatment were measured at the second week of phase 2. Growth performance was not affected (p>0.05) by the dietary supplementation of ALA during the 5 wk nursery period. Pigs in the TA (6.46) and PC (6.68) had a higher (p<0.05) number of red blood cells ($10^6cell/{\mu}L$) than pigs in the NC (6.15). Pigs in PC (12.16) had a higher (p<0.05) hemoglobin level (g/dL) than pigs in the NC group (11.29) and the TA group (11.47). Pigs in the TA and PC had darker (p<0.05) and less (p<0.05) yellow skin color than pigs in the NC. Pigs in the PC tended (p = 0.081) to be less active than pigs in the other groups. There were no differences in behavioral characteristics between the NC and the TA. The data suggest that ALA supplementation has no adverse effects on growth performance of nursery pigs. Moreover, ALA supplementation increased red blood cell counts which may be beneficial to pigs.
$\alpha $-Arabinofuranosidase was produced by E. coli HB101 haboring the recombinant plasmid pKMG11 which contained the arfI gene of Bacillus stearothermophilus. The maximum production of the enzyme was observed when E. coli HB101 cells were grown at 37$\circ$C for 20 hours in the medium containing 0.5% arabinose, 1.0% tryptone, 0.5% yeast extract, and 1% NaCl. The $\ALPHA $-arabinofuranosidase produced was purified to homogeneity using a combination of 20-50% ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose CL-6B ion exchange column chromatography and Sepharose 6B-100 gel filtration. The purified enzyme was most active at 55$\circ$C and pH 6.5. The K$_{m}$ and V$_{max}$ values of the enzyme on $\rho $-nitrophenyl-$\alpha $-arabinofuranoside was determined to be 2.99 mM and 0.43 $\mu $mole/min (319.74 $\mu $mole/min/mg), respectively. The pI value was 4.5. The molecular weight of the native protein was estimated to be 289 kDa. The SDS-polyacrylamide gel clectrophoresis analysis suggested that the functional protein was a trimer of the 108 kDa identical subunits. The N-terminal amino acid sequence of the a-arabinofuranosidase was identified as X-Ser-Thr-Ala-Pro-Arg( \ulcorner )-Ala-Thr-Met-Val-Ile-Asp-X-Ala-Phe.
KANG , DAE-KYUNG;KIM, SANG-SUK;CHI, WON-JAE;HONG, SOON-KWANG;KIM, HA-KUN;KIM, HYUN-UK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권6호
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pp.1327-1332
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2004
The hemA gene encoding 5-aminolevulinic acid synthase (ALAS) was cloned from Rhodobacter capsulatus, and its nucleotide sequence was determined. DNA sequencing data revealed one open reading frame coding for a protein with 401 amino acids that displayed high similarity to the amino acid sequences of other known ALASs. The hemA gene was then cloned and expressed under the control of constitutive promotor in E. coli. The recombinant E. coli strain was able to accumulate 5-aminolevulinic acid to 21 mM in the liquid medium supplemented with 45 mM glycine and 120 mM succinate. In addition, a marked effect of the pH of the culture medium on ALA production was observed, and the optimum pH for culture medium was determined to be 5.8-6.3.
The delta sleep-inducing peptides (DSIP, Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) is an important regulatory hormone, controlling hypothalamus and pituitary functions. In the current study, an expression system was designed for the rapid and economic expression oi recombinant DSIP for biophysical studies. Artificially synthesized oligonucleotides encoding DSIP were cloned into a pGEX-KG vector and expressed in E. coli (BL21). The recombinant GST-DSIP was then readily purified using a GST affinity column. To obtain intact DSIP from the GST-DSIP, thrombin cleavage and a CNBr reaction were successively carried out. The DSIP in the CNBr reaction mixture was subjected to RP-HPLC purification to yield 1.2 mg DSIP from a 1 liter culture of E. coli. Identification of the DSIP was peformed using MALDI-MS and an amino acid composition analysis.
Objective: The study was conducted to evaluate the effect of stocking density and alphalipoic acid (ALA) on the growth performance, feed utilization, carcass traits, antioxidative ability and immune response of broilers. Methods: A total of 1,530 22-day-old male broilers (Arbor Acres) with comparable body weights ($731.92{\pm}5.26$) were placed into 18 cages ($2.46{\times}2.02m$) in groups of 75 birds ($15birds/m^2$, $37.5kg/m^2$; low stocking density [LD]), 90 birds ($18birds/m^2$, $45.0kg/m^2$; high stocking density [HD]) and 90 birds with 300 mg/kg ALA added to the basal diet ($18birds/m^2$, $45.0kg/m^2$; HD+ALA, high stocking density+${\alpha}$-lipoic acid); each treatment was represented by 6 replicates. The experimental period was 3 weeks. Results: The results showed that the high stocking density regimen resulted in a decreased growth, feed conversion ratio, carcass weight, thigh yield and bursa weight relative to body weight (p<0.05) on d 42. The abdominal fat yield in the HD+ALA group was lower (p = 0.031) than that of the LD group at 42 d. The superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities in serum were increased, and malondialdehyde content decreased after adding ALA product (p<0.05) on d 42. Additionally, the serum concentrations of immunoglobulin A (IgA) and IgG were decreased (p<0.05) and the level of diamine oxidase was higher (p<0.01) in the HD group on d 42. Conclusion: The high stocking density significantly decreased broiler growth performance, feed utilization and carcass traits, increased physiological and oxidative stress and induced intestinal mucosal injury. The supplementation of ALA product in broiler diet at 300 mg/kg may reduce the adverse effects of high stocking density-mediated stress by maintaining the antioxidant system and humoral immune system.
The sprA and sprB gene encoding chymotrypsin-like proteases Streptomyces griseus protease A (SGPA) and Streptomyces griseus protease B (SGPB) and the sprT gene that encodes Streptomyces griseus trypsin (SGT) were cloned from Streptomyces griseus ATCC10137 and overexpressed in Streptomyces lividans TK24 as a heterologous host. The chymotrypsin activity of tole culture broth measured with the artificial chromogenic substrate , N-succinyl-ala-ala-pro-phe-p-nitroanilide, was 10, 14 and 14 units/mg in the transformants haboring the sprA, sprB and sprD genes, respectively. The growth of S. lividans reached the maximum cell mass after 4 days of culture, yet SGPA and SGPD production started in the stationary phase of cell growth and kept increasing for up to 10 days of culture in an R2YE medium. The trypsin activity of the culture broth measured with the artificial chromogenic substrate , N-${\alpha}$-benzoyl-DL- arginine-p-nitroanilide , was 16 units/mg and SGT production started in the stationary phase of cell growth and kept increasing for up to 10 days of culture in an R2YE medium. The introduction of the sprA gene into S, lividans TK24 triggered the biosynthesis of pigmented antibiotics, actinorhodin and undecylprodigiosin, and induced significant morphological changes in the colonies in Benedict, R2YE, and R1R2 media. In addition, the introduction of the sprT gene also induced morphological changes in the colony shape without affecting the antibiotic production, thereby implying that certain proteases would appear to play very important and specific roles in secondary-metabolites formation and morphological differentiation in Streptomyces.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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