The principal morphological characters used for identification of hydrangea cultivars are often dependent on agroclimatic conditions. Furthermore, information on the selection or the genetic background of the hydrangea breeding is so rare that a molecular marker system for cultivar identification is needed. Amplified fragment length polymorphism (AFLP) markers were employed for fingerprinting Hydrangea macrophylla cultivars and candidate cultivars of H. macrophylla selected in Korea. One AFLP primer combination was sufficient to distinguish 17 H. macrophylla cultivars and 4 candidate cultivars. The profile of 19 loci that can minimize the error of amplification peak detection was constructed. AFLP markers were efficient for identification, estimation of genetic distances between cultivars, and cultivar discrimination. Based on the observed AFLP markers, genetic relationship was reconstructed by the UPGMA method. Seventeen H. macrophylla cultivars and H. macrophylla for. normalis formed a major cluster, and candidate cultivars selected in Korea formed another cluster.
Isozyme과 AFLP분석에 있어 종간의 유전적 차이 및 유연관계를 분석에 따른 각 유전표식의 특징 및 유용성을 파악하기 위하여 종으로 명확히 구분되는 북반구 2종(H. discus hannai와 또 rufescens)과 남반구 2종(H rubra와 H midae)을 대상으로 분석한 결과 Isozyme 및 AFLP분석은 전복류의 종간분석에 있어 유전적 차이 및 유연관계 분석에 유용한 유전표식임을 시사하였다.
Objective: This study was conducted to identify and evaluate the effective single nucleotide polymorphism (SNP) markers for fat deposition in the longissimus dorsi muscles of pigs using the amplified fragment length polymorphism (AFLP) approach. Methods: Sixty-four selective primer combinations were used to identify the AFLP markers in the 20 highest- and 20 lowest-intramuscular fat (IMF) content phenotypes. Five AFLP fragments were converted into simple codominant SNP markers. These SNP markers were tested in terms of their association with IMF content and fatty acid (FA) composition traits in 620 commercially crossbred pigs. Results: The SSC7 g.4937240C>G marker showed an association with IMF content (p<0.05). The SSC9 g.5496647_5496662insdel marker showed a significant association with IMF content and arachidonic levels (p<0.05). The SSC10 g.71225134G>A marker revealed an association with palmitoleic and ${\omega}9$ FA levels (p<0.05), while the SSC17 g.61976696G>T marker showed a significant association with IMF content and FA levels of palmitoleic, eicosenoic, arachidonic, monounsaturated fatty acids, and ${\omega}9$ FA levels. However, no significant association of SSC8 g.47338181G>A was observed with any IMF and FA levels in this study. Conclusion: Four SNP markers (SSC7 g.4937240C>G, SSC9 g.5496647_5496662insdel, SSC10 g.71225134G>A, and SSC17 g.61976696G>T) were found to be associated with IMF and/or FA content traits in commercially crossbred pigs. These findings provide evidence of the novel SNP markers as being potentially useful for selecting pigs with the desirable IMF content and FA composition.
1. 자포니카 벼 114 계통에 대해 다양성과 근연관계를 확인하고자 MITE 중에서 mPing family를 이용하여 MITE-TD 기법으로 분석하여 품종간의 다양성 정도를 산출한 결과 마커들의 PIC 값이 $0.293{\sim}0.499$ 범위로 나타났다. 2. 두 개의 mPing primer와 selective primer인 BfaI+G 와 BfaI+C의 조합을 이용하였을 때, 공시계통인 114개의 자포니카 벼 전체를 구분할 수 있었다. 3. NTSYS-pc를 이용한 근연관계 분석 결과, 유사계수의 범위는 0.802에서 부터 0.081까지였고, 자포니카 벼 114 품종은 크게 5 개의 그룹으로 분류되었다. 4. 8 개의 MITE-AFLP marker 연관분석을 밀양 23호/합천앵미 3호 조합 RIL을 이용하여 실시한 결과, 이들은 염색체 l번, 2번, 4번, 5번, 7번 그리고 9번에 각각 위치함을 확인하였다.
Amplified fragment length polymorphism(AFLP) technique is based on the polymorphism detection through selective PCR amplification of restriction fragments from digested genomic DNA and thus includes the procedures of the total DNA digestion by endonucleases, ligation of adapters to the ends of the fragments, and following the selective amplification of the restricted DNA fragments. This study were aimed to : (1) determine the genetic variability of S aureus strains, (2) estimate genetic diversity within and among these strains, (3) compare phylogenetic relationships among these strains as genetic markers using AFLP techniques. Genomic DNA was digested with a particular combination of three restriction enzymes with specific recognition sites and the DNA fragments were ligated to restriction specific adapters and amplified using the selective primer combinations. In the S aureus strain, the number of scorable AFLP bands detected per each primer combination varied from 29 to 102, with an average of 61.59 using 27 primer combinations. A total of 1,663 markers were generated, 904 bands of which were polymorphic, showing a 33.48% level of polymorphism with these primer combinations. Among the primer combinations, E02/T02, E02/T03, E04/H02, E02/T01 and E04/H03 primer combinations showed a high level of polymorphism with 0.78, 0.76, 0.74, 0.71 and 0.70, respectively. But T03/H01, E01/T02 and E01/T03 primer combinations showed a low level of polymorphism with 0.38, 0.37 and 0.15, respectively, Therefore, the former primer combinations will be the most effective for AFLP analysis of S aureus. In SA1 sub-types the level of polymorphism of S aureus KCTC 1927 was similar to that of S aureus CU 01(0.825) and higher than those of other strains such as S aureus CU 02 (0.715), S aureus KCTC 2199(0.625), S aureus KCTC 1916(0.607) and S aureus KCTC 1621 (0.553). In SA2 sub-types the level of polymorphism of S aureus CU 07 was similar to that of S aureus CU 08(0.935) and higher than those of both S aureus CU 04(0.883) and S aureus CU 05(0.883) and lower than those of S aureus CU 03(0.583). In SA3 subtypes the level of polymorphism of S aureus CU 11 was similar to that of S aureus CU 12(0.913) and lower than that of S aureus CU 15(0.623). The results proved that AFLP marker analysis of S aureus strain could be used to study the epidemiology of mastitis and in addition, common genotype in geographic region could be useful for the development of an effective vaccine or DNA marker for easy diagnosis of mastitis caused by S aureus infection.
Amplified fragment length polymorphism (AFLP) is a molecular marker technique based on DNA and is extremely useful in detection of high polymorphism between closely related genotypes like Korean wheat cultivars. Six sequence characterized amplified regions (SCARs) have been developed from inter simple sequence repeat (ISSR) analysis which enabled the identification and differentiation of 13 Korean wheat cultivars from the other cultivars. We used six combinations of primer sets in our AFLP analysis for developing additional cultivar-specific markers in Korean wheat. Fifty-eight of the AFLP bands were isolated from EA-ACG/MA-CAC, EA-AGC/MA-CTG and EA-AGG/MA-CTA primer combinations. Of which 40 bands were selected to design SCAR primer pairs for Korean wheat cultivar identification. Three of 58 amplified primer pairs, KWSM006, KWSM007 and JkSP, enabled wheat cultivar identification. Consequently, 23 of 32 Korean wheat cultivars were classified by eight SCAR marker sets.
Genetic variation and relationship of two wild (Pampus argenteus and P. echinogaster) and one cultured (P. chinesis) pomfret fish belonging to the genus Pampus were assessed. Specimens were collected from Korea and China and subjected to amplified fragment length polymorphism (AFLP) DNA fingerprinting. Four primer combinations generated a total of 304 DNA fragments ranging from 153 to 251 bands. Polymorphism and genetic diversity of cultured P. chinensis (22.9% and 0.038) were significantly lower than the two wild species of P. argenteus (93.6% and 0.311) and P. echinogaster (94.0% and 0.290). Genetic distance ranged from 0.335 (P. argenteus and P. echinogaster) to 0.646 (P. argenteus and P. chinensis) and showed a congeneric relationship within this genus. Twenty one of specific AFLP markers from four primer combinations bands were produced. These results suggest that AFLP polymorphism may be a useful marker for genetic identification among the three species studies here.
AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism) analysis was conducted to cultivars of tobacco, Nicotiana tabacum in order to select the cultivar-specific markers. AFLP results using 12 primer sets revealed genetic diversity among 12 field grown tobacco cultivars. Polymorphic fragments amplified by PCR was purified and cloned to identify their nucleotide sequences. From the sequences of them, 40 primer sets were designed to select cultivar-specific markers. When genomic DNA isolated from tobacco were used as PCR template, a set of primers, BrSF/BrSR showed Burley-specific band patterns. The results indicate that AFLP technique used in this experiments is useful for identifying tobacco cultivars in a rapid manner.
Kim, Hyun Jung;Han, Jung-Heon;Yoo, Jae Hyoung;Cho, Hwa Jin;Kim, Byung-Dong
Molecules and Cells
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제25권2호
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pp.205-210
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2008
To develop molecular markers linked to the $L^4$ locus conferring resistance to tobamovirus pathotypes in pepper plants, we performed AFLP with 512 primer combinations for susceptible (S pool) and resistant (R pool) DNA bulks against pathotype 1.2 of pepper mild mottle virus. Each bulk was made by pooling the DNA of five homozygous individuals from a T10 population, which was a near-isogenic $BC_4F_2$ generation for the $L^4$ locus. A total of 19 primer pairs produced scorable bands in the R pool. Further screening with these primer pairs was done on DNA bulks from T102, a $BC_{10}F_2$ derived from T10 by back crossing. Three AFLP markers were finally selected and designated L4-a, L4-b and L4-c. L4-a and L4-c each underwent one recombination event, whereas no recombination for L4-b was seen in 20 individuals of each DNA bulk. Linkage analysis of these markers in 112 $F_2$ T102 individuals showed that they were each within 2.5 cM of the $L^4$ locus. L4-b was successfully converted into a simple 340-bp SCAR marker, designated L4SC340, which mapped 1.8 cM from the $L^4$ locus in T102 and 0.9 cM in another $BC_{10}F_2$ population, T101. We believe that this newly characterized marker will improve selection of tobamovirus resistance in pepper plants by reducing breeding cost and time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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