This study was to investigate an effective biological control of forage diseases and provide a basic data and a model in improving variety of antagonistic bacteria, with growth promoting effect on forage, through cell fusion. The results obtained were summarized as follows; 1. The antagonistic himbacterium against soil-borne phathogenic fungi Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani was isolated from continuous cropping himsphere soil of forage, and its biological and physiological characteristics were investigated. This bacterium was identified as Bacillus subrilis and named BS 101. Another strain for cell fusion was Bacillus thur ingiensis ssp. kurstaki HD-I(BT 37669) with insecticidal crystal. 2. The auxotropic mutants of BS 101 and BT 37669 were derived after mutagenesis using N-methyl-N'nitro- Nitrosoguanidine(NTG) to give amino acid requirement marker. n e s e auxotropic mutants of BS 101 and BT 37669 were named BS 1013(his-) and BT 69(asp-), respectively. 3. The best protoplast requirement was obtained using DM 3 medium, containing 5% casamino acid, 1 M $MgCI_2$ and 2% bovine semm albumin, to give Fusant 3, 7 and 8. BT toxin gene was not identified with fusants by Southern blotting. However, SDS-PAGE analysis of strains showed various protein patterns among fusants. 4. From the dark culture experiment, growth of forage in inoculated soil with antagonistic bacteria was delayed than that of non-inoculated soil with antagonistic bacteria in each continuous cropping soil and in each sterilized soil. On the other hand, growth duration of forage was different between continuous cropping soil and sterilized soil. 5. Seed germination of Alfalfa, Italian ryegrass and Orchardgrass were significantly improved by inoculation of antagonistic bacteria(p< 0.05).
경주지역의 토양으로부터 Fusarium 속 식물병원균에 길항력을 갖는 chitinase 생산성 길항미생물을 분리할 수 있었으며, 이를 분류학적으로 동정하여 본 결과 Serratia proteamaculans 3095로 동정할 수 있었다. 이 균주가 생성하는 chitinase의 생성조건을 조사한 결과 탄소원으로 colloidal chitin이 가장 좋았으며 그 최적 농도는 0.15%이었고, glucose에 의해 chitinase 생산 유도를 억제받는 효소임을 알 수 있었다. 질소원에 의한 영향은 $(NH_4)_2SO_4,\;(NH_4)Cl$, peptone 등에 의해 chitinase 생산성이 증가되었고, $(NH_4)_2SO_4$와 peptone을 각각 0.1%씩 첨가하였을 때 chitinase 생산이 가장 좋았다. 또한 시드름병균 Fusarium oxysporum을 대상으로 in vitro, in vivo pot 실험을 통해 Serratia sp. 3095의 강한 방제력을 검증할 수 있었다.
Mehnaz, Samina;Baig, Deeba Noreen;Jamil, Farrukh;Weselowski, Brian;Lazarovits, George
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권12호
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pp.1688-1694
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2009
A novel strain of fluorescent pseudomonad (PB-St2) was isolated from surface-sterilized stems of sugarcane grown in Pakistan. The bacterium was identified as Pseudomonas aurantiaca on the basis of 16S rRNA gene sequence analysis and results from physiological and biochemical characteristics carried out with API50 CH and QTS 24 bacterial identification kits. Assays using substrate-specific media for enzymes revealed lipase and protease activities but cellulase, chitinase, or pectinase were not detected. The bacterium was unable to solubilize phosphate or produce indole acetic acid. However, it did produce HCN, siderophores, and homoserine lactones. In dual culture assays on agar, the bacterium showed antifungal activity against an important pathogen of sugarcane in Pakistan, namely Colletotrichum falcatum, as well as for pathogenic isolates of Fusarium oxysporium and F. lateritium but not against F. solani. The antifungal metabolites were identified using thin-layer chromatography, UV spectra, and MALDI-TOFF spectra and shown to be phenazine-1-carboxylic acid (PCA), 2-hydroxyphenazine (2-OH-PHZ), and N-hexanoyl homoserine lactone (HHL) (assessed using only TLC data). The capacity of this bacterium to produce HCN and 2-OH-PHZ, as well as to inhibit the growth of C. falcatum, has not been previously reported.
작물의 생육촉진 및 식물 진균병의 생물방제능을 동시에 나타내는 다기능성 미생물제제를 개발하고자 토양으로부터 분리하여 보관중인 세균 120종의 활성을 검토하였다. 그 중 siderophore를 생성하고 항진균 활성을 보이는 BS11-1, BS11-2, BS11-3를 선발하였다. 이들 균주는 cellulase, protease 같은 lytic enzyme을 생산하였으며 식물성장 촉진 호르몬중의 하나인 IAA를 생성하였다. 이들 선발균들에 의한 식물 생장 촉진을 조사한 결과, BS11-1, BS11-2, BS11-3 균 배양액 관주 시 고추 유묘의 생육을 132%, 122%, 120% 증가 시켰으며, BS11-1, BS11-2 균주의 경우 뿌리의 신장 및 생육이 촉진되었음을 확인 할 수 있었다.
In this paper, fractional factorial screening design (FFSD) and central composition design (CCD) were used to optimize the medium components for producing chitinase and gelatinase by Lysobacter capsici YS1215. Crab shell powder, nutrient broth and gelatin were proved to have significant effects on chitinase and gelatinase activity by FFSD first. An optimal medium was obtained by using a three factor CCD, which consisted of nutrient broth of $2.0gL^{-1}$, crab shell powder of $2.0gL^{-1}$ and gelatin of $1.0gL^{-1}$, respectively with the highest chitinase activity ($3.34UmL^{-1}$) and gelatinase activity ($14.15UmL^{-1}$). This value was 3.76 and 1.11 fold of the chitinase and gelatinase activity, respectively, compared to the lowest productive medium in the design matrix. In investigating potential of these enzymes partially purified from L. capsici YS1215 for biotechnological use, the crude enzymes was found to be inhibition against pathogenic fungal mycelia: Colletotrichum gleosporioides, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. In this study, we demonstrated the optimal medium for producing the chitinolytic and gelatinolytic enzymes by the strain YS1215 and the role of their enzymes that may be useful for further development of a biotechnological use and agricultural use for biological control of phytopathogenic fungi.
한국식물병리학회 1994년도 Proceedings of International Symposium on BIOLOGICAL CONTROL OF PLANT DISEASES Korean Society of Plant Pathology
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pp.27-49
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1994
Root colonization of biocontrol agents via seed treatment was investigated and a compatible combination, Gliocladium virens G872B and Pseudomonas putida Pf3, in colonizing cucumber rhizosphere was confirmed through the study. Much higher number of fungal and bacterial propagules were detected when two isolates were inoculated together. The presence of Pf3 in root system was greatly helpful to G872B to colonize at root tip. The mechanism of this phenomenon is partially elucidated through the results of in vitro experiments and the observations of scanning electron and fluorescence microscope. Addition of Pf3 cells resulted earlier germination of G872B conidia and increased mycelial growth. And the more number of germinated conidia on seed coat, the more vigorous hypal streching and sporulation on the root surface were observed in coinoculated treatment. The propagules of G872B on the cucumber root when they were challenged against the pathogenic Fusarium oxysporum, were even higher than that of G872B treated alone, and the magnitude of such a difference was getting grater toward the root ip and the population of F. oxysporum on the root was reduced by seed inoculation of G872B. The rhizosphere competence was obviously reflected to disease suppression and plant growth promotion that induced by the given isolate. Green house experiments revealed that the combined treatment provided long-term disease suppression with greater rate and the larger amount of fruit yield than single treatments. Through this study the low temperature growing Pseudomonas fluorescens M45 and MC07 were evaluated to apply them to the winter crops in field or plastic film house. In vitro tests reveal that M45 and MC07 inhibited the mycelial growth of Pythium ultimum, Rhizoctona solani and Phytophthora capsici and enhanced growth of cucumber cotyledon in MS agar. This effect was more pronounced when the bacteria were incubated at 14$^{\circ}C$ than at 27$^{\circ}C$. And disease suppression and plant growth promotion in green house were also superior at low temperature condition. Seed treatment of M45 or soil treatment of MC07 brought successful control of damping-off and enhanced seedling growth of cucumber. The combined treatment of two isolates was more effective than any single treatment.
Chang-Gi Back;You-Kyung Han;Walftor Bin Dumin;Jong-Han Park;Ji-Won Han;Yeoung-Seok Bae
농업과학연구
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제49권1호
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pp.113-120
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2022
Leaf blight disease caused by Stemphylium species is an important disease in Allium crops, specifically onion, garlic and welsh onion. In 2018, leaf blight symptoms were severe and damaged onion and garlic in Jeonnam province in Korea. In addition, small purple spots on garlic burbs were observed in a post-harvest storage warehouse. Several Stemphylium isolates were isolated from diseased leaves from the field and from garlic bulb samples and were analyzed in terms of homology and the phylogenetic relationship based on the internal transcribed spacer region and calmodulin gene sequence. The results showed that among three Stemphylium species identified, S. vesicarium is most prevalent on onion and garlic. S. eturmiunum was for the first time identified as pathogenic to onion and garlic, whereas S. solani was found in welsh onion crops. Although these isolates grew well at the optimum temperature at 20 - 25℃, they could also grow at low temperatures of 10 - 15℃. A pathogenicity test was conducted using S. vesicarium and S. eturmiunum on onion and garlic respectively. These results showed that two Stemphylium species were highly virulent with cross pathogenicity in onion and garlic. The results of this study can support the biological characterization of Stemphylium species in Korea. Moreover, further research will need to develop fungicide application strategies for onion and garlic crops.
본 연구는 귀화식물인 Solidago altissima, Amaranthus retroflexus, Sida spinosa 등을 이용하여 친환경 농자재로 개발하기 위한 기초자료를 제공하기 위해 수용성 추출액의 농도에 따른 수용체 식물의 발아 및 유식물 생장과 실험 병원균의 생장을 조사하였다. 공여체식물에 따른 수용성 추출액 농도가 증가됨에 따라 대부분 검정식물의 상대발아율은 감소하는 경향을 보이는데 S. spinosa(r=-0.540, p<0.01), Physalis wrightii(r=-0.693, p<0.01), A. retroflexus(r=-0.724, p<0.01), S. altissima(r=-0.728, p<0.01), Eclipta prostrata(r=-0.779, p<0.01) 순으로 감소하는 경향이 큰 것으로 조사되었고 평균발아일수도 처리구 농도가 증가함에 따라 발아하는데 소요되는 시간이 증가 되었으며(r=0.769, p<0.01) 공여체식물과 검정식물에 따라 약간의 정도 차이를 보였다. 또한 공여체식물의 수용성 추출액 농도가 증가함에 따라 유식물의 지상부의 길이(r=-0.587, p<0.01), 지하부의 길이(r=-0.741, p<0.01), 생체량(r=-0.574, p<0.01)과 뿌리털의 발생도 감소하였다. 한편 공여체식물의 수용성추출액 농도 증가에 따른 검정 병원균의 생장은 Botrytis cinerea(r=-0.266, p<0.05), Diaporthe citri(r=-0.323 p<0.01), Colletotrichum gloeosporioides(r=-0.512, p<0.01), Pythium ultimum(r=-0.581, p<0.01), Rhizoctonia solani(r=-0.806, p<0.01) 순으로 생장이 억제되었다. 제초 및 항균활성을 보이는 수용체식물의 총 페놀 함량은 S. altissima $17.3{\pm}0.5mg/g$, A. retroflexus $13.1{\pm}0.3mg/g$, P. wrightii $12.0{\pm}0.4mg/g$, S. spinosa $9.5{\pm}0.1mg/g$, E. prostrata $4.1{\pm}0.1mg/g$ 순으로 분석되었다. 이들 결과를 종합하면 귀화식물인 수용체식물들은 자생식물과의 경쟁을 함에 있어 알레로패시 효과를 나타내는 페놀 화합물 등이 수관 내 토양으로 방출하여 하부식생에 대한 발아 및 생장과 토양미생물 생장 등에 영향을 주기 때문에 경쟁적 우위를 점하고 있으며, 천연제초제 살균제로서의 활용 가능성을 가지고 있는 것으로 판단된다.
본 보고에서 서해안 개소의 매개 진딧물 밀도가 대관령에서의 밀도보다 대체로 낮았으나 장소에 따라서는 상당히 높은 사실을 밝힌바 있다. 새 감자의 평지생산방식이 현행방식보다 합리적이어서 유리하므로 그 생산휴계의 확립을 위한 기초자료를 얻고자 본 조사에 착수하였다. 서해안 답작물지대에서의 진딧물 발생원은 부락이므로 여기서 얼마나 떨어진 곳이라야 안전하게 씨감자를 재배할 수 있을 까를 위하여 전북 김제군 광활면 옥포리를 택하여 이곳을 중심으로 1.5km 평방지구내 13개소에 동서남북으로 250m 거리를 두고 진딧물 채집기을 설치하여 1968년 7월 21일부터 10월 31일까지 수집된 진딧물을 매일아침에 채집하여 종명을 밝혔다. 감자바이러스 매개 진딧물이 세계적으로 20종 알려져 있는데 우리나라에 있는 것은 10종이며 이 지역에서 발견된 것은 복숭아 흑진딧물(Myzus persicae), 목화진딧물(Aphis gossypii), 싸리수염진딧물(Aulacorthum solani), 무테두리진딧물(Lipaphis erysimi) 및 국화꼬마수염진딧물 (Macrosiphoniella sanborni)의 5종이었다. 중락중심지에서의 매개진딧물 밀도는 내릉의 수원에서의 그것 보다도 높았으나 여기서 불과 250m만 떨어져도 대관령에서의 밀도 보다 낮아졌다. 그러나 조사지점의 환경에 따라 상당한 차이가 있다. 즉 매개 진딧물의 기주식물이 있는 인가와의 거리에 따라 달라진다. 추작용 씨감자의 현재산지인 전남의 일모, 경남의 락은 내륙의 부락근방이라서 매개진딧물 관계로 부적당하다고 본다. 전문가의 식물역학적 진단에 의해 서해안 답작지대중 매개 진딧물이 적은 곳을 택해서 씨감자를 생산한다면 우수한 씨감자를 양산할 수 있다. 씨감자 부족량 60,000톤을 충족시킨다면 $50\%$ 증수(년간 250만톤)할 수 있어 농가소득증대는 물론 남는 감자는 전분원료로서 단경기에 공급할 수 있으며 일부를 사료화할 수 있고 우수한 씨감자는 외국에 수출할 수 도 있으며 전북 서해안의 광대한 일모작지대를 이모작지대로 만들 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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