• 한국균학회지
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• 제36권2호
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• pp.189-195
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• 2008

Aspergillus nidulans는 빛이 없는 조건에서는 유성분화가 주로 일어나고 빛이 있는 조건에서는 유성분화가 억제되고 대신 무성분화가 유도된다. 빛에 의해서 유성분화가 억제되는 것은 빛에 반응하여 유성 또는 무성분화를 조절하는 유전자가 있다는 것을 시사한다. 따라서 빛에 의해서 조절되는 유전자를 연구하기 위하여 광 조건하에서 유성분화를 하는 silA98 돌연변이를 분리하였으며, 이를 보완하는 유전자를 분리 및 분석하고자 A. nidulans의 AMA-NotI genomic library로부터 silA98 돌연변이를 상보하는 유전자 silA를 분리하였다. silA 유전자의 예상 ORF는 2,388 bp의 염기로 구성되어지고 795개의 아미노산을 암호화하고 있었다. 이 유전자는 Saccharomyces cerevisiae의 ARO80 유전자와 상동성을 보이며 SilA 단백질의 N 말단에는 약 51.9%의 상동성을 가지는 ${Zn_2}{Cys_6}$ motif를 지니고 있었다. silA 유전자 결손돌연변이주는 광 존재 하에서뿐만 아니라 고농도의 sorbitol에서도 유성분화가 유도되었다. 이는 silA 유전자가 빛과 고삼투 조건에서 유성분화를 억제하는 조절과정에 관여하고 있음을 의미한다. silA 유전자를 niiA promoter로 과다 발현시켰을 때의 형질은 야생형과 큰 차이를 보이지 않았다.

• Journal of Microbiology
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• 제41권3호
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• pp.224-231
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• 2003

The null pigmentation mutant (npgA1) of Aspergillus nidulans was previously characterized by its production of no pigment at any stage of its life cycle, its reduction in hyphal branching, and its delay in the asexual spore development. The chemical composition of the cell wall was also altered in npgA1 mutants that became more sensitive to Novozyme 234$\^$TM/, which is possibly due to a structural defect in the cell wall. To investigate the effects of the cell wall structure on these pleiomorphic phenomena, we examined the ultrastructure of the cell wall in the npgA1 mutant (WX17). Scanning electron micrographs (SEM) showed that after being cultured for six days, the outermost layer of the conidial wall of WX17 peeled off. Although this phenotype suggested that the cell wall structure in WX17 may be modified, examination using TEM of the fine structure of cross-sectioned hyphal wall of WX17 did not show any differences from that of FGSC4. However, staining for carbohydrates of wall layers showed that the electron-translucent layer of the cell wall was missing in WX17. In addition, the outermost layer H1 of the hyphal wall was also absent in WX17. The ultrastructural observation and cytochemical analysis of cell walls suggested that the pigmentation defect in WX17 may be attributed to the lack of a layer in the cell wall.

• 미생물학회지
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• 제47권4호
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• pp.281-288
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• 2011

스트레스 반응에 관여하는 Saccharomyces cerevisiae 전사인자인 Msn2/4의 $C_2H_2$ zinc finger 부위와 아미노산 서열 유사성을 보이는 Aspergillus nidulans MsnA의 하위 유전자 획득을 위하여 msnA 결손 돌연변이체 또는 과발현 균주에서 야생주와 비교하여 차별적으로 발현되는 유전자(Differentially Expressed Gene, DEG)들을 분리하였다. 선별된 DEG들은 염기서열 결정을 통해 해당 유전자들을 동정하였고 이들 중 DEG6는 단당류 수송자(monosaccharide transporter)로 예측된 mstB 유전자로 밝혀졌다. mstB의 발현은 MsnA 과발현에 의하여 증가되었으며 MsnA는 in vitro에서 mstB 프로모터 부위에 직접적으로 결합하였다. MstB는 12개의 막결합 부위를 가지며 A. niger의 고친화성 단당류 수송자(high-affinity monosaccharide transporter)인 MstA와 80%의 높은 아미노산 서열 동일성을 보였다. mstB 결손 돌연변이체의 표현형은 야생주와 유사하였으나 MstB가 과발현된 균주는 낮은 당 농도인 0.1% glucose 배지에서 유성생식 기관인 cleistothecia의 형성이 증가하였다. 이러한 결과는 단당류 수송자인 MstB가 유성분화 과정에서 요구되는 당의 수송에 관여하고 있음을 시사한다.

• 미생물학회지
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• 제24권3호
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• pp.221-227
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• 1986

Aspergillus nidulans에서, UV나 4- NQO에 의한 돌연변이 유발에 있어 성내적으로 핑요한 uvsH돌연변이를 가 지고 있는 변이주를 이용하여 mitotic recombination 현상을 조사하였다. 비록 uvsH locus는 {pB 37과 centromere 사이에서의 자말적인 mitotic crossing over에는 영향플 주지 않았지만 uvsH/uvsH동형이애체에서 UV에 의한 Int te rgenic recombination은 얻어나지 않았다. 또한 서로 상보적이 아닌 riboA 1과 ribo A3 유전핵적 단시에서의 riboflavin에 대한 gene converSlOn에 있어셔 u uvsH 돌연변이는 자말석이든 LV보 유멜시켰던 이 과정에 관여하고 있지 않있다. 비록 정상석인 성 장에서는 거으1 차이가 없였지만, 세포들을 UV로 조사하였을 때 야생주에 비해 uvsH동형 이배체에서의 aneuploid발생이 높은 빈도로 나타났다.

• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 2006년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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• pp.137-137
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• 2006

• 미생물학회지
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• 제42권4호
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• pp.246-251
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• 2006

사상성 진균인 Aspergillus nidulans에서 유성분화초기단계, 또는 유성분화유도를 위한 세포내 조건 형성과정에 관여할 것으로 예상되는 유전자를 탐색하였다. 선행연구결과를 통해 유성분화를 전혀 하지 못하는 NSD (never in sexual development) 돌연변이주가 분리되어 nsdA, nsdB, nsdC, 그리고 nsdD의 4상 보군으로 동정된 바 있다. 본 연구에서는 이들 유전자 중 nsdC 유전자를 분리하고자 A. nidulans AMAl-Not I Genomic DNA library로 nsdC6 돌연변이균주를 형질전환하여 야생형처럼 유성분화를 할 수 있는 형질전환체를 분리하고 이들로부터 약 10 kb genomic DNA가 삽입된 library DNA를 분리하였다. Genomic priming system (GPS)을 이용하여 nsdC6 돌연변이를 상보하는 유전자의 부분 서열을 확보한 후 전체 DNA 염기서열을 결정하였다. 유전자분석 결과 nsdC는 intron 없이 1,929염기(643개의 아미노산)로 구성된 Open reading frame (ORF)를 가지며, 약 1kb 정도의 비교적 긴 5'-UTR 부위에 2개의 intron을 가지고 있음이 확인되었다. 또한 NsdC polypeptide의 중앙에 $C_2H_2C_2H_2C_2HC$ 형의 zinc finger DNA binding domain과 C 말단 부위에 coiled-coil domain이 존재하였다. nsdC6 돌연변이는ORF의 407 bp와 408 bp사이에 엽기 T가 삽입되어 frameshift가 일어난 것으로 밝혀졌다. 따라서 nsdC6 돌연변이균주는 단지 139개 아미노산만 갖고 있는 결실 단백질이 생산됨을 알 수 있었다.

• 미생물학회지
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• 제17권3호
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• pp.137-151
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• 1979

Germinating conidia of Aspergillus nidulans diploid heterozygous for color and other genetic markers were used to direct and distinguish genetic events such as mutation, mitotic crossingover and nondisjunction in a single test after treatment with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NG), mitomycin C(MC), and chloral hydrate(CH). The following results were obtained : 1. NG reduced the survival of conidia and increased the frequencies of miototic segregants about sevenfoli over the control ; among the mitotic segregants the predominant genetic event was mitotic crossingover. NG also produced many abnormal colonies, which appeared to be of the types caused by induced semidominant lethals or chromosomal aberrations, and the aneuploid types found spontaneously. 2. After treatment with MC the survival of conidia was reduced but few abnormal colonies were produced. The frequencies of miotic segregants were increased about threefold over the control ; in the mitotic segeregants the induced genetic event was mitotic crossingover. 3. CH gave no apparent effect on the survival of conidia and the frequencies of mitotic segregants. However, CH generated abnormal colonies, very greatly, which turned out to be of the aneuploid types. This result suggests that CH interferes with the normal distribution of chromosomes in mitosis.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제26권5호
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• pp.928-937
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• 2016

S-Nitrosoglutathione reductase (GSNOR) metabolizes S-nitrosoglutathione (GSNO) and has been shown to play important roles in regulating cellular signaling and formulating host defense by modulating intracellular nitric oxide levels. The enzyme has been found in bacterial, yeast, mushroom, plant, and mammalian cells. However, to date, there is still no evidence of its occurrence in filamentous fungi. In this study, we cloned and investigated a GSNOR-like enzyme from the filamentous fungus Aspergillus nidulans. The enzyme occurred in native form as a homodimer and exhibited low thermal stability. GSNO was an ideal substrate for the enzyme. The apparent K_m and k_cat values were 0.55 mM and 34,100 min^-1, respectively. Substrate binding sites and catalytic center amino acid residues based on those from known GSNORs were conserved in this enzyme, and the corresponding roles were verified using site-directed mutagenesis. Therefore, we demonstrated the presence of GSNOR in a filamentous fungus for the first time.

• Journal of Microbiology
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• 제41권1호
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• pp.34-40
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• 2003

Aspergillus nidulans, a homothalic ascomycete, has a complete sexual reproductive cycle as well as an asexual one. Both sexual and asexual development are known to be genetically programmed, but are also strongly affected by environmental factors including nutrients, light, temperature and osmolarity. We have examined these factors to define favored conditions for fruiting body (cleistothecium) formation. In general, fruiting body formation was enhanced where carbon and nitrogen sources were sufficient. Limitation of C-source caused predominant asexual development while inhibiting sexual development. When higher concentrations of glucose were supplied, more cleistothecia were formed. Other carbon sources including lactose, galactose and glycerol made the fungus develop cleistothecia very well, whereas acetate caused asexual sporulation only. Organic nitrogen sources like casein hydrolysate and glycine, and an increase in nitrate or ammonium concentration also enhanced sexual development. In addition to nutrient effects, low levels of aerobic respiration, caused either by platesealing or treatment with various chemicals, favored sexual development. Carbon limitation, light exposure and a high concentration of salts promoted asexual development preferentially, suggesting that stress conditions may drive the cell to develop asexual sporulation while comfortable and wellnourished growth conditions favored sexual development.

• 미생물학회지
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• 제47권4호
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• pp.302-307
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• 2011

A. nidulans chitin deacetylase를 자가분해 용액으로부터 소수성 상호작용 컬럼 크로마토그래피와 이온 교환 컬럼 크로마토그래피를 통해 순수 분리하였다. 효소 활성에 관여하는 아미노산을 분석하기 위해 효소 단백질과 특정 아미노산 잔기에 작용하는 화학 수식제를 반응시켜 효소를 화학 수식하였다. histidine 잔기가 화학 수식된 효소는 효소활성을 100% 상실하였으며, arginine의 잔기 혹은 tyrosine 잔기는 100 ${\mu}M$보다 높은 농도의 수식제로 화학수식 되었을 때 효소활성이 감소하였다. Aspartic acid 혹은 glutamic acid의 carboxyl group 잔기의 화학수식은 효소활성의 상대적으로 작은감소를 나타냈다. 이것은 산성 아미노산의 잔기가 화학 촉매 반응에 직접 관여하지 않았거나 혹은 산성 아미노산 잔기는 효소단백질의 전반적인 구조에 영향을 미친다는 것을 추론할 수 있다. 이러한 결과는 효소 단백질의 촉매활성에 histidine, tyrosine 및 arginine 잔기가 중요한 역할을 담당하는 것을 의미한다.