The antibacterial protein gene, nuecin was expressed in Sf9 cells using baculovirus expression vector system (BEVS). The antibactetial activity of mature nuecin against Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum and Pseudomonas tolaasii was significantly high, demonstrating that nuecin had a wider antibacterial spectrum on gram negative and positive bacteria. The result appears to be superior to other antibacterial peptide, attacin. The nuecin was purified by SP-sepharose and Mono Q HR ion-exchange chromatography, and then by Superdex 200 HR 10/30 column. The purified nuecin is quite stable at 80$\^{C}$ and 100$\^{C}$ for several hours of incubation and in a wide pH range (pH 2-12).
The Polyvinyl alcohol(PVA) oxidase involved in PVA degradation by microorganism has been purified to homogeneity from culture broth of Xanthomonas campestris J2Y grown in a minimal medium containing PVA as a sole carbon source. The enzyme was purified by DEAE-cellulose chromatograpy and Sephadex G-150 gel filtration. The purified PVA oxidase was electrophoretically homogeneous both in the absence and presence of SDS. The molecular weight of the enzyme was estimated to be about 55,000 daltons by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Sephadex G-150 gel filtration. The native enzyme existed as a monomer. The optimal pH and temperature was shown to be pH 7 and $37^{\circ}C$ respectively. The activity of enzyme was stable below $55^{\circ}C$ and between pH range of $5{\sim}11$. The enzyme activity was significantly inhibited by metal compounds such as $Ag^{2+},\;Hg^{2+}$. While, metal ions such as $Mn^{2+},\;and\;Cu^{2+}$ stimulated the reaction. Km value of the enzyme for PVA was $7.04{\times}10^{-2}mmol/{\ell}$.
For searching the natural herbicide-components, the seed germination and seedling growth of receptor plant species (Brassica campestris, Sesamum indicum, Perilla frutescens and Echinochloa crus-galli) were investigated in four solvent-extracts extracted from Coptis chinensis Franch. The seed germination of receptor plant species was largely inhibited in 2,000 ppm of ethyl acetate compared to the control, and it was inhibited in order of P. frutescens, B. campestris, E. crux-galli, and S. indicum. In seedling growth, the shoot and root elongations of receptor plant species were inhibited in order of S. indicum, P. frutescens, B. campostris, and E. crus-galli. Root elongation was remarkably reduced in order of $H_2O$, butyl alcohol, and hexane, ethyl acetate extracts. Of four receptor plant species, seed germination and seedling growth of B. campestris and S. indicum showed the species-specific reaction to the solvent-extracts extracted from C. chinemis. $H_2O$ extract had a natural herbicide potential to the seed germination or root elongation in B. campestris and S. indicum. The result can be provided a basic data f3r the development of natural herbicide.
The roots of Brassica campestris ssp rapa were extracted with 80% aqueous MeOH, and the concentrated extract was partitioned with EtOAc, n-BuOH and $H_2O$. From the EtOAc fraction, three compounds were isolated through the repeated silica gel and octadecyl silica gel (ODS) column chromatography. From the results of spectroscopic data including NMR and MS, the chemical structures of the compounds were determined as caulilexin C (1), indoleacetonitrile (2) and arvelexin (3). The arvelexin (3) has been isolated from this plant for the first time. Compounds 1, 2 and 3 showed inhibitory activity on human Acyl CoA: cholesterol. transferase 1 (hACAT1) by $54.6{\pm}6.0%$, $69.2{\pm}4.7%$ and $68.6{\pm}3.7%$, and on human Acyl CoA: cholesterol transferase 2(hACAT2) by $4.8{\pm}13.4%$, $45.6{\pm}4.8%$ and $39.5{\pm}4.3%$, respectively, at 100 ${\mu}g/ml$.
Chinese cabbage (Brassica campestris ssp pekinensis) is one of the most popular green vegetables in Cruciferae family, which consisted in many Korean food. All kinds of Chinese cabbage are used both fresh and cooked with certain varieties being more suitable than others for some uses. A unique dish, Kimchi, has been developed in Korea and elsewhere by fermenting Chinese cabbage and pickling it in salt solution. Though lots of beneficial effect of Kimchi on human health has been published before, it is still debatable and in vague on the active origin of the Kimchi or of the Chinese cabbage responsible for the corresponding biological activities. We have recently conducted photochemical investigation of the Chinese cabbage, which is the main ingredient of the Korean traditional food, Kimchi. The MeOH extract of Chinese cabbage was partitioned with ethylacetate and BuOH, successively. The ethyl acetate soluble part was subjected to column chromatography with silica gel and RP-18, which gave finally five minor components, i.e., ${\beta}-sitosterol$ (1), indole-3-acetonitrile (2), 4-methoxyindole-3-acetonitrile (3), methyl ferulate (4), glycerol 1-(9,12,15-octadecatrienoate) (5). The structures of them were established on the basis of spectral $(^1H-NMR,\;^{13}C-NMR)$ evidences.
The demand of packaged baby leaves has been increased for its convenient use as fresh-cut produce. This investigation was aimed to explore the effects of different sanitizers on the quality parameters of 'Tah Tasai' Chinese cabbage (Brassica campestris var. narinosa) baby leaves. Thirteen days old baby leaves were harvested and washed in tap water (TW), 100 ppm chlorine solution (Cl), 2 ppm ozonated water ($O_3$), 15 ppm chlorine dioxide solution ($ClO_2$) and washing with 0.2% citric acid solution followed by 50% ethanol spray (CA+Et). The samples were then packaged in 50 ${\mu}m$ polyethylene bags and stored at $5^{\circ}C$ for 10 days. Off-odor of packaged baby leaves was not detected during storage. There was no significant difference in color parameters among the treatments. Samples treated with $O_3$ showed substantially higher electrolyte leakage throughout the storage. This treatment also rendered a higher accumulation of $CO_2$ in the packages. Samples treated with Cl and CA+Et maintained good overall visual quality with higher scores compared to that of $O_3$ and $ClO_2$. Although Cl treatment showed lower number of total aerobic count at the beginning of storage, citric acid in combination with ethanol treatment was more effective until the end of storage. The combined treatment also showed comparatively lower coliform plate count. This result indicates that citric acid wash followed by ethanol spray could be an alternative to chlorine for environment friendly sanitization of baby leaves.
Random sequencing of expressed sequence tags in roots of Chinese cabbage led to isolation of a partial cDNA clone, BR77, which encoded a putative protein kinase. Using the BR77 cDNA as a probe, we isolated a full-length cDNA encoding the Brassica campestris protein kinase 1 (Bcpk1). The Bcpt1 cDNA contained one open reading frame encoding a polypeptide of 439 amino acids. The putative polypeptide consisted of a short N-terminal region and a protein kinase catalytic domain. The catalytic domain of Bcpkl showed a high homology to cAMP- and calcium- phospholipid-dependent subfamilies of serine/threonine protein kineses. Eleven major catalytic domains in protein kineses were well conserved in Bcpk1. However, Bcpk1 contained a unique nonhomologous intervening sequence between subdomains VII and VIII, which was not found in protein kineses of animals and lower eukaryotes. Genomic DNA gel blot analysis showed that Bcpt1 genes might be present as three copies in the Chinese cabbage genome. These imply that Bcpk1 belongs to a plant-specific serine/threonine protein kinase subfamily.
Two lactic acid bacteria (LAB) designated J02 and J13 were recovered from fermented vegetables based on their ability to suppress soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) on radish. J02 and J13 were identified as Lactobacillus pentosus and Leuconostoc fallax, respectively. The ability of J02 and J13 to suppress plant diseases is highly dependent on chitosan. LAB alone has no effect and chitosan alone has only a moderate effect on disease reduction. However, J02 or J13 broth cultures plus chitosan display a strong inhibitory effect against plant pathogens and significantly reduces disease severity. LAB strains after being cultured in fish surimi (agricultural waste) and glycerol or sucrose-containing medium and mixed with chitosan, reduce three cruciferous vegetable diseases, including cabbage black spot caused by Alternaria brassicicola, black rot caused by Xanthomonas campestris pv. campestris, and soft rot caused by Pcc. Experimental trials reveal that multiple applications are more effective than a single application. In-vitro assays also reveal the J02/chitosan mixture is antagonistic against Colletotrichum higginsianum, Sclerotium rolfsii, and Fusarium oxysporum f. sp. rapae, indicating a broad-spectrum activity of LAB/chitosan. Overall, our results indicate that a synergistic combination of LAB and chitosan offers a promising approach to biocontrol.
Kim, Jeong-Ho;Kim, Bong-Gyu;Kim, Jae-Ah;Park, Young-Hee;Lee, Yoon-Jung;Lim, Yoong-Ho;Ahn, Joong-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.17
no.3
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pp.539-542
/
2007
Glycosyltransferase family 1 (UOT) uses small chemicals including phenolics, antibiotics, and alkaloids as substrates to have an influence in biological activities. A glycosyltransferase (XcGT-2) from Xanthomonas campestris was cloned and consisted of a 1,257 bp open reading frame encoding a 45.5 kDa protein. In order to use this for the modification of phenolic compounds, XcGT-2 was expressed in Escherichia coli as a glutathione S-transferase fusion protein. With the E. coli transformant expressing XcGT-2, biotransformation of flavonoids was carried out. Flavonoids having a double bond between carbons 2 and 3, and hydroxyl groups at both C-3' and C-4', were glycosylated and the glycosylation position was determined to be at the hydroxyl group of C-3', using nuclear magnetic resonance spectroscopy. These results showed that XcGT-2 regiospecifically transferred a glucose molecule to the 3'-hydroxyl group of flavonoids containing both 3' and 4'-hydroxyl groups.
To investigate phytotoxic substances in Equisetum arvense, the aqueous extracts(25 and 8$0^{\circ}C$) or the freeze-drying matter from aqueous extracts($25^{\circ}C$) of E. arvense were tested at different concentrations for biological activities on callus induction and growth, seed germination, seedling growth and antibacterial function. Callus induction and growth of Oryza sativa and Brassica campestris ssp. pekinensis were inhibited by the aqueous extracts at 8$0^{\circ}C$ than at $25^{\circ}C$ and the higher concentrations. Callus growth of four receptor species was inhibited in order of Platycodon grandiflorum, Sesamum indicum, Brassica campestris ssp. pekinensis and Oryza sativa. Seed germination of Ο. sativa, S. indicum, and B. campestris ssp. pekinensis was not affected at low concentration, but it was proportionally inhibited by the higher concentrations. The greatest inhibition of seed germination was 28.3% compared to control, when 2,000$\mu\textrm{g}$/ml of freeze-drying matter was applied to B. campestris ssp. pekinensis. Shoot growth was stimulated by 500$\mu\textrm{g}$/ml of freeze-drying matter, but it was inhibited by the higher concentrations. Root growth was significantly inhibited compare to control at all concentrations. Antibacterial activity of freeze-drying matter didn't showed against Xantomonas oryzae and Eschrichia coli, but a small clear zone was formed by 500$\mu\textrm{g}$ of freeze-drying matter against Erwinia carotovora ssp. carotovora.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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