Previous work has identified a Streptomyces coelicolor gene, rns, encoding a 140 kDa protein (RNase ES) that exhibits the endoribonucleolytic cleavage specificity characteristic of RNase E and confers viability on and allows the propagation of E. coli cells lacking RNase E. Here, we identify a putative S. coelicolor 9S rRNA sequence and sites cleaved by RNase ES. The cleavage of the S. coelicolor 9S rRNA transcript by RNase ES resulted in a 5S rRNA precursor (p5S) that had four and two additional nucleotides at the 5' end and 3' ends of the mature 5S rRNA, respectively. However, despite the similarities between RNase E and RNase ES, these enzymes could accurately process 9S rRNA from just their own bacteria, indicating that these ancient enzymes and the rRNA segments that they attack appear to have co-evolved.
Bacterial 16S rRNA gene sequences have been widely used for the studies on molecular phylogeny, evolutional history, and molecular detections. Bacterial genomes have multiple rRNA operons, of which gene sequences sometimes are variable. In the present study, heterogeneity of the Vibrio 16S rRNA gene sequences were investigated. Vibrio 16S rRNA sequences were obtained from GenBank databases, considering the completion of gene annotation of Vibrio genome sequences. These included V. cholerae, V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. splendidus, and V. vulnificus. Chromosome 1 of the studied Vibrio had 7~10 copies of the 16S rRNA gene, and their intragenomic variations were less than 0.9% dissimilarity (more than 99.1% DNA similarity). Chromosome 2 had none or single 16S rRNA gene. Intragenomic 16S rRNA genotypes were detected at least 5 types (V. vulnificus #CMCP6) to 8 types (V. parahaemolyticus #RIMD 2210633, V. harveyi #ATCC BAA-1116). These suggest that Vibrio has high heterogeneity of the 16S rRNA gene sequences.
Bongrae Cho;Myung-Un Choi;Se Won Seh;ahei Ihm;Moonjoo Koh;Inwon Park
Journal of the Korean Chemical Society
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v.36
no.3
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pp.460-465
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1992
The structure of th 5S rRNA isolated from Xanthomonas citri was determined by enzymatic and chemical degradation methods. It consists of 119 nucleotides and contains no modified nucleosides. As does the 5S rRNA of X. maltophilia, it contains an additional uridine residue on the 5'-terminus. The secondary structure of the 5S rRNA from X. citri was almost identical to the generalized models proposed by many other workers [De Wachter et al., Biochimie, 64, 311 (1982); Specht et al., Nucleic Acids Res., 18, 2215 (1990); Cho et al., Proceedings of the First Symposium on Biomolecules, p. 9 (1991)]. The secondary structure of 5S rRNA from X. citri consists of five helices, five loops and two bulges. This 5S rRNA has a uridine residue at position 66 as a bulge.
Karyotypic analysis and FISH (fluorescence in situ hybridization) with 45S and 5S rRNA genes were carried out in Persicaria tinctoria H Gross. The somatic metaphase chromosomes were ranged from 2.25 ${\mu}m$ to 1.50 ${\mu}m$ in length. Chromosome number was 2n = 4x = 40 with the basic number of x = 10. The chromosome complement of the species consisted of 16 pairs of metacentrics (chromososomes 1,2,3,4,6,7,8,9, 10, 11, 12, 13, 15, 18, 19 and 20) and 4 pairs of submetacentrics (chromosome 5, 14, 16 and 17). The karyotype formula was K(2n) = 4x = 32 m + 8 sm. In FISH analysis, three pairs of 45S rRNA gene loci on the terminal region of submetacentrics (chromosomes 5, 16 and 17) and two pairs of 5S rRNA gene loci on the centromeric region of metacentrics (chromosomes 9 and 11) were detected, respectively.
Metagenomic analysis of the human intestinal microbiota has extended our understanding of the role of these bacteria in improving human intestinal health; however, a number of reports have shown that current total fecal DNA extraction methods and 16S rRNA universal primer sets could affect the species coverage and resolution of these analyses. Here, we improved the extraction method for total DNA from human fecal samples by optimization of the lysis buffer, boiling time (10 min), and bead-beating time (0 min). In addition, we developed a new long-range 16S rRNA universal PCR primer set targeting the V6 to V9 regions with a 580 bp DNA product length. This new 16S rRNA primer set was evaluated by comparison with two previously developed 16S rRNA universal primer sets and showed high species coverage and resolution. The optimized total fecal DNA extraction method and newly designed long-range 16S rRNA universal primer set will be useful for the highly accurate metagenomic analysis of adult and infant intestinal microbiota with minimization of any bias.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.40
no.4
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pp.881-889
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2023
The genus Hymenobacter, type genus of the family Hymenobacteraceae and a member of the phylum Bacteroidota includes gram-negative and red-pigmented rods. Those bacteria have been isolated from various environments of the earth. I isolated a red-pigmented, gram-negative rod from a pond in the campus of the Changwon University, Changwon, Kyeongnam and designated this bacterium as strain B2. Strain B2 was further analyzed phylogenetically and biochemically, and concluded as a member of genus Hymenobacter. BLAST search of the 16S rRNA gene sequence of strain B2 showed its homology lower than 98.7% with those sequences of the other bacteria whose 16S rRNA gene sequences have been reported. Fatty acid composition of the strain B2 was analyzed and its major fatty acids are summed feature 3(C16:1 ω7c and/or C16:1 ω6c, 22.8%), iso-C15:0 (16.2%), anteiso-C15:0(12.9%), C16:1ω5c(12.4%) and summed feature 4 (iso-C17:1 I/anteiso-C17:1)(9.5%) showing significant differences in fatty acid compositions between strain B2 and the other known Hymenobacter species. DNA sequence of 16S rRNA gene of strain B2 was deposited in genbank under accession number OQ318247.
Intraspecific sequence variation was detected by polymerase chain reaction (PCR) and direct sequencing of a 350-nucleotide region of the mitochondrial 12S rRNA gene of two natural populations (Han River and Nakdong River) and one hatchery stock (Jinhae Inland Fisheries Institute) of local strain common carp, one Israeli strain of common carp stock from Pukyong National University (PKU), and one hybrid between Israeli strain of common carp female and local strain common carp male from PKU stock. There is little variation in 350 bases of the mitochondrial 12S rRNA gene sequences among 2 natural and 1 hatchery local strain common carp populatins, representing abut 7 to 20 nucleotide differences (less than 6%). The sequence of specimens from Han River was more similar to that from Nakdong River (identity=98.0%) than to that from Jinhae Inland Fisheries Institute (identity=96.3%). Sequence variation between Israeli strain and wild local strain common carp was higher than the variation within natural stocks. The level of variation was ranged from 15.7 to 17.7%. The hybrid showed very similar nucleotide4 sequence of 12S rRNA gene to the sequence of Israeli strain with the identity of 98.9%.
Cho, Bongrae;Kim, Sang Bumn;Lee, Younghoon;Park, Inwon
Journal of the Korean Chemical Society
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v.39
no.9
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pp.734-740
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1995
The primary and secondary structures of Xanthomonas palargonii 5S rRNA were determined. The higher order structure of the 5S rRNA was also analysed using several ribonucleases and chemical probes, such as ethylnitrourea, Pb2+, dimethylsulfate and diethyl pyrocarbonate. Ethylnitrourea was used for probing the phosphate groups involved in the tertiary interactions in the 5S rRNA. Nucleotides G72, A73, G75, A78, G98, G100 and A101 in unstable helical region d, nucleotides C36, C37, A39, and C41 in loop c, nucleotides A29 and G33 in stem C became resistant to ethylnitrourea modification in the presence of Mg2+. On the basis of findings from chemical and enzymatic studies, and also Pb2+-induced cleavages, it was concluded that region b-C and unstable helical region d may act as hinges in the folding of 5S rRNA.
Because of an increased number of Acanthamoeba keratitis (AK) along with associated disease burdens, medical professionals have become more aware of this pathogen in recent years. In this study, by analyzing both the nuclear 18S small subunit ribosomal RNA (18S rRNA) and mitochondrial 16S rRNA gene loci, 27 clinical Acanthamoeba strains that caused AK in Japan were classified into 3 genotypes, T3 (3 strains), T4 (23 strains), and T5 (one strain). Most haplotypes were identical to the reference haplotypes reported from all over the world, and thus no specificity of the haplotype distribution in Japan was found. The T4 sub-genotype analysis using the 16S rRNA gene locus also revealed a clear subconformation within the T4 cluster, and lead to the recognition of a new sub-genotype T4i, in addition to the previously reported sub-genotypes T4a-T4h. Furthermore, 9 out of 23 strains in the T4 genotype were identified to a specific haplotype (AF479533), which seems to be a causal haplotype of AK. While heterozygous nuclear haplotypes were observed from 2 strains, the mitochondrial haplotypes were homozygous as T4 genotype in the both strains, and suggested a possibility of nuclear hybridization (mating reproduction) between different strains in Acanthamoeba. The nuclear 18S rRNA gene and mitochondrial 16S rRNA gene loci of Acanthamoeba spp. possess different unique characteristics usable for the genotyping analyses, and those specific features could contribute to the establishment of molecular taxonomy for the species complex of Acanthamoeba.
The sequences of the cytoplasmic 5S rRNAs(EMBL accession number X73589 and X73890) from two polupores, Ganoderma applanatum and Schizopora paradoxa, were determined by the direct chemical method for sequencing RNA and compared to the sequences of 9 reported mushrooms. 5S rRNAs of Ganoderma applanatum and Schizopora paradoxa consisted of 118 bases and fit the secondary structure model of the 5S rRNAs of basidiomycetes proposed by Huysmans et al. Based on Kimura’s K_nuc values, the closest fungus to Ganoderma applanatum was Ceratobasidium cornigerum and the one to Schizopora paradoxa was Bjerkandera adusta. When the secondary structures of 5S rRNAs of 11 mushrooms were compared the base substitution occurred at helix regions more than at loop regions. When a phylogenetic tree was constructed using the Neighbor program of the PHYLIP package, it partially discriminated and separated the mushrooms of the Hymenomycetes by the order.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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