• Biomolecules & Therapeutics
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• 제6권1호
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• pp.31-36
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• 1998

Capsular polysaccharides (CPs) from Streeptococcus pneumoniae were examined for the ability to induce secretory responses in a pure population of peritoneal macrophages. The highly purified CPs were able to affect the macrophage, ie, secretion of tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$) and nitrite. As after stimulation with CPs, secretion of TNF-u induced by these CPs reached its maximum within the first few hours of the interaction, while secretion of nitrite was increased with time. In addition, production of TNF-$\alpha$ and nitrite was increased in a dose-dependent manner. In the presence of indomethacin, CP-stimulated TNF-$\alpha$ production was not altered. In contrast, LPS with indomethacin stimulated 24.5% more TNF-$\alpha$ than LPS alone, suggesting that the intracellular signaling processes for TNF production are differentially stimulated by CP and LPS. The results demonstrate that CPs are potent inducer of macrophage secretory activities.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제45권4호
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• pp.861-869
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• 1998

연구배경: 조식의 손상에의한 염증반응후 회복과정에서 정상조직으로 환원되지 않고 일부는 결체조직으로 대체되어 섬유화가 일어난다. 이 비정상적 섬유화에 의해 섬유화증이 일어나 조직의 원래 기능을 상설하기도 한다. 이때 염증에 관계되는 세포로부터 분비된 여러종류의 cytokine들이 섬유모세포의 증식과 교원질 합성을 조절한다. 이에 관계된 cytokine들의 상호 관련성과 섬유모세포증식에의 영향을 알아내어 조절함으로써 섬유화증을 예방하고 치료하는데 도움을 줄 수 있다. 본 연구에서는 proinflammatory cytokine인 TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6와 섬유모세포의 증식에 큰 영향을 미치는 TGF-$\beta$의 상호 관련성을 알아보고자 하였다. 방 법: 섬유모세포는 사람 태아의 섬유모세포주인 MRC-5를 사용하였으며, 0, 0.5, 1, 5, 10, 20%의 우태아 혈청을 첨가하여 1, 2, 3, 4, 5일째의 MRC-5 증식을 측정하여, 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지시킬 수 있는 배양액중 혈청농도를 먼저 확정한 후, TGF-$\beta$, TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6를 각각 RPMI 배지에 첨가하여 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 보온기에서 96 시간동안 배양하여 0.5 % naphthol blue black으로 염색한 뒤, 50mM의 NaOH로 naphthol blue black을 유리시켜 630nm에서의 분광흡수를 잼으로써 MRC-5의 수를 측정하였다. 또한 TGF-$\beta$와 다른 cytokine의 관련성을 알아보기위해 TGF-$\beta$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였으며, TNF-$\alpha$와 IL-1$\beta$, IL-6의 상호 관련성을 알아보기 위해 TNF-$\alpha$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양한 뒤 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였고, 마지막으로 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$의 섬유모세포 증식에 미치는 상호 관련성을 알아보기 위하여 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$를 함께 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, MRC-5의 수를 역시 통일한 방법으로 측정하였다. 결 과: 1. 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지할 수 있는 배양액중 혈청 농도를 측정한 결과, 0.5% 혈청 농도에서 MRC-5의 증식이 50% 증가된 상태로 배양 6일째 까지 유지되었다. 따라서 이후의 실험에서 사용된 배양액에는 0.5%의 우태아혈청을 포함시켰다. 2. 각 cytokine이 MRC-5 증식에 미치는 영향 0.5%의 우태아혈청만이 있는 상태에서의 MRC-5 증식 정도를 100%로 기준하였을 때, IL-1$\beta$는 50 ng/ml의 농도에서만 45%의 증식 촉진효과를 보였고, IL-6는 영향이 없었으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 농도에 의존성을 보이며 MRC-5의 증식을 최고 160% 까지 증가시켰다. 3. TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능증가에 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$가 미치는 영향 50 ng/ml의 TGF-$\beta$ 단독 자극에 비하여, IL-1$\beta$ 혼합배양시 농도에 의존성으로 보이며 최고 64% 까지, TNF-$\alpha$ 혼합배양시 농도에 의존성을 보이며 최고 159% 까지 MRC-5의 증식을 증가시켰다. IL-6는 약한 억제효과를 보였으나 TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 영향을 미치지 못하였다. 4. TNF-$\alpha$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 IL-1$\beta$, IL-6가 미치는영향 50 ng/ml의 TNF-$\alpha$ 단독자극에 비하여, IL-1$\beta$을 혼합 배양하였을때 농도에 의존성을 보이며 최고 50%까지 MRC-5의 증식을 억제하였고, IL-6는 영향을 미치지 못하였다. 5. TNF-$\alpha$와 TGF-$\beta$의 MRC-5 증식능 증가에서의 상호관련성 50 ng/ml의 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 MRC-5의 증식을 각각 89%, 135% 증가시켰으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$ 공존시에는 MRC-5의 증식을 222% 증가시켰다. 결 론: TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$, IL-1$\beta$의 순서로 MRC-5에 대한 증식 자극효과가 있으며 IL-6는 증식을 억제하는 효과가 있었다. TGF-$\beta$의 MRC-5에 대한 증식 자극효과는 IL-1과 TNF-$\alpha$에 의해 첨가효과를 관찰할 수 있었고, TNF-$\alpha$의 MRC-5 증식 자극효과는 IL-1$\beta$에 의하여 억제되었다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제14권8호
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• pp.4765-4768
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• 2013

Aims: This study was conducted to evaluate the levels of TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-8 and VEGF in serum of patients with non- small cell lung cancer, for assessing their possible diagnostic and prognostic roles. Methods: We enrolled 48 patients newly diagnosed with non-small cell lung cancer and 40 healthy controls. TNF- ${\alpha}$, IL-6 and IL-8 levels were measured in the serum of all the subjects with specific radioimmunoassay kits, while EGF was analyzed by sandwich enzyme immunoassay techniques. Results: A statistically significant difference was observed between lung cancer patients and the control group regarding the values of TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-8 and VEGF in serum. Moreover, TNF-${\alpha}$, IL-8 and VEGF levels were higher in patients with advanced stages compared to early stages. In addition, higher serum levels of TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-8 and VEGF were found in smokers than in non-smokers, both in patients and controls. Conclusion: Serum levels of TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-8 and VEGF were all elevated in lung cancer patients, suggesting that inflammatory cytokines could be jointly used as a screening tool. Though TNF-${\alpha}$, IL-8 and VEGF levels were related to advanced disease, long-term survival studies of NSCLC patients should be performed to confirm whether they can act as biomarkers of advanced disease. In addition, smoking would be an important contributor to the processes of inflammation and lung cancer.

• Journal of Chest Surgery
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• 제33권1호
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• pp.1-6
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• 2000

Background: TNF-$\alpha$ plays a major role in producing left ventricular dysfunction cardio-myopathy pulmonary edema and inhibits the compensatory mechanism of congestive heart failure. IL-6 is an acute reactant of immune reaction and also known to control immune reaction but its function in the myocyte was not clearly investigated. Author's performed this experiment to investigate the contents of TNF-$\alpha$ and IL-6 on the assumption that TNF-$\alpha$ and IL-6 may reside in nonfailing heart that has gone cardiac surgery and play some role in cardiac function. Material and Method : Right auricular tissues were sampled from 12 patients who had undergone total corrective surgery for both congenital and acquired heart diseases from January 1998 to June 1998 in Kosin Universcfy Gospel hospital. The quantitive analysis of TNF-$\alpha$ and IL-6 were assessed by ELISA method in right auricular tissue. Hemodynamic values about the pressure of ventricle atrium aorta pulmonary artery and cardiac index pulmonary and systemic vascular resistance and cardiac output were measured by echocardiography and cardiac catheterization and biochemical analyses of LDH & AST were done before operation. statistical analysis was by Paired Student t-test. Patients were divided into children(under 15 years olds) and adults groups and the data was compared beween two groups. Conclusion: Mild pulmonary hypertension and increased pulmonary vascular resistance were existed in both group. The contents of tissue TNF-$\alpha$ IL-6 in each group were independent of each data.

• Korean Journal of Acupuncture
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• 제23권1호
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• pp.37-44
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• 2006

Objective : To investigate the effects of Poncirus trifoliata Pharmacopuncture on lowering lipid and contents of serum tumor necrosis $factor-{\alpha}$ $(TNF-{\alpha})$ and interleukin-6 (IL-6) in hyperlipidemic rats. Methods : Triglyceride, total cholesterol, $TNF-{\alpha}$, and IL-6 levels in Poncirus trifoliata Pharmacopuncture groups were compared with those in the control group. Results : Concentration of triglyceride and total cholesterol in plasma was decreased in the Poncirus trifoliata Pharmacopuncture groups. In Poncirus trifoliata Pharmacopuncre groups, plasma LDL-cholesterol showed a lower value and HDL-cholesterol showed a higher value than those of the control group. Contents of $TNF-{\alpha}$ was decreased in the Poncirus trifoliata Pharmacopuncture groups. Contents of IL-6, however, were not significantly different. Conclusions : The results suggest that Poncirus trifoliata Pharmacopuncture may have an impact on lipid metabolism to potentially prevent development of diabetes mellitus and accompanying cerebrovascular diseases.

• 대한한의학방제학회지
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• 제12권1호
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• pp.209-223
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• 2004

Objective: This study was conducted to investigate the effects of Coptidis Rhizoma on the plasma IL-6 and $TNF-{\alpha}$ level in mice by intracerebroventricular(I.C.V.) injection of Lipopolysaccharide (LPS). Method: 6 mice were assigned to each of the Normal group, the Control group, and the individual Experimental groups. In the Normal group only saline was administered intragastrically, and in the Control group LPS was injected intracerebroventricularly 1 hr after intragastric administration of saline. In the Experimental groups Coptidis Rhizoma(0.5g/kg, 1.0g/kg, 3.0g/kg) was administered intragastrically to mice 1 hr prior to LPS (100ng/mouse) I.C.V. Injection. To measure the plasma IL-6 and $TNF-{\alpha}$ level of mice, their blood samples were collected from retro-orbital venous plexus, immediately centrifuged at $4^{\circ}C$, and plasma was removed and stored frozen at $-83^{\circ}C$ for later determination of plasma IL-6 and $TNF-{\alpha}$. Result: 1. LPS I.C.V. Injection increased plasma IL-6 level significantly in a dose-dependent manner compared with Normal group. (P<0.01) The plasma IL-6 concentration reached a significant maximal level about 1 hr after LPS(100ng/mouse) I.C.V. Injection.(P<0.001) 2. Both the 0.5g/kg(Sample A) and 1.0g/kg(Sample B) groups to which Coptidis Rhizoma was administered intragastrically 1 hr prior to LPS(100ng/mouse) I.C.V. Injection showed insignificant lower plama IL-6 level in 1 hr than Control group(P>0.05), and 3.0g/kg group(Sample C) conversely showed higher plama IL-6 level than Control group. 3. LPS I.C.V. Injection increased plasma $TNF-{\alpha}$ level significantly in a dose-dependent manner compared with Normal group.(P<0.05) The plasma $TNF-{\alpha}$ concentration reached a significant maximal level about 1 hr after LPS(100ng/mouse) I.C.V. Injection.(P<0.001) 4. All Sample groups(0.5g/kg, 1.0g/kg, and 3.0g/kg) to which Coptidis Rhizoma was administered intragastrically with each constituent-dose 1 hr prior to LPS(100ng/mouse) I.C.V. Injection showed significant lower $TNF-{\alpha}$ plama level in 1 hr than Control group.(P<0.001) These data revealed that Coptidis Rhizoma might have anti inflammatory effect by reducing the plasma $TNF-{\alpha}$ level in a dose dependent manner in mice LPS I.C.V. Injection.

• 생명과학회지
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• 제20권8호
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• pp.1276-1280
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• 2010

본 연구에서는 berberine이 전염증성사이토카인의 생성에 미치는 효과를 관찰하기 위하여 TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, 그리고 IL-6생성을 정량하였다. 마우스 비장세포에 berberine을 작용시켰을 때 TNF-$\alpha$의 생성이 억제되었다. 또한 마우스 생체 내에서 LPS에 의한 TNF-$\alpha$의 상승이 berberine에 의해서 억제됨을 알 수 있었다. IL-$1{\beta}$의 생성에 있어서도 berberine을 고농도(3.0 ${\mu}g/ml$)로 작용시켰을 때 억제되었고 LPS에 의한 IL-$1{\beta}$의 상승이 고농도의 berberine에 의해서 억제되었다. IL-6의 생성은 berberine에 의해서 억제되었으며 낮은 berberine 농도(0.3 ${\mu}g/ml$)에서 LPS에 의한IL-6의 생성이 억제되었다. 따라서 이러한 결과들은 berberine이 TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, 그리고 IL-6와 같은 전염증성사이토카인의 생성을 하향 조절할 가능성을 시사한다 하겠다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제45권4호
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• pp.846-860
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• 1998

연구배경: 내독소는 생체 내에서 단구와 내피세포에 강한 자극을 주나 호중구, 림프구, 호염기구, 섬유모세포 등 여러 세포에도 자극효과가 있어 염증반응이 시작된다. 그중 대식세포는 내독소의 자극을 받아 활성화되면 interleukin-1 (IL-1), IL-6, tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$)를 분비하여 조직손상을 일으킨다. 내독소의 작용기전은 CD14 의존성 경로와 비의존성 경로의 두 개로 나뉘어진다. 체내로 들어온 내독소는 혈청 내에서 내독소 운반에 관여하는 LPS-binding protein(LBP)과 결합하여 혈중내에서 세포와 결합되거나 조직으로 이동되어 조직내 세포와 결합하게 된다. 그러나 고농도의 LPS는 CD14항원에 비의존적으로 대식세포를 자극 할 수 있는 것으로 알려져 있다. 현재까지 LPS자극에 의한 대식세포의 CD14 항원 의존성 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$의 형성과정은 많이 밝혀져 있으나, 내독소에 의한 TGF-$\beta$의 형성 여부는 밝혀져 있지 않으며, CD14 항원 비의존성으로 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$가 형성되는 과정도 별로 밝혀져 있지 않다. 본 연구에서는 혈청이 없는 상태 (LBP가 없는 상태)에서, 즉 LPS 자극시 LBP-CD14 비의존성으로 말초혈액단핵구에서 형성된 proinflammatory cytokines인 IL-1, IL-6, TNF-$\alpha$과 섬유화 cytokine인 TGF-$\beta$의 생성유무를 규명하고자 하였다. 방 법: 정상인의 헤파린 처리된 말초혈액정맥혈을 비중 1.077의 Ficoll-Hypaque 용액 위에 중첩시킨 후 500g에서 30분간 원심분리하여 말초혈액단핵구를 얻었다. 분리된 말초혈액단핵구를 우태아혈청이 없는 RPMI에 부유시킨 후 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 보온기에서 0.1 ${\mu}g$, 1 ${\mu}g$, 10 ${\mu}g$, 100 ${\mu}g/ML$의 LPS와 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 시간 혼합 배양 후 상층액을 분리하여 IL-6, TNF-$\alpha$, TGF-$\beta$의 측정 cytokines의 양을 bioassay로 측정하였다. 세포층은 slide에 고정시킨 후 단 클론 항체를 이용한 이중 면역조직화학염색법과 RNA probe를 이용한 in situ hybridization에 이용하였다. 결 과: 실험사약내 내독소 존재 여부에 대한 검증결과 내독소 함유량은 10 ng/mL 이하로 되어 있어 본 실험에서는 10 ng/mL 이상의 농도로 실험을 하였기 때문에 오염된 내독소는 실험에 영향이 없었을 것으로 사료되었다. 말초혈액단핵구에서 LPS 자극에 의하여 IL-6는 1시간째부터 형성되기 시작하였으며 96 시간까지 지속적으로 상승하였고 LPS용량의존성으로 형성됨을 알 수 있었다. TNF-$\alpha$는 LPS 자극 4시간째부터 상승하기 시작하여 시간이 갈수록 생성양은 증가하며 72 시간째까지 지속적으로 형성되었다. TGF-$\beta$형성도 LPS 용량에 의존성을 보이며 8시간째 일차로 TGF-$\beta$의 형성이 증가 한 후 12 시간째는 오히려 감소하였다가 시간이 지남에 따라 다시 증가하여 2차로 96 시간에 최대 형성을 보였다. 각각 cytokine의 24시간째 생성양은 IL-6의 경우 $1{\times}10^5/mL$의 말초혈액단핵구에서 10 ${\mu}g/mL$의 LPS에 의해서 19.8 ng 이 생성되었고 LPS 자극이 없는 상태의 자연생성능도 3.2 ng이었으며, $1{\times}10^6/mL$의 말초혈액단핵구에 의해서 자연 생성양은 증가하여 24시간째에 0.38 ng/mL, 10명/mL의 농도에서 24시간째 4.1 ng/mL의 TNF-$\alpha$의 생성능을 보였다. TGF-$\beta$의 경우 $2{\times}10^6/mL$의 말초혈액단핵구에 의하여 34.4 pg/mL가 생성되었고 자연생성능은 5.2 pg/mL의 생성농을 보였다. 말초혈액단핵구의 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$, TGF-$\beta$ 단백과 m-RNA 발현 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$단백은 주로 단구세포에서, TGF-$\beta$ 단백은 단구세포와 림프구에서 발현되었으며, CD14항원 발현과는 상관이 없었다. TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6, TGF-$\beta$ m-RNA 양성세포는 주로 세포질이 풍부한 것으로 보아 단구세포로 사료되었다. TGF-$\beta$의 경우 단구세포외에도 세포질이 적은 림프구에서도 약하게 양성반응을 보여 링프구에서도 분비될 가능성을 보여 주었다. 결 론: 내독소로 말초혈액 단핵구를 자극시 IL-6, TNF-$\alpha$는 조기에 분비되기 시작하며 TGF-$\beta$는 후기에 분비되기 시작하여 96시간까지 지속적으로 분비된다. 주 분비세포는 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$의 경우 단구세포가 되며 TGF-$\beta$도 단구세포가 주세포가 되나 림프구도 분비에 관여한다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제36권1호
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• pp.35-43
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• 2009

목 적: 정액 내 tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) 농도와 정자 DNA 손상 및 정액 검사 소견과의 관련성을 평가하고자 하였다. 연구방법: 정액 표본은 45명의 건강한 남성에서 자위에 의하여 획득하였다. 정자의 상태는 컴퓨터 정액 분석기를 이용하여 판정하였으며, 두부의 DNA 손상은 TUNEL 분석방법에 의해 측정하였다. TNF-${\alpha}$ 농도는 동결-융해된 정장액에서 ELISA법으로 측정하였다. 결 과: 정자 DNA 손상율은 1.9%에서 53% (mean ${\pm}$ SD, 12.4${\pm}$9.6%)로 매우 광범위하게 나타났다. 단변량분석에 의하면 DNA 손상 정도와 정자의 농도, 운동성과는 관련이 없었으나, 직진운동성 (linearity)과는 음의 상관 관계를 나타내었으며 (r=-0.325, p=0.03) 연구 대상 남성의 연령과는 양의 상관 관계를 나타내었다 (r=0.484, p=0.001). 정액내에 존재하는 TNF-${\alpha}$ (>1 pg/mL)는 연구 대상 남성의 73.3% (33/45)에서 검출되었으며 평균 농도는 4.9 pg/mL, 범위는 1.1에서 22.6 pg/mL이었다. 정액 검사 상의 정자 상태와 정자 DNA 손상과는 유의한 관련성이 나타나지 않았다. 결 론: 본 연구에서는 정자 DNA의 손상이 남성의 연령과 관련성이 있음을 확인하였으나, TNF-${\alpha}$와의 관련성은 확인할 수 없었다.

• BMB Reports
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• 제29권6호
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• pp.530-534
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• 1996

Astrocyte are the major glial cell type in the central nervous system (CNS), and analogous to macrophage, mediates the number of immune responses such as production of cytokines including tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) upon activation. $TNF-{\alpha}$ has been implicated in neuroimmunological disorders through killing oligodendrocytes and thus causing demyelination. It has been previously demonstrated that mitogen-activated T cells synthesized a 26 kDa precursor form of $TNF-{\alpha}$ which is bound to the surface of a membrane, and is later secreted as a 17 kDa mature version. In order to examine whether astrocytes would produce the transmembrane form of $TNF-{\alpha}$, astrocytes were stimulated with biological stimuli and the membrane form of $TNF-{\alpha}$ was analyzed by Western blot and FACS analysis. When astrocytes are stimulated with lipopolysaccharide (LPS), $IFN-{\gamma}/LPS$, or $IFN-{\gamma}/IL-1{\beta}$, they were able to express a membrane-anchored $TNF-{\alpha}$ of approximately 26 kDa protein which was immunoreactive to an $anti-TNF-{\alpha}$ antibody, whereas unstimulated astrocytes or astrocytes treated with $IFN-{\gamma}$ or $IL-1{\beta}$ alone was not. Our FACS data were also consistent with the immunoblot analysis. Our result suggests that the membrane form of $TNF-{\alpha}$ expressed by activated astrocytes may cause local damage to oligodendrocytes by direct cell-cell contact and contribute to demyelination observed in multiple sclerosis (MS) and experimental allergic encephalomyelitis (EAE).